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玉米潜在脱落酸受体基因的克隆及功能鉴定

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
1 文献综述第9-20页
   ·脱落酸和脱落酸受体概况第9-11页
     ·脱落酸受体的发现第9-10页
     ·脱落酸受体蛋白的分子结构第10页
     ·脱落酸结合受体的分子机制第10-11页
     ·ABA-PYL复合物抑制PP2C的分子机制第11页
   ·丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2C(PP2C)概况第11-14页
     ·蛋白磷酸酶的分类第12页
     ·PP2C的结构及生化特征第12-13页
     ·PP2C的功能第13-14页
   ·鉴定脱落酸受体的方法第14-17页
     ·研究与PP2C的结合作用第14-16页
     ·脱落酸结合测定法第16页
     ·PP2C酶活性测定法第16-17页
   ·获取基因全长cDNA的方法第17-20页
     ·电子克隆第17-18页
     ·cDNA末端快速扩增法第18-19页
     ·cDNA文库筛选法第19-20页
   ·本研究的目的第20页
2 材料和方法第20-32页
   ·玉米PYL蛋白基因序列的生物信息学分析第20页
   ·ZmPYL和ZmPP2C基因开放阅读框的克隆第20-27页
     ·总RNA的提取第20-21页
     ·cDNA第一链合成第21-22页
     ·ZmPYL和ZmPP2C开放阅读框的PCR扩增第22-25页
     ·目的片段的回收与纯化第25页
     ·目的片段连接克隆载体第25-26页
     ·质粒DNA的热激转化第26页
     ·重组菌落PCR鉴定第26-27页
   ·酵母双杂交验证玉米PYL和PP2C蛋白的相互作用关系第27-32页
     ·主要试剂及配制第27页
     ·表达载体构建第27-30页
     ·酵母转化第30-32页
3 结果与分析第32-47页
   ·玉米PYL基因的生物信息学分析结果第32-40页
   ·RNA提取检测结果第40-41页
   ·ZmPYL和ZmPP2C基因开放阅读框的克隆第41-42页
   ·表达载体的酶切检测结果第42页
   ·酵母双杂交结果第42-47页
4 讨论第47-49页
   ·关于大量ZmPYL与PP2C蛋白质组合不存在相互作用第47页
   ·同源克隆的应用第47页
   ·PYL蛋白的鉴定第47-48页
   ·后续研究方向第48-49页
参考文献第49-54页
致谢第54-55页
附录第55页

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