中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-26页 |
·禽流感概述 | 第11-16页 |
·禽流感的流行病学特点 | 第11-12页 |
·禽流感的主要症状和病变 | 第12页 |
·诊断 | 第12-14页 |
·鉴别诊断 | 第14页 |
·治疗 | 第14-15页 |
·预防 | 第15-16页 |
·禽流感病毒 | 第16-23页 |
·禽流感病毒的发现 | 第16页 |
·禽流感病毒的分类与命名 | 第16页 |
·流感病毒基因组结构及其编码蛋白 | 第16-21页 |
·流感病毒的复制 | 第21-22页 |
·禽流感病毒抗原性的改变 | 第22-23页 |
·流感病毒的理化特性 | 第23页 |
·HA 基因特点 | 第23-25页 |
·HA 基因序列 | 第23-24页 |
·HA 编码的蛋白质 | 第24页 |
·HA 蛋白的生物学功能 | 第24-25页 |
·研究目的和意义 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-48页 |
·材料 | 第26-28页 |
·病毒株 | 第26页 |
·菌株和质粒载体 | 第26-27页 |
·细菌培养基的试剂 | 第27页 |
·动物和细胞 | 第27页 |
·细胞培养材料 | 第27页 |
·转染试剂 | 第27页 |
·其它试剂 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-48页 |
·主要溶液的配制 | 第28-29页 |
·禽流感 HA 基因的钓取 | 第29-35页 |
·重组真核表达质粒的构建 | 第35-37页 |
·重组真核表达质粒在 CEF 上的表达 | 第37-38页 |
·HA 基因上、中、下段克隆载体的构建 | 第38-42页 |
·HA 基因上、中、下段原核表达载体的构建 | 第42-44页 |
·重组菌的诱导表达 | 第44页 |
·western blot | 第44-45页 |
·重组蛋白的可溶性分析 | 第45-47页 |
·重组原核表达载体 HA 蛋白的大量表达及定量 | 第47-48页 |
·AIV-HA 单因子血清的获得 | 第48页 |
3 结果 | 第48-59页 |
·AIV-HA 基因的真核表达质粒 | 第48-51页 |
·AIV LG1 株 HA 基因的 PCR 扩增 | 第48-49页 |
·克隆载体的 PCR 鉴定 | 第49-50页 |
·序列测定与分析 | 第50页 |
·真核表达质粒的 PCR 鉴定 | 第50页 |
·真核表达质粒的酶切鉴定 | 第50-51页 |
·AIV-HA 基因的原核表达载体的构建 | 第51-54页 |
·AIV LG1 株 HA(上、中、下)基因的 PCR 扩增 | 第51-52页 |
·克隆载体的 PCR 鉴定 | 第52-53页 |
·序列测定与分析 | 第53页 |
·原核表达载体的 PCR 鉴定 | 第53页 |
·序列鉴定 | 第53-54页 |
·真核表达质粒 pcDNA3.1-A-HA 在 CEF 上的表达 | 第54页 |
·重组质粒 pET-32a(+)-HA(上、中、下)阳性转化菌裂解物的 SDS-PAGE | 第54-56页 |
·western blot 检测 | 第56-57页 |
·两种单因子血清间接免疫荧光反应效价比较 | 第57-59页 |
4 讨论 | 第59-61页 |
·HA 基因的提取 | 第59页 |
·HA 基因真核表达质粒的构建 | 第59-60页 |
·HA 基因真核表达质粒在 CEF 上的表达 | 第60页 |
·HA 蛋白的原核表达 | 第60页 |
·小鼠免疫 | 第60-61页 |
·两种 HA 单因子血清的 IFA 特异性比较 | 第61页 |
·两种 HA 单因子血清的应用 | 第61页 |
5 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-69页 |
个人简介 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
硕士期间发表的论文 | 第71页 |