| 中文摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-17页 |
| 第一章 前言 | 第17-21页 |
| 1 飞蝗概述 | 第17-18页 |
| ·飞蝗分布、特征及生活习性 | 第17页 |
| ·飞蝗为害与防治 | 第17-18页 |
| 2 谷胱甘肽硫转移酶概述 | 第18-20页 |
| ·谷胱甘肽硫转移酶的分类及序列结构特征 | 第18-19页 |
| ·谷胱甘肽硫转移酶的生物功能 | 第19页 |
| ·谷胱甘肽硫转移酶与昆虫抗药性的关系 | 第19-20页 |
| 3 研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因克隆及序列分析 | 第21-33页 |
| 1 实验材料 | 第21-22页 |
| ·供试昆虫 | 第21页 |
| ·供试试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| 2 研究方法 | 第22-23页 |
| ·序列来源及引物设计 | 第22页 |
| ·飞蝗总RNA提取及第一链cDNA合成 | 第22页 |
| ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因5’末端和3’末端cDNA序列扩增 | 第22页 |
| ·RACE-PCR产物回收和纯化 | 第22页 |
| ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因的克隆和测序验证 | 第22-23页 |
| ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因聚类分析 | 第23页 |
| ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶氨基酸序列比对 | 第23页 |
| 3 结果与分析 | 第23-30页 |
| ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶cDNA全长序列信息 | 第23页 |
| ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶氨基酸聚类分析 | 第23-25页 |
| ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶全长序列的克隆 | 第25-26页 |
| ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶氨基酸序列比对分析 | 第26-30页 |
| 4 讨论 | 第30-33页 |
| 第三章 飞蝗谷胱甘肽硫转移酶MRNA表达模式 | 第33-41页 |
| 1 实验材料 | 第33-34页 |
| ·供试昆虫 | 第33页 |
| ·供试试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| 2 研究方法 | 第34-35页 |
| ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因表达引物的设计 | 第34-35页 |
| ·飞蝗不同组织部位及不同发育阶段总RNA的提取、纯化及cDNA合成 | 第35页 |
| ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因在成虫不同不同组织部位的表达 | 第35页 |
| ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因在不同龄期的表达 | 第35页 |
| ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因在卵期不同发育阶段的表达 | 第35页 |
| 3 结果分析 | 第35-38页 |
| ·谷胱甘肽硫转移酶基因在飞蝗成虫不同组织部位的表达 | 第35-36页 |
| ·谷胱甘肽硫转移酶基因在不同龄期的表达分析 | 第36-37页 |
| ·谷胱甘肽硫转移酶基因在卵期不同发育阶段的表达分析 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-41页 |
| 第四章 飞蝗谷胱甘肽硫转移酶原核表达及活性分析 | 第41-53页 |
| 1 研究材料 | 第41-42页 |
| ·供试材料 | 第41页 |
| ·供试试剂 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41-42页 |
| 2 研究方法 | 第42-46页 |
| ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因原核表达引物的设计 | 第42-43页 |
| ·重组质粒的构建 | 第43页 |
| ·重组蛋白的表达验证 | 第43页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第43-44页 |
| ·重组蛋白含量的测定 | 第44页 |
| ·重组蛋白的动力学参数K_m和V_(max)的测定 | 第44-45页 |
| ·重组蛋白对不同底物催化活性的测定 | 第45-46页 |
| ·重组蛋白的谷胱甘肽过氧化物酶活性测定 | 第46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-51页 |
| ·LmGSTs的表达及纯化 | 第46-48页 |
| ·LmGSTs的动力学参数 | 第48-49页 |
| ·LmGSTs对不同底物催化活性分析 | 第49-50页 |
| ·LmGSTs的GPX活性测定 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 结论与展望 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 个人简况及联系方式 | 第65-67页 |
