| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 插图和附表清单 | 第11-13页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 1 引言 | 第14-38页 |
| ·胚胎干细胞的研究进展 | 第14-20页 |
| ·小鼠胚胎干细胞 | 第14-18页 |
| ·人及灵长类动物胚胎干细胞 | 第18页 |
| ·其他动物胚胎干细胞 | 第18-20页 |
| ·胚胎干细胞的生物学特征 | 第20-28页 |
| ·胚胎干细胞多能性和自我更新的分子机制 | 第20-25页 |
| ·胚胎干细胞的分化机制 | 第25-28页 |
| ·胚胎干细胞的培养方法 | 第28-31页 |
| ·胚胎干细胞分离和克隆方法 | 第28页 |
| ·影响胚胎干细胞分离与培养的主要因素 | 第28-30页 |
| ·胚胎干细胞的鉴定方法 | 第30-31页 |
| ·胚胎干细胞与诱导多能干细胞 | 第31-36页 |
| ·基因组整合 | 第32-33页 |
| ·多能状态的遗传和表观遗传调控 | 第33-34页 |
| ·基因表达 | 第34页 |
| ·发育潜力和疾病风险 | 第34-35页 |
| ·分化和疾病模型 | 第35-36页 |
| ·胚胎干细胞应用前景及存在的问题 | 第36-37页 |
| ·应用前景 | 第36页 |
| ·存在的问题 | 第36-37页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第37-38页 |
| 2 实验一 绵羊卵母细胞体外受精培养体系的建立与优化 | 第38-48页 |
| ·实验材料 | 第38-39页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·实验试剂 | 第38-39页 |
| ·实验仪器及耗材 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·绵羊卵母细胞的体外成熟 | 第39页 |
| ·绵羊卵母细胞的孤雌激活及发育培养 | 第39-40页 |
| ·绵羊卵母细胞的体外受精 | 第40页 |
| ·绵羊 IVF 胚胎的发育培养 | 第40页 |
| ·数据统计 | 第40-41页 |
| ·实验结果 | 第41-45页 |
| ·绵羊卵母细胞体外成熟 | 第41页 |
| ·孤雌激活绵羊卵母细胞体外发育 | 第41-42页 |
| ·绵羊卵母细胞体外受精及发育 | 第42-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·血清对绵羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第45-46页 |
| ·绵羊卵母细胞的孤雌激活及发育培养 | 第46页 |
| ·精子对绵羊 IVF 胚体外发育的影响 | 第46页 |
| ·不同成熟时间对绵羊 IVF 胚体外发育的影响 | 第46-47页 |
| ·不同环境因素对绵羊 IVF 胚体外发育的影响 | 第47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 3 实验二 绵羊类 ES 细胞的分离与增殖培养体系的建立 | 第48-64页 |
| ·实验材料 | 第48-49页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·实验试剂 | 第48页 |
| ·实验仪器及耗材 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-52页 |
| ·饲养层细胞的制备 | 第49-50页 |
| ·囊胚的获得 | 第50-51页 |
| ·绵羊囊胚 ICM 的分离 | 第51页 |
| ·绵羊类 ES 细胞的传代培养 | 第51页 |
| ·绵羊类 ES 细胞的冷冻与复苏 | 第51页 |
| ·数据统计 | 第51-52页 |
| ·实验结果 | 第52-60页 |
| ·饲养层细胞的优化 | 第52-54页 |
| ·绵羊类 ES 细胞的分离与培养 | 第54-56页 |
| ·囊胚在饲养层细胞上的生长 | 第56-57页 |
| ·绵羊类 ES 细胞的传代培养 | 第57-60页 |
| ·绵羊类 ES 细胞的冷冻保存 | 第60页 |
| ·讨论 | 第60-63页 |
| ·饲养层细胞对绵羊类 ES 细胞培养的影响 | 第60-61页 |
| ·绵羊囊胚对类 ES 细胞培养的影响 | 第61页 |
| ·传代方法对绵羊类 ES 细胞培养的影响 | 第61-62页 |
| ·培养液对绵羊类 ES 细胞培养的影响 | 第62-63页 |
| ·绵羊类 ES 细胞的冷冻保存 | 第63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 4 实验三 绵羊类 ES 细胞的初步鉴定 | 第64-75页 |
| ·实验材料 | 第64-65页 |
| ·实验材料 | 第64页 |
| ·实验试剂 | 第64页 |
| ·实验仪器及耗材 | 第64-65页 |
| ·实验方法 | 第65-67页 |
| ·形态学鉴定 | 第65页 |
| ·酶学鉴定 | 第65-66页 |
| ·RT-PCR 鉴定 | 第66-67页 |
| ·免疫荧光鉴定 | 第67页 |
| ·染色体分析 | 第67页 |
| ·体外自发分化 | 第67页 |
| ·结果 | 第67-73页 |
| ·形态学鉴定 | 第67-69页 |
| ·AKP 染色 | 第69页 |
| ·RT-PCR 鉴定 | 第69-70页 |
| ·免疫荧光鉴定 | 第70-72页 |
| ·染色体分析 | 第72-73页 |
| ·体内外分化 | 第73页 |
| ·讨论 | 第73-74页 |
| ·小结 | 第74-75页 |
| 5 实验四 绵羊类 ES 细胞的定向诱导分化 | 第75-90页 |
| ·实验材料 | 第75-76页 |
| ·实验材料 | 第75页 |
| ·实验试剂 | 第75页 |
| ·实验仪器及耗材 | 第75-76页 |
| ·实验方法 | 第76-78页 |
| ·绵羊类 ES 细胞拟胚体的制作 | 第76页 |
| ·绵羊类 ES 细胞拟胚体的鉴定 | 第76-77页 |
| ·绵羊类 ES 细胞向各功能细胞的诱导 | 第77页 |
| ·绵羊类 ES 细胞诱导为神经细胞的鉴定 | 第77-78页 |
| ·绵羊类 ES 细胞诱导为骨、心肌细胞和脂肪细胞的鉴定 | 第78页 |
| ·绵羊类 ES 细胞诱导为胰岛分泌细胞（胰岛β细胞）的鉴定 | 第78页 |
| ·实验结果 | 第78-88页 |
| ·EB 的形成与鉴定 | 第78-80页 |
| ·绵羊类 ES 细胞向神经细胞的诱导 | 第80-83页 |
| ·绵羊类 ES 细胞向成骨、心肌、脂肪细胞的诱导 | 第83-86页 |
| ·绵羊类 ES 细胞向胰岛分泌细胞的诱导 | 第86-88页 |
| ·讨论 | 第88-90页 |
| ·绵羊类 ES 细胞向 EB 细胞的分化 | 第88页 |
| ·绵羊类 ES 细胞向神经细胞的诱导 | 第88-89页 |
| ·绵羊类 ES 细胞向成骨、心肌及脂肪细胞的诱导 | 第89页 |
| ·绵羊类 ES 细胞向胰岛分泌细胞的诱导 | 第89-90页 |
| ·小结 | 第90页 |
| 6 结论 | 第90页 |
| 7 本研究的创新点 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-113页 |
| 作者简介 | 第113页 |
