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H9N2亚型禽流感病毒HA基因真核和原核表达及其单因子血清的制备

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-11页
1 前言第11-26页
   ·禽流感概述第11-16页
     ·禽流感的流行病学特点第11-12页
     ·禽流感的主要症状和病变第12页
     ·诊断第12-14页
     ·鉴别诊断第14页
     ·治疗第14-15页
     ·预防第15-16页
   ·禽流感病毒第16-23页
     ·禽流感病毒的发现第16页
     ·禽流感病毒的分类与命名第16页
     ·流感病毒基因组结构及其编码蛋白第16-21页
     ·流感病毒的复制第21-22页
     ·禽流感病毒抗原性的改变第22-23页
     ·流感病毒的理化特性第23页
   ·HA 基因特点第23-25页
     ·HA 基因序列第23-24页
     ·HA 编码的蛋白质第24页
     ·HA 蛋白的生物学功能第24-25页
   ·研究目的和意义第25-26页
2 材料与方法第26-48页
   ·材料第26-28页
     ·病毒株第26页
     ·菌株和质粒载体第26-27页
     ·细菌培养基的试剂第27页
     ·动物和细胞第27页
     ·细胞培养材料第27页
     ·转染试剂第27页
     ·其它试剂第27-28页
   ·实验方法第28-48页
     ·主要溶液的配制第28-29页
     ·禽流感 HA 基因的钓取第29-35页
     ·重组真核表达质粒的构建第35-37页
     ·重组真核表达质粒在 CEF 上的表达第37-38页
     ·HA 基因上、中、下段克隆载体的构建第38-42页
     ·HA 基因上、中、下段原核表达载体的构建第42-44页
     ·重组菌的诱导表达第44页
     ·western blot第44-45页
     ·重组蛋白的可溶性分析第45-47页
     ·重组原核表达载体 HA 蛋白的大量表达及定量第47-48页
     ·AIV-HA 单因子血清的获得第48页
3 结果第48-59页
   ·AIV-HA 基因的真核表达质粒第48-51页
     ·AIV LG1 株 HA 基因的 PCR 扩增第48-49页
     ·克隆载体的 PCR 鉴定第49-50页
     ·序列测定与分析第50页
     ·真核表达质粒的 PCR 鉴定第50页
     ·真核表达质粒的酶切鉴定第50-51页
   ·AIV-HA 基因的原核表达载体的构建第51-54页
     ·AIV LG1 株 HA(上、中、下)基因的 PCR 扩增第51-52页
     ·克隆载体的 PCR 鉴定第52-53页
     ·序列测定与分析第53页
     ·原核表达载体的 PCR 鉴定第53页
     ·序列鉴定第53-54页
   ·真核表达质粒 pcDNA3.1-A-HA 在 CEF 上的表达第54页
   ·重组质粒 pET-32a(+)-HA(上、中、下)阳性转化菌裂解物的 SDS-PAGE第54-56页
   ·western blot 检测第56-57页
   ·两种单因子血清间接免疫荧光反应效价比较第57-59页
4 讨论第59-61页
   ·HA 基因的提取第59页
   ·HA 基因真核表达质粒的构建第59-60页
   ·HA 基因真核表达质粒在 CEF 上的表达第60页
   ·HA 蛋白的原核表达第60页
   ·小鼠免疫第60-61页
   ·两种 HA 单因子血清的 IFA 特异性比较第61页
   ·两种 HA 单因子血清的应用第61页
5 结论第61-62页
参考文献第62-69页
个人简介第69-70页
致谢第70-71页
硕士期间发表的论文第71页

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