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尼罗罗非鱼血清免疫球蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

目录第1-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-10页
第一章 文献综述第10-18页
   ·尼罗罗非鱼研究现状第10-11页
     ·尼罗罗非鱼生长动力学研究第10页
     ·尼罗罗非鱼常见疾病及防治第10-11页
   ·硬骨鱼免疫系统研究概况第11-15页
     ·硬骨鱼免疫系统概述第11-12页
     ·硬骨鱼免疫球蛋白分子结构第12页
     ·硬骨鱼免疫球蛋白种类第12-14页
     ·免疫球蛋白多样性产生机制第14-15页
   ·单克隆抗体在鱼类免疫学研究中的应用第15-18页
     ·单克隆抗体在淋巴细胞研究中的应用第15-16页
     ·单克隆抗体在免疫球蛋白研究中的应用第16页
     ·单克隆抗体在免疫球蛋白检测中的应用第16页
     ·单克隆抗体在鱼类疾病防治中的应用第16-18页
第二章 绪论第18-20页
   ·选题背景及意义第18页
   ·研究目的和研究内容第18-20页
     ·研究目的第18-19页
     ·主要研究内容第19-20页
第三章 罗非鱼血清免疫球蛋白的纯化及理化性质初步鉴定第20-28页
   ·引言第20页
   ·材料和方法第20-24页
     ·实验材料第20-21页
     ·尼罗罗非鱼血清制备第21页
     ·Protein A亲和层析纯化罗非鱼血清Ig第21页
     ·MBP亲和层析纯化罗非鱼血清Ig第21页
     ·Sepharose-4B凝胶层析纯化罗非鱼血清Ig第21-22页
     ·辛酸-硫酸铵沉淀法纯化罗非鱼血清Ig第22-23页
     ·SDS-PAGE检测蛋白纯度第23-24页
     ·蛋白含量测定第24页
   ·实验结果第24-25页
     ·SDS-PAGE检测四种纯化方法结果第24-25页
     ·纯化产物蛋白质含量测定结果第25页
   ·讨论第25-28页
     ·Protein A亲和层析纯化罗非鱼血清Ig第25-26页
     ·MBP亲和层析纯化罗非鱼血清Ig第26页
     ·Sepharose-4B凝胶层析纯化罗非鱼血清Ig第26页
     ·辛酸-硫酸铵沉淀法纯化罗非鱼血清Ig第26-28页
第四章 鼠抗罗非鱼血清免疫球蛋白单克隆抗体的制备及特性分析第28-40页
   ·引言第28页
   ·实验材料第28-29页
     ·实验动物第28页
     ·主要试剂和仪器第28-29页
   ·实验方法第29-33页
     ·小鼠免疫第29页
     ·抗血清效价检测第29页
     ·骨髓瘤细胞的复苏和培养第29页
     ·饲养细胞的制备第29-30页
     ·细胞融合第30页
     ·阳性杂交瘤细胞初筛第30-31页
     ·亚克隆阳性杂交瘤细胞第31页
     ·阳性杂交瘤细胞的冻存及扩大培养第31页
     ·罗非鱼嗜水气单孢菌免疫及免疫血清收集第31页
     ·单克隆抗体识别表位性质分析第31页
     ·Western-blotting分析第31-32页
     ·ELISA检测单克隆抗体特异性第32页
     ·叠加ELISA分析单抗识别表位第32-33页
   ·实验结果第33-36页
     ·免疫鼠抗血清效价检测结果第33页
     ·阳性杂交瘤细胞筛选结果第33页
     ·抗体识别表位性质检测结果第33-34页
     ·Western-blotting检测结果第34-35页
     ·单克隆抗体交叉反反应性检测结果第35页
     ·单抗识别表位叠加ELISA检测结果第35-36页
   ·讨论第36-40页
     ·制备单克隆抗体的影响因素分析第36-37页
     ·单抗识别抗原表位性质分析第37页
     ·Western-blotting结果分析第37-38页
     ·单抗识别表位叠加ELISA结果分析第38页
     ·单抗特异性ELISA结果分析第38-40页
第五章 鼠抗罗非鱼血清免疫球蛋白单克隆抗体的应用第40-46页
   ·引言第40页
   ·实验材料和仪器第40页
     ·实验材料第40页
     ·主要试剂和仪器第40页
   ·实验方法第40-42页
     ·嗜水气单孢菌疫苗制备第40-41页
     ·罗非鱼免疫第41-42页
     ·双抗夹心ELISA检测免疫鱼血清抗体效价第42页
   ·实验结果第42-43页
     ·嗜水气单孢菌革兰氏染色及细菌计数第42-43页
     ·免疫鱼血清效价检测第43页
   ·讨论第43-46页
     ·嗜水气单孢菌的培养及灭活第43-44页
     ·嗜水气单孢菌免疫后鱼体应答规律第44-46页
第六章 全文结论第46-48页
   ·全文结论第46-48页
参考文献第48-56页
附录第56-58页
致谢第58页

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