摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
1 文献综述 | 第9-20页 |
·脱落酸和脱落酸受体概况 | 第9-11页 |
·脱落酸受体的发现 | 第9-10页 |
·脱落酸受体蛋白的分子结构 | 第10页 |
·脱落酸结合受体的分子机制 | 第10-11页 |
·ABA-PYL复合物抑制PP2C的分子机制 | 第11页 |
·丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2C(PP2C)概况 | 第11-14页 |
·蛋白磷酸酶的分类 | 第12页 |
·PP2C的结构及生化特征 | 第12-13页 |
·PP2C的功能 | 第13-14页 |
·鉴定脱落酸受体的方法 | 第14-17页 |
·研究与PP2C的结合作用 | 第14-16页 |
·脱落酸结合测定法 | 第16页 |
·PP2C酶活性测定法 | 第16-17页 |
·获取基因全长cDNA的方法 | 第17-20页 |
·电子克隆 | 第17-18页 |
·cDNA末端快速扩增法 | 第18-19页 |
·cDNA文库筛选法 | 第19-20页 |
·本研究的目的 | 第20页 |
2 材料和方法 | 第20-32页 |
·玉米PYL蛋白基因序列的生物信息学分析 | 第20页 |
·ZmPYL和ZmPP2C基因开放阅读框的克隆 | 第20-27页 |
·总RNA的提取 | 第20-21页 |
·cDNA第一链合成 | 第21-22页 |
·ZmPYL和ZmPP2C开放阅读框的PCR扩增 | 第22-25页 |
·目的片段的回收与纯化 | 第25页 |
·目的片段连接克隆载体 | 第25-26页 |
·质粒DNA的热激转化 | 第26页 |
·重组菌落PCR鉴定 | 第26-27页 |
·酵母双杂交验证玉米PYL和PP2C蛋白的相互作用关系 | 第27-32页 |
·主要试剂及配制 | 第27页 |
·表达载体构建 | 第27-30页 |
·酵母转化 | 第30-32页 |
3 结果与分析 | 第32-47页 |
·玉米PYL基因的生物信息学分析结果 | 第32-40页 |
·RNA提取检测结果 | 第40-41页 |
·ZmPYL和ZmPP2C基因开放阅读框的克隆 | 第41-42页 |
·表达载体的酶切检测结果 | 第42页 |
·酵母双杂交结果 | 第42-47页 |
4 讨论 | 第47-49页 |
·关于大量ZmPYL与PP2C蛋白质组合不存在相互作用 | 第47页 |
·同源克隆的应用 | 第47页 |
·PYL蛋白的鉴定 | 第47-48页 |
·后续研究方向 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
附录 | 第55页 |