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猪轮状病毒NSP4蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位的鉴定

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 绪论第14-22页
   ·轮状病毒概述第15-19页
     ·轮状病毒的形态结构第15页
     ·轮状病毒的理化特性第15页
     ·轮状病毒的基因组结构特点第15-16页
     ·轮状病毒结构蛋白及功能第16-17页
     ·轮状病毒非结构蛋白及功能第17-19页
     ·流行病学第19页
   ·轮状病毒抗原表位研究进展第19-20页
   ·抗原表位研究方法第20-21页
     ·T 细胞抗原表位研究方法第20页
     ·B 细胞抗原表位研究方法第20-21页
   ·研究目的和意义第21-22页
第二章 轮状病毒 NSP4 蛋白的原核表达第22-32页
   ·材料和方法第22-27页
     ·病毒株、菌种、质粒第22页
     ·主要试剂和设备第22页
     ·限制性内切酶与引物第22-23页
     ·RNA 提取第23页
     ·蛋白原核表达载体的构建第23-25页
     ·NSP4 蛋白的原核表达及 SDS-PAGE 检测第25-27页
     ·NSP4 蛋白的纯化第27页
     ·重组蛋白的 Western Blot 分析第27页
   ·结果第27-30页
     ·NSP4 基因的扩增第27-28页
     ·重组质粒的酶切鉴定第28-29页
     ·表达产物的 SDS-PAGE 分析第29页
     ·蛋白的纯化第29-30页
     ·重组蛋白的 Western Blot 分析第30页
   ·讨论第30-32页
第三章 轮状病毒 NSP4 蛋白单克隆抗体的制备第32-42页
   ·材料和方法第32-38页
     ·主要试剂第32页
     ·细胞及实验动物第32页
     ·主要仪器及设备第32页
     ·MAb 的制备第32-36页
     ·MAb 特性及杂交瘤细胞的鉴定第36-38页
   ·结果第38-41页
     ·间接 ELISA 检测方法的建立第38页
     ·杂交瘤细胞株的建立第38页
     ·抗体效价测定及 MAb 亚类鉴定第38-39页
     ·Western blot 鉴定第39-40页
     ·间接免疫荧光鉴定第40-41页
   ·讨论第41-42页
第四章 轮状病毒 NSP4 蛋白抗原表位的鉴定第42-47页
   ·材料和方法第42-43页
     ·材料第42页
     ·多肽的设计第42页
     ·抗原表位的鉴定第42-43页
     ·抗原表位的保守性及同源性分析第43页
   ·结果第43-45页
     ·蛋白表位预测及短肽设计序列第43-45页
     ·ELISA 筛选抗原表位第45页
     ·抗原表位同源性及保守性分析第45页
   ·讨论第45-47页
第五章 全文结论第47-48页
参考文献第48-54页
致谢第54-55页
作者简介第55页

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