| 中文摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 缩略语索引 | 第15-16页 |
| 前言 | 第16-27页 |
| 1 蛋白质组学中的分离技术 | 第16-18页 |
| ·双向凝胶电泳技术 | 第16-17页 |
| ·多维液相色谱技术 | 第17-18页 |
| ·微流控芯片技术 | 第18页 |
| 2 蛋白质翻译后修饰研究中的分离富集技术 | 第18-23页 |
| ·磷酸化蛋白质组分离富集技术 | 第18-21页 |
| ·金属氧化物及功能化纳米材料富集法 | 第19页 |
| ·固相金属离子亲和色谱法 | 第19-20页 |
| ·化学衍生富集法 | 第20-21页 |
| ·糖基化蛋白质组分离富集技术 | 第21-23页 |
| ·凝集素亲和技术 | 第21页 |
| ·亲水色谱法 | 第21-22页 |
| ·硼酸亲和法 | 第22页 |
| ·肼化学法 | 第22-23页 |
| 3 本文选题意义 | 第23-24页 |
| 参考文献 | 第24-27页 |
| 第一部分 磷酸化蛋白质/多肽规模化富集鉴定新技术的建立 | 第27-49页 |
| 第一章 新型表面三维波浪状聚合物修饰磷酸锆毛细管柱的制备及在磷酸化蛋白质/多肽规模化富集鉴定中的应用 | 第27-40页 |
| 1 材料与方法 | 第28-31页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·仪器设备 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-31页 |
| ·三维波浪状聚合物修饰的磷酸锆毛细管柱的制备 | 第28-30页 |
| ·标准蛋白质酶切肽段的制备 | 第30页 |
| ·Poly-GMA-ZrPO_3柱负载量的测算 | 第30-31页 |
| ·人肝癌 HepG2 细胞的培养及细胞蛋白质的提取 | 第31页 |
| ·SDS-PAGE 对蛋白质混合物的分离和胶内蛋白质酶解 | 第31页 |
| ·Poly-GMA-ZrPO_3柱对磷酸化肽段富集能力考察 | 第31页 |
| 2 结果与讨论 | 第31-39页 |
| ·Poly-GMA-ZrPO_3柱内聚合物形态及化学基团表征 | 第31-33页 |
| ·透射电镜表征石英毛细管柱内波浪状聚合物形态 | 第32-33页 |
| ·红外光谱对修饰过程中毛细管柱内官能团变化的考察 | 第33页 |
| ·Poly-GMA-ZrPO_3柱富集性能考察 | 第33-39页 |
| ·Poly-GMA-ZrPO_3柱对磷酸化肽段富集能力的表征 | 第33-35页 |
| ·Poly-GMA-ZrPO_3柱选择性考察 | 第35页 |
| ·Poly-GMA-ZrPO_3柱使用稳定性考察 | 第35-36页 |
| ·Poly-GMA-ZrPO_3柱负载量考察 | 第36-37页 |
| ·Poly-GMA-ZrPO_3柱使用最低检测限的考察 | 第37页 |
| ·Poly-GMA-ZrPO_3柱复性后对其富集能力变化的考察 | 第37-38页 |
| ·Poly-GMA-ZrPO_3柱重复使用后适用性考察 | 第38-39页 |
| ·Poly-GMA-ZrPO_3柱对复杂生物样本中磷酸化肽段的规模化富集 | 第39页 |
| 3 小结 | 第39-40页 |
| 第二章 TiO_2固相萃取-高 pH 反相色谱分离结合质谱鉴定的高覆盖磷酸化蛋白质组分析新策略 | 第40-49页 |
| 1 材料与方法 | 第41-42页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·仪器设备 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-42页 |
| ·TiO_2固相萃取柱的制备 | 第41页 |
| ·C57BL/6J 小鼠肝脏蛋白质样本的制备 | 第41页 |
| ·混合蛋白质的酶切 | 第41-42页 |
| ·TiO_2固相萃取柱对小鼠肝脏蛋白酶切物中磷酸化肽段的富集 | 第42页 |
| ·高 pH 值反相色谱法对磷酸化肽段的分离 | 第42页 |
| ·磷酸化蛋白质的质谱鉴定 | 第42页 |
| ·质谱数据分析 | 第42页 |
| 2 结果与讨论 | 第42-48页 |
| ·小鼠肝脏磷酸化蛋白质富集鉴定路线的确立 | 第42-44页 |
| ·高 pH 反相色谱分离条件的优化 | 第44-45页 |
| ·磷酸化肽段混合物经高 pH 反相色谱分离后的质谱鉴定数据分析 | 第45-46页 |
| ·不同鉴定软件对小鼠肝脏磷酸化蛋白质数据处理结果的比较 | 第46页 |
| ·小鼠肝脏磷酸化蛋白质组数据集分析 | 第46-47页 |
| ·PEAKS6 蛋白质鉴定软件对小鼠肝脏磷酸化蛋白质数据集的比较 | 第47-48页 |
| ·PEAKS6 蛋白质鉴定软件对小鼠肝脏磷酸化蛋白质不同批次数据集的比较 | 第48页 |
| 3 小结 | 第48-49页 |
| 第二部分 细胞膜糖糖型原位标记、鉴定及差异分析研究 | 第49-78页 |
| 第一章 自组装芘衍生化氧化石墨烯对糖蛋白质 N-糖链高效、可视化富集方法的简历 | 第51-63页 |
| 1 材料与方法 | 第51-53页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·仪器设备 | 第51-52页 |
| ·实验方法 | 第52-53页 |
| ·自组装芘衍生化氧化石墨烯的制备 | 第52页 |
| ·标准糖蛋白质 N-糖链的制备 | 第52-53页 |
| ·PCGO 对寡聚糖链/糖蛋白质 N-糖链的富集与可逆释放 | 第53页 |
| ·质谱分析 PCGO 富集后的寡聚糖链/糖蛋白质 N-糖链 | 第53页 |
| 2 结果与讨论 | 第53-61页 |
| ·自组装芘衍生化氧化石墨烯的制备 | 第53-56页 |
| ·非共价修饰法在氧化石墨烯表面偶联芘衍生物 | 第53-54页 |
| ·自组装芘衍生化氧化石墨烯表面的酰氯化 | 第54-56页 |
| ·PCGO 使用时最低检测限的考察 | 第56页 |
| ·PCGO 对寡聚糖链富集过程的可视化监测 | 第56-58页 |
| ·PCGO 对标准寡糖的富集 | 第58页 |
| ·PCGO 对糖蛋白质 N-糖链的富集 | 第58-60页 |
| ·PCGO 对复杂生物样本中糖蛋白质 N-糖链的富集 | 第60-61页 |
| 3 小结 | 第61-63页 |
| 第二章 基于新型上转换荧光纳米材料的细胞表面膜糖糖型原位差异分析方法的建立 | 第63-78页 |
| 1 材料与方法 | 第63-66页 |
| ·主要试剂 | 第63页 |
| ·仪器设备 | 第63-64页 |
| ·实验方法 | 第64-66页 |
| ·ConA-poly-OEGMA-UCNPs 的制备 | 第64-65页 |
| ·高转移肝癌细胞（HCCLM3）及正常人肝细胞（Chang Liver）的培养 | 第65页 |
| ·CPO-UCNPs 对细胞毒性的考察 | 第65页 |
| ·高转移肝癌细胞（HCCLM3）转移瘤模型的制作 | 第65页 |
| ·CPO-UCNPs 对不同类型细胞表面膜糖糖型识别能力的表征 | 第65-66页 |
| ·CPO-UCNPs 对转移瘤内细胞表面膜糖糖型的识别 | 第66页 |
| 2 结果与讨论 | 第66-76页 |
| ·材料表征 | 第66-72页 |
| ·透射电镜对 SI-ATRP 反应亲水修饰后的上转化荧光纳米颗粒的表征 | 第66-68页 |
| ·红外光谱法对 UCNPs 经 SI-ATRP 反应亲水修饰前后化学基团变化的表征 | 第68-69页 |
| ·热重分析 SI-ATRP 修饰上转换荧光纳米颗粒前后裂解温度变化 | 第69-70页 |
| ·荧光光谱法对 CPO-UCNPs 制备过程中荧光强度变化的表征 | 第70-71页 |
| ·SI-ATRP 法制备的亲水 UCNPs 在水相中稳定性考察 | 第71-72页 |
| ·CPO-UCNPs 的细胞毒性考察 | 第72-73页 |
| ·CPO-UCNPs 对不同类型肝细胞表面膜糖糖型的差异识别 | 第73-74页 |
| ·干扰及竞争性实验表征 CPO-UCNPs 对细胞表面膜糖糖型的差异识别能力 | 第74-75页 |
| ·CPO-UCNPs 对动物体内转移瘤细胞表面膜糖糖型的差异识别 | 第75-76页 |
| 3 小结 | 第76-78页 |
| 附表 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-82页 |
| 个人简历 | 第82-83页 |
| 在读期间研究成果 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
