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番茄miR164对花器官形成和果实发育的调控研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
缩略词列表第10-11页
1 绪论第11-19页
   ·miRNA 简介第11页
   ·miRNA 的生物合成及剪切第11-13页
   ·miRNA 的功能第13-14页
   ·miRNA 的鉴定第14-15页
   ·miRNA 靶基因的鉴定第15页
   ·NAC 转录因子家族功能第15页
   ·植物花器官的建成第15-16页
   ·研究目的和意义第16-17页
   ·研究内容和技术路线第17-19页
     ·研究内容第17-18页
     ·技术路线第18-19页
2 番茄 miR164 前体序列及靶基因的克隆和表达分析第19-31页
   ·实验用的材料、仪器第19-21页
     ·菌株及质粒第19页
     ·实验中所用的植物材料及生长条件第19页
     ·主要实验试剂第19页
     ·引物第19-20页
     ·抗生素配制第20页
     ·培养基及缓冲液第20-21页
     ·主要仪器第21页
   ·实验方法第21-26页
     ·植物物基因组 DNA 提取第21-22页
     ·miR164 前体序列的克隆,切胶回收及测序第22-23页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化第23页
     ·番茄总 RNA 的提取第23-24页
     ·靶基因的扩增第24-25页
     ·5′RACE 剪切位点分析第25页
     ·靶基因剪切位点分析第25-26页
     ·miR164 二级结构预测第26页
     ·基因表达模式及定量 PCR第26页
   ·实验结果与分析第26-31页
     ·miR164 前体序列的克隆第26-27页
     ·miR164 二级结构预测第27页
     ·剪切位点 5′RACE 验证分析第27-28页
     ·靶基因 NAM 的克隆及位点突变第28-30页
     ·miR164 及靶基因 NAM 的表达模式分析第30-31页
3 番茄 miR164 及靶基因 NAM 的转基因研究第31-52页
   ·材料与试剂第31-34页
     ·菌株及载体第31页
     ·植物材料及生长条件第31页
     ·实验试剂第31页
     ·引物第31-32页
     ·抗生素第32-33页
     ·培养基第33-34页
     ·实验仪器第34页
   ·实验方法第34-38页
     ·感受态细胞制备第34页
     ·miR164 超表达载体的构建第34-36页
     ·NAM 和 NAM-M 超表达载体的构建第36页
     ·番茄遗传转化第36-38页
     ·转基因植株的鉴定第38页
   ·结果与分析第38-52页
     ·miR164 超表达载体的构建第38-39页
     ·NAM 超表达载体的构建第39-40页
     ·NAM-M 超表达载体的构建第40-41页
     ·番茄遗传转化及转基因植株鉴定第41-44页
     ·转基因植株的表型分析第44-48页
     ·定性分析第48-50页
     ·miR164 调控番茄器官发育的模型第50-52页
4 讨论第52-54页
5 结论与工作展望第54-55页
   ·结论第54页
   ·后续工作展望第54-55页
致谢第55-56页
参考文献第56-61页
附录第61页

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