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构巢曲霉乙醇诱导表达系统的构建及其应用于烟草茎尖生长控制的初步研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-10页
1 文献综述第10-23页
   ·RNA沉默第10-11页
     ·诱导植物RNA沉默的高效设计——反向重复构件第10-11页
     ·RNA沉默在植物中的应用第11页
   ·可控的化学诱导系统第11-12页
   ·构巢曲霉中的alcR转录调节因子第12页
   ·化学诱导系统中的乙醇诱导系统第12-15页
     ·乙醇诱导系统的构成第13页
     ·诱导剂乙醇的外部施加方式和响应浓度第13-14页
     ·乙醇诱导系统的特点和应用第14页
     ·乙醇诱导系统的完善和发展第14-15页
   ·植物干细胞第15-17页
     ·植物茎尖分生组织及其结构第15-16页
     ·茎尖分生组织中WUS/CLV反馈调控机制下的WUS基因第16-17页
   ·顶端生长控制系统的RNA沉默对象——ACTIN基因第17-18页
   ·根癌农杆菌转化的瞬时表达第18-20页
     ·农杆菌介导转化第18-19页
     ·农杆菌转化的双元载体系统第19-20页
     ·农杆菌介导的瞬时表达检测第20页
   ·研究的目的、意义第20-23页
     ·实验研究的内容和目的第20-21页
     ·本实验研究的意义和创新第21-23页
2 顶端生长控制系统的研究第23-44页
   ·材料、试剂和仪器第23-27页
     ·植物材料第23页
     ·菌株、质粒第23页
     ·主要缓冲液和培养基第23-27页
     ·主要仪器设备第27页
   ·试验方法第27-38页
     ·构建植物顶端生长控制系统所需基因组件的获取及测序验证第27-34页
     ·生长点控制基因系统构建方案第34-36页
     ·乙醇诱导的瞬时表达检测系统构建方案第36-38页
   ·实验技术路线第38-39页
   ·载体构建过程示意图举例第39-44页
     ·农杆菌介导的叶盘法转化烟草第39-42页
     ·农杆菌PCA3301-AA转化烟草及转基因烟草的PCR检测第42-44页
3 实验结果分析第44-55页
   ·培养构巢曲霉第44页
   ·构巢曲霉RNA的电泳检测第44-45页
   ·烟草瞬时转染后的共培养第45页
   ·乙醇系统中各组件的测序分析第45-47页
   ·构建各步骤的酶切结果分析第47-50页
   ·GUS染色结果分析第50-53页
   ·叶片控制系统转化烟草获得阳性转基因植株第53-55页
     ·农杆菌转化烟草后组织培养第53页
     ·转基因烟草苗的培养第53-54页
     ·转基因烟草苗的PCR检测第54-55页
4 结论和讨论第55-58页
   ·两套载体系统的构建第55页
   ·乙醇系统的稳定可操作性第55-56页
   ·有待验证的理论问题第56页
   ·瞬时转染和稳定转染第56-58页
5 展望第58-60页
   ·顶端生长抑制系统转基因苗的田间实验第58页
   ·微生物基因库的更多开发利用第58-59页
   ·茎端生长控制系统到无花植株第59-60页
参考文献第60-63页
致谢第63-64页
个人简历和研究成果第64页

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