| 目录 | 第1-6页 |
| CONTENTS | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-18页 |
| ·犬乳腺肿瘤概述 | 第11-12页 |
| ·犬乳腺肿瘤研究模型的优势 | 第11-12页 |
| ·犬乳腺肿瘤治疗方法 | 第12页 |
| ·DNA 甲基化概述 | 第12-13页 |
| ·DNA 甲基化与肿瘤 | 第13-15页 |
| ·基因启动子区 CpG 岛的高甲基化 | 第13-14页 |
| ·基因组中的低甲基化 | 第14-15页 |
| ·甲基化特异性 PCR | 第15页 |
| ·DNA 甲基化与肿瘤分子标志物 | 第15-16页 |
| ·甲基转移酶抑制剂—5-氮杂胞苷 | 第16页 |
| ·研究的目的与意义 | 第16-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-29页 |
| ·实验材料 | 第18-21页 |
| ·临床样本 | 第18页 |
| ·细胞系 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·仪器与耗材 | 第18-19页 |
| ·主要试剂的配置 | 第19-21页 |
| ·实验方法 | 第21-29页 |
| ·临床资料的收集 | 第21页 |
| ·血液样本的采集 | 第21页 |
| ·病理组织的收集及初步处理 | 第21页 |
| ·石蜡切片的制备与观察 | 第21-23页 |
| ·CHMm 的体外培养 | 第23页 |
| ·5-氮杂胞苷对 CHMm 细胞生长抑制率的测定 | 第23-24页 |
| ·5-氮杂胞苷对 CHMm 的药物处理 | 第24页 |
| ·样本的甲基化检测 | 第24-27页 |
| ·5-氮杂胞苷作用后 CHMm 甲基化及相关基因表达的检测 | 第27-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-43页 |
| ·临床病例的基本情况 | 第29-31页 |
| ·病理组织学诊断结果 | 第31-35页 |
| ·肿瘤大体标本的肉眼观察 | 第31-32页 |
| ·病理组织切片的观察 | 第32-35页 |
| ·样本的甲基化检测结果 | 第35-36页 |
| ·细胞 DAPK1 和 MGMT 基因的 MSP 结果 | 第35页 |
| ·血液样本 DAPK1 和 MGMT 基因的 MSP 结果 | 第35-36页 |
| ·5-氮杂胞苷对 CHMm 细胞生长抑制率的检测结果 | 第36-37页 |
| ·5-氮杂胞苷对 CHMm 细胞形态学影响 | 第37-38页 |
| ·5-氮杂胞苷对 CHMm 细胞 DAPK1、MGMT 基因甲基化的影响 | 第38-39页 |
| ·5-氮杂胞苷对 CHMm 细胞相关基因 mRNA 表达的影响 | 第39-43页 |
| ·Real-time PCR 的扩增曲线和融解曲线 | 第39页 |
| ·5-氮杂胞苷作用于细胞 72h 后相关基因 mRNA 的表达 | 第39-43页 |
| 4 讨论 | 第43-49页 |
| ·犬乳腺肿瘤的发病因素 | 第43页 |
| ·DNA 甲基化的基本原理 | 第43-44页 |
| ·DNA 甲基化检测在肿瘤疾病中的研究 | 第44-46页 |
| ·P27 和 CyclinD1 在肿瘤疾病中的研究 | 第46-47页 |
| ·5-氮杂胞苷的抗肿瘤作用 | 第47页 |
| ·Real-Time PCR 技术的原理及方法 | 第47-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58页 |
