缩写词对照 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
引言 | 第14-15页 |
Ⅰ 文献综述 | 第15-36页 |
一、 李属果树生物技术研究进展 | 第15-18页 |
1 茎尖培养 | 第15-16页 |
1.1 李的茎尖培养 | 第15页 |
1.2 (木奈)的茎尖培养 | 第15-16页 |
2 胚胎培养 | 第16页 |
3 原生质体培养 | 第16页 |
4 遗传转化 | 第16-18页 |
二、 果树遗传转化研究进展 | 第18-28页 |
1 应用的目的基因 | 第19-22页 |
2 受体系统 | 第22-25页 |
2.1 再生能力 | 第22页 |
2.2 敏感性 | 第22-23页 |
2.3 操作难易 | 第23页 |
2.4 嵌合性 | 第23页 |
2.5 童期的长短 | 第23-25页 |
3 果树的转化方法 | 第25-26页 |
4 转基因植株的检测鉴定 | 第26-27页 |
5 存在的问题及展望 | 第27-28页 |
三、 反义RNA技术及其在控制果实成熟上的应用 | 第28-36页 |
1 反义RNA技术的产生与发展 | 第28-29页 |
2 果实成熟的生理学和分子生物学 | 第29-30页 |
3 应用反义RNA技术控制果实成熟 | 第30-36页 |
3.1 抑制乙烯合成延缓果实成熟 | 第31-33页 |
3.1.1 ACC合成酶反义基因途径 | 第31-32页 |
3.1.2 ACC氧化酶反义基因途径 | 第32页 |
3.1.3 DNA结合蛋白E4/E8与乙烯的关系 | 第32-33页 |
3.2 抑制细胞壁降解延缓果实成熟 | 第33-34页 |
3.2.1 多聚半乳糖醛酸酶(PG)反义基因途径 | 第33-34页 |
3.2.2 果胶(甲)酯酶(PE)反义基因途径 | 第34页 |
3.3 色素生物合成的分子水平操作 | 第34-36页 |
Ⅱ 油(木奈)离体再生体系的研究 | 第36-60页 |
一、 油(木奈)茎尖培养中无性再生体系的研究 | 第36-49页 |
1 材料与方法 | 第37-38页 |
1.1 材料 | 第37页 |
1.2 培养基 | 第37页 |
1.3 无性再生体系的建立方法 | 第37-38页 |
1.3.1 外植体的选择与处理 | 第37页 |
1.3.2 诱导培养 | 第37-38页 |
1.3.3 增殖培养 | 第38页 |
1.3.4 生根培养 | 第38页 |
2 结果与分析 | 第38-47页 |
2.1 诱导培养 | 第38-42页 |
2.1.1 最佳接种时期和消毒时间的确定 | 第38-39页 |
2.1.2 植物生长调节剂对芽分化的影响 | 第39-42页 |
2.2 增殖培养 | 第42-46页 |
2.2.1 植物生长调节剂对芽苗生长的影响 | 第42-44页 |
2.2.2 植物生长调节剂对芽苗增殖的影响 | 第44-45页 |
2.2.3 抗生素对内生菌的抑制作用 | 第45-46页 |
2.3 生根培养 | 第46-47页 |
3 小结与讨论 | 第47-49页 |
3.1 取材 | 第47页 |
3.2 内生菌问题 | 第47页 |
3.3 增殖率 | 第47-48页 |
3.4 芽苗生根 | 第48-49页 |
二、 油(木奈)试管苗茎段及叶片再生不定芽的研究 | 第49-55页 |
1 材料与方法 | 第49-50页 |
1.1 材料 | 第49页 |
1.2 培养基 | 第49页 |
1.3 培养条件 | 第49页 |
1.4 外植体的处理方式 | 第49页 |
1.5 统计分析 | 第49-50页 |
2 结果与分析 | 第50-54页 |
2.1 再生不定芽的动态描述 | 第50页 |
2.2 植物生长调节剂对不定芽发生的影响 | 第50-51页 |
2.3 不同部分的茎段不定芽发生能力的差异 | 第51-52页 |
2.4 不同处理方式对茎段不定芽发生能力的影响 | 第52-53页 |
2.5 阶段暗培养及LH对茎段不定芽发生能力的影响 | 第53-54页 |
3 小结与讨论 | 第54-55页 |
3.1 茎段再生不定芽 | 第54页 |
3.2 叶片再生不定芽 | 第54-55页 |
三、 油(木奈)子叶和上胚轴再生不定芽的研究 | 第55-60页 |
1 材料与方法 | 第55-56页 |
1.1 材料 | 第55页 |
1.2 培养基 | 第55页 |
1.3 外植体的种类及培养条件 | 第55页 |
1.4 外植体的放置及处理方式 | 第55页 |
1.5 统计分析 | 第55-56页 |
2 结果与分析 | 第56-58页 |
2.1 6-BA对不定芽发生能力的影响 | 第56-57页 |
2.2 子叶不同部分横切片不定芽发生能力的差异 | 第57页 |
2.3 子叶不同损伤处理对不定芽发生能力的影响 | 第57-58页 |
2.4 上胚轴的不同放置和损伤对不定芽发生能力的影响 | 第58页 |
3 小结与讨论 | 第58-60页 |
Ⅲ 农杆菌介导油(木奈)遗传转化的初步研究 | 第60-79页 |
一、 发根农杆菌介导油(木奈)遗传转化体系的研究 | 第61-68页 |
1 材料与方法 | 第61-63页 |
1.1 植物材料 | 第61页 |
1.2 发根农杆菌菌株及其培养 | 第61-62页 |
1.2.1 菌株种类 | 第61-62页 |
1.2.2 菌株的培养与保存 | 第62页 |
1.3 直接接种法诱导毛状根 | 第62页 |
1.3.1 转化菌液的制备 | 第62页 |
1.3.2 整体植株接种 | 第62页 |
1.3.3 茎段接种 | 第62页 |
1.4 共感染接种法诱导毛状根 | 第62-63页 |
1.5 毛状根的培养 | 第63页 |
1.5.1 脱菌培养 | 第63页 |
1.5.2 毛状根的诱导分化 | 第63页 |
1.6 毛状根的统计 | 第63页 |
2 结果与分析 | 第63-66页 |
2.1 直接接种法诱导毛状根 | 第63-65页 |
2.2 共感染法诱导毛状根 | 第65-66页 |
2.3 毛状根的培养 | 第66页 |
3 小结与讨论 | 第66-68页 |
3.1 不同的发根农杆菌菌株对不同类型的外植体侵染能力不同 | 第66-67页 |
3.2 转化油(木奈)诱导的毛状根未完全表现出典型的毛状根特征 | 第67页 |
3.3 未能使毛状根发生分化 | 第67-68页 |
二、 根癌农杆菌介导ACO基因转化油(木奈)的初步研究 | 第68-79页 |
1 材料与方法 | 第68-74页 |
1.1 材料 | 第68-69页 |
1.1.1 植物材料 | 第68页 |
1.1.2 植物表达载体和细菌菌株 | 第68页 |
1.1.3 工具酶及试剂 | 第68页 |
1.1.4 主要溶液白配制 | 第68-69页 |
1.2 方法 | 第69-74页 |
1.2.1 pBIO.8和pBIF1中ACO基因的鉴定 | 第69-71页 |
1.2.2 pBI0.8和pBIF1转化根癌农杆菌及PCR鉴定 | 第71-72页 |
1.2.3 ACO基因转化油(木奈)试管苗叶片和茎段 | 第72-74页 |
2 结果与分析 | 第74-77页 |
2.1 pBIO.8和pBIF1中ACO基因的鉴定 | 第74-75页 |
2.1.1 酶切鉴定 | 第74页 |
2.1.2 PCR鉴定 | 第74-75页 |
2.2 根癌农杆菌转化子的PCR鉴定 | 第75-76页 |
2.3 Kan的基础抗性测定 | 第76页 |
2.4 获得转化体 | 第76-77页 |
2.5 目的基因的PCR检测 | 第77页 |
3 小结与讨论 | 第77-79页 |
3.1 植物表达载体中目的基因的鉴定 | 第77页 |
3.2 目的基因转化根癌农杆菌 | 第77页 |
3.3 目的基因整合受体系统 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-91页 |
附录 1: pBIO.8和pBIP1的构建图 | 第91-92页 |
附录 2: 图版 | 第92-97页 |
致谢 | 第97页 |