| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 英文缩略词表 | 第15-16页 |
| 前言 | 第16-20页 |
| 技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 材料和方法 | 第21-35页 |
| ·材料 | 第21-23页 |
| ·实验用细胞 | 第21页 |
| ·常用溶液的配制 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21-22页 |
| ·主要实验仪器 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-35页 |
| ·生长因子诱导细胞后的形态学观察 | 第23页 |
| ·细胞总RNA抽提 | 第23-24页 |
| ·消化RNA中痕量DNA | 第24页 |
| ·RNA质量检测 | 第24页 |
| ·RNA逆转录实验 | 第24-25页 |
| ·实时荧光定量PCR(Real Time-PCR) | 第25-28页 |
| ·microRNA逆转录实验 | 第28页 |
| ·microRNA实时荧光定量PCR | 第28-29页 |
| ·siRNA细胞转染实验 | 第29页 |
| ·细胞划痕实验 | 第29页 |
| ·细胞Transwell体外侵袭实验 | 第29-30页 |
| ·MTT比色法测定细胞生长、存活 | 第30页 |
| ·mRNA芯片和miRNA芯片分析 | 第30页 |
| ·差异表达的mRNA和microRNA分子的筛选 | 第30-31页 |
| ·mRNA表达谱的生物信息学分析 | 第31-33页 |
| ·miRNA芯片的生物信息学分析 | 第33-34页 |
| ·miR-505和miR-1207-5p靶基因的预测 | 第34-35页 |
| 第三章 结果 | 第35-72页 |
| ·EGF或TGF-β1诱导鼻咽癌细胞HK-1发生上皮-间质转换 | 第35-37页 |
| ·EGF或TGF-β1对鼻咽癌细胞的mRNA和microRNA表达谱的影响 | 第37-39页 |
| ·利用荧光定量PCR验证高通量芯片分析的结果 | 第39-40页 |
| ·EGF和TGF-β1共同上调的基因多与细胞黏附、运动相关 | 第40-42页 |
| ·EGF和TGF-β1共同下调的基因多与细胞周期、分裂、染色体、DNA复制等相关 | 第42-44页 |
| ·EGF和TGF-β1诱导的EMT过程中信号通路和GO的变化(MAS3.0分析结果) | 第44-48页 |
| ·EGF和TGF-β1诱导的EMT过程中基因集变化情况(GSEA分析结果) | 第48-51页 |
| ·EGF和TGF-β1诱导的EMT过程中,ETS家族成员和EGR1靶基因的变化情况 | 第51-55页 |
| ·EGF诱导的EMT过程中,EGFR通路的变化情况 | 第55-56页 |
| ·EGF和TGF-β1诱导的EMT过程中,EMT通路的变化情况 | 第56-58页 |
| ·EGF或TGF-β1诱导的EMT对于鼻咽癌发病机制的贡献 | 第58-60页 |
| ·EGF和TGF-β1对microRNA表达谱的影响(基于转录因子的分析) | 第60-61页 |
| ·EGF和TGF-β1所诱导的EMT过程中涉及的microRNA-靶基因-信号通路网络 | 第61-65页 |
| ·EGF和TGF-β1共同诱导3个microRNA分子的表达 | 第65页 |
| ·qRT-PCR验证特异性mi RNA mimics和inhbitor的效果 | 第65-66页 |
| ·miR-505和miR-1207-5p可抑制鼻咽癌细胞的迁移和侵袭能力 | 第66-68页 |
| ·miR-1207-5p和miR-505对鼻咽癌细胞增殖能力的影响 | 第68页 |
| ·miR-505和miR-1207-5p靶基因的预测分析 | 第68-70页 |
| ·qRT-PCR筛选、验证miR-505和miR-1207-5p的潜在靶基因 | 第70-72页 |
| 第四章 讨论 | 第72-81页 |
| ·肿瘤转移与EMT | 第72页 |
| ·EGF、TGF-β1对mRNA表达谱的影响 | 第72-75页 |
| ·EGF、TGF-β1对基因集的影响 | 第75-76页 |
| ·EGF、TGF-β1诱导的EMT过程中EGFR通路、TGF-β通路、EMT通路的变化情况 | 第76-77页 |
| ·EGF和TGF-β1诱导的EMT对于鼻咽癌发病机制的贡献-基于基因表达谱的分析结论 | 第77-78页 |
| ·EGF和TGF-β1诱导的EMT过程中microRNA表达谱的改变 | 第78-79页 |
| ·miR-505和miR-1207-5p在EMT过程中其负反馈作用(鲁棒性) | 第79-81页 |
| 第五章 结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-86页 |
| 综述 | 第86-99页 |
| 参考文献 | 第95-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
