| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 第一章 前沿 | 第13-27页 |
| 一、研究背景 | 第13-24页 |
| 1. 耐辐射式球菌Deinococcus radiodurans简介 | 第13-14页 |
| ·耐辐射式球菌D.radiodurans的发现 | 第13页 |
| ·耐辐射式球菌基因组结构和DNA修复途径的研究 | 第13-14页 |
| 2. DNA的损伤修复途径简介 | 第14-21页 |
| ·切除修复(Excision Repair) | 第14-15页 |
| ·直接修复(Direct Repair) | 第15-16页 |
| ·SOS修复(SOS Repair) | 第16页 |
| ·重组修复(Recombinational Repair) | 第16-21页 |
| ·RecBCD修复途径 | 第17-20页 |
| ·RecF修复途径 | 第20-21页 |
| 3. RecQ蛋白的研究概况 | 第21-24页 |
| 二、研究内容、目的与意义 | 第24-27页 |
| 第二章 研究材料与方法 | 第27-39页 |
| 1. 菌株和质粒 | 第27页 |
| 2. 实验试剂和工具酶 | 第27-28页 |
| 3. 主要仪器 | 第28-29页 |
| 4. 实验流程和方法 | 第29-39页 |
| ·基因的克隆 | 第29-31页 |
| ·蛋白质表达与纯化 | 第31-32页 |
| ·蛋白质表达 | 第31页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第31-32页 |
| ·用于结晶的蛋白的纯化 | 第31页 |
| ·生化检测所用蛋白质的纯化 | 第31-32页 |
| ·DrRecQ1-824蛋白质与Holliday Junction结合后聚合态的检测 | 第32页 |
| ·晶体生长和数据收集 | 第32-33页 |
| ·小角散射的样品准备和数据收集 | 第33-35页 |
| ·生化功能分析 | 第35-39页 |
| ·DrRecQ水解ATP活性实验 | 第35页 |
| ·EMSA实验(electrophoretic mobility shift assay) | 第35-37页 |
| ·DNA底物的准备 | 第36页 |
| ·EMSA反应体系 | 第36-37页 |
| ·DrRecQ蛋白Helicase活性检测 | 第37-39页 |
| 第三章 ：实验结果与分析 | 第39-84页 |
| 1、DrRecQ的克隆和蛋白质的表达纯化 | 第39-56页 |
| ·DrRecQ蛋白质的初步表达纯化 | 第43-50页 |
| ·DrRecQ1-824-pET28at_plus的表达纯化 | 第43-45页 |
| ·DrRecQ1-610-pET28at_plus的表达纯化 | 第45-46页 |
| ·DrRecQ1-520-pET28at_plus的表达纯化 | 第46-47页 |
| ·DrRecQ1-824-Holliday Junction复合物纯化结果 | 第47-50页 |
| ·DrRecQ去除杂质DNA的纯化 | 第50-55页 |
| ·DrRecQ蛋白质纯化小结 | 第55-56页 |
| 2、蛋白质的结晶优化及水溶液中蛋白小角实验分析 | 第56-68页 |
| ·蛋白质结晶和优化 | 第56-62页 |
| ·DrRecQ1-824的结晶与优化 | 第56-58页 |
| ·DrRecQ1-610的结晶和优化 | 第58-60页 |
| ·DrRecQ1-520的晶体优化 | 第60-62页 |
| ·DrRecQ1-824和DrRecQ1-610的小角数据分析 | 第62-66页 |
| ·DrRecQ1-520蛋白质晶体结构 | 第66-68页 |
| 3、DrRecQ的生化实验结果与分析 | 第68-84页 |
| ·ATP水解实验 | 第68-70页 |
| ·EMSA实验结果与分析 | 第70-82页 |
| ·DrRecQ1-520与不同类型DNA的EMSA结果 | 第70-73页 |
| ·DrRecQ1-610与不同类型DNA的EMSA结果 | 第73-76页 |
| ·DrRecQ1-824与不同类型DNA的EMSA结果 | 第76-80页 |
| ·不同的DrRecQ蛋白质与Y-DNA的EMSA结果 | 第80-82页 |
| ·DrRecQ1-824蛋白质Helicase活性检测 | 第82-84页 |
| 全文总结与展望 | 第84-85页 |
| 附录 | 第85-88页 |
| 参考文献 | 第88-92页 |
| 致谢 | 第92-94页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第94页 |
