摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 绪论 | 第14-22页 |
·轮状病毒概述 | 第15-19页 |
·轮状病毒的形态结构 | 第15页 |
·轮状病毒的理化特性 | 第15页 |
·轮状病毒的基因组结构特点 | 第15-16页 |
·轮状病毒结构蛋白及功能 | 第16-17页 |
·轮状病毒非结构蛋白及功能 | 第17-19页 |
·流行病学 | 第19页 |
·轮状病毒抗原表位研究进展 | 第19-20页 |
·抗原表位研究方法 | 第20-21页 |
·T 细胞抗原表位研究方法 | 第20页 |
·B 细胞抗原表位研究方法 | 第20-21页 |
·研究目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 轮状病毒 NSP4 蛋白的原核表达 | 第22-32页 |
·材料和方法 | 第22-27页 |
·病毒株、菌种、质粒 | 第22页 |
·主要试剂和设备 | 第22页 |
·限制性内切酶与引物 | 第22-23页 |
·RNA 提取 | 第23页 |
·蛋白原核表达载体的构建 | 第23-25页 |
·NSP4 蛋白的原核表达及 SDS-PAGE 检测 | 第25-27页 |
·NSP4 蛋白的纯化 | 第27页 |
·重组蛋白的 Western Blot 分析 | 第27页 |
·结果 | 第27-30页 |
·NSP4 基因的扩增 | 第27-28页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第28-29页 |
·表达产物的 SDS-PAGE 分析 | 第29页 |
·蛋白的纯化 | 第29-30页 |
·重组蛋白的 Western Blot 分析 | 第30页 |
·讨论 | 第30-32页 |
第三章 轮状病毒 NSP4 蛋白单克隆抗体的制备 | 第32-42页 |
·材料和方法 | 第32-38页 |
·主要试剂 | 第32页 |
·细胞及实验动物 | 第32页 |
·主要仪器及设备 | 第32页 |
·MAb 的制备 | 第32-36页 |
·MAb 特性及杂交瘤细胞的鉴定 | 第36-38页 |
·结果 | 第38-41页 |
·间接 ELISA 检测方法的建立 | 第38页 |
·杂交瘤细胞株的建立 | 第38页 |
·抗体效价测定及 MAb 亚类鉴定 | 第38-39页 |
·Western blot 鉴定 | 第39-40页 |
·间接免疫荧光鉴定 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
第四章 轮状病毒 NSP4 蛋白抗原表位的鉴定 | 第42-47页 |
·材料和方法 | 第42-43页 |
·材料 | 第42页 |
·多肽的设计 | 第42页 |
·抗原表位的鉴定 | 第42-43页 |
·抗原表位的保守性及同源性分析 | 第43页 |
·结果 | 第43-45页 |
·蛋白表位预测及短肽设计序列 | 第43-45页 |
·ELISA 筛选抗原表位 | 第45页 |
·抗原表位同源性及保守性分析 | 第45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
第五章 全文结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
作者简介 | 第55页 |