| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-25页 |
| ·杆状病毒昆虫细胞表达系统 | 第10-19页 |
| ·杆状病毒的生物学特性 | 第10页 |
| ·杆状病毒的分类及特点 | 第10-11页 |
| ·杆状病毒的基因组结构 | 第11页 |
| ·杆状病毒载体的应用及发展前景 | 第11-12页 |
| ·杆状病毒作为基因表达载体的条件 | 第12-13页 |
| ·杆状病毒昆虫细胞表达系统的发展 | 第13-14页 |
| ·Bac-to-Bac杆状病毒表达系统 | 第14-15页 |
| ·杆状病毒昆虫细胞表达外源蛋白的特点 | 第15-18页 |
| ·昆虫细胞中信号肽对外源蛋白表达的影响 | 第18-19页 |
| ·禽流感研究进展 | 第19-23页 |
| ·禽流感 | 第19页 |
| ·禽流感病毒 | 第19-22页 |
| ·禽流感疫苗研究进展 | 第22-23页 |
| ·葡萄球菌蛋白A | 第23-25页 |
| 2 目的意义 | 第25-26页 |
| 3 材料方法 | 第26-45页 |
| ·材料 | 第26-31页 |
| ·菌株及细胞 | 第26页 |
| ·载体与质粒 | 第26页 |
| ·主要药品与试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·各种培养基的配制 | 第27-28页 |
| ·主要试剂的配制 | 第28-31页 |
| ·实验方法 | 第31-45页 |
| ·设计引物 | 第31页 |
| ·HBM-HF基因的扩增 | 第31-33页 |
| ·sHA1-wFc的扩增 | 第33页 |
| ·HBM-HA1-wFc-HTb、sHAl-wFc-HTb重组质粒的构建 | 第33-35页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第35页 |
| ·重组质粒的转座 | 第35-38页 |
| ·重组Bacmid转染Sf9细胞 | 第38-40页 |
| ·杆状病毒的扩增 | 第40-41页 |
| ·间接免疫荧光实验 | 第41页 |
| ·确定重组蛋白的表达条件 | 第41-43页 |
| ·两种信号肽引导下目的蛋白的定位及表达量情况比较 | 第43页 |
| ·sHA1-mFc蛋白在昆虫细胞中的表达 | 第43-44页 |
| ·sHA1-wFc与sHA1-mFc融合蛋白的大量表达 | 第44页 |
| ·sHA1-wFc与sHA1-mFc融合蛋白的纯化 | 第44-45页 |
| 4、实验结果 | 第45-54页 |
| ·信号肽的选择与确定 | 第45-50页 |
| ·HBM-HA1-wFc-HTb与sHA1-wFc-HTb重组质粒的构建与鉴定 | 第45-46页 |
| ·重组质粒的转座 | 第46页 |
| ·重组杆粒Bacmid的PCR鉴定 | 第46-47页 |
| ·阳性杆粒Bacmid转染Sf9细胞 | 第47-48页 |
| ·蛋白的表达与鉴定 | 第48-50页 |
| ·sHA1-mFc表达载体的构建与表达 | 第50-52页 |
| ·HTb-HA1-mFc质粒的构建结果 | 第50-51页 |
| ·sHA1-mFc融合蛋白的表达 | 第51-52页 |
| ·sHA1-wFc与sHA1-mFc的大量表达与纯化 | 第52-54页 |
| 5 讨论 | 第54-56页 |
| ·实验方案的确定 | 第54页 |
| ·影响外源蛋白在昆虫细胞中表达的因素 | 第54-55页 |
| ·重组蛋白最佳表达条件的确定 | 第55页 |
| ·目的蛋白的糖基化 | 第55页 |
| ·不同纯化方法纯化蛋白 | 第55-56页 |
| 6 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
