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油离体再生体系建立及遗传转化的初步研究

缩写词对照第1-9页
中文摘要第9-11页
英文摘要第11-14页
引言第14-15页
Ⅰ 文献综述第15-36页
 一、 李属果树生物技术研究进展第15-18页
  1 茎尖培养第15-16页
   1.1 李的茎尖培养第15页
   1.2 (木奈)的茎尖培养第15-16页
  2 胚胎培养第16页
  3 原生质体培养第16页
  4 遗传转化第16-18页
 二、 果树遗传转化研究进展第18-28页
  1 应用的目的基因第19-22页
  2 受体系统第22-25页
   2.1 再生能力第22页
   2.2 敏感性第22-23页
   2.3 操作难易第23页
   2.4 嵌合性第23页
   2.5 童期的长短第23-25页
  3 果树的转化方法第25-26页
  4 转基因植株的检测鉴定第26-27页
  5 存在的问题及展望第27-28页
 三、 反义RNA技术及其在控制果实成熟上的应用第28-36页
  1 反义RNA技术的产生与发展第28-29页
  2 果实成熟的生理学和分子生物学第29-30页
  3 应用反义RNA技术控制果实成熟第30-36页
   3.1 抑制乙烯合成延缓果实成熟第31-33页
    3.1.1 ACC合成酶反义基因途径第31-32页
    3.1.2 ACC氧化酶反义基因途径第32页
    3.1.3 DNA结合蛋白E4/E8与乙烯的关系第32-33页
   3.2 抑制细胞壁降解延缓果实成熟第33-34页
    3.2.1 多聚半乳糖醛酸酶(PG)反义基因途径第33-34页
    3.2.2 果胶(甲)酯酶(PE)反义基因途径第34页
   3.3 色素生物合成的分子水平操作第34-36页
Ⅱ 油(木奈)离体再生体系的研究第36-60页
 一、 油(木奈)茎尖培养中无性再生体系的研究第36-49页
  1 材料与方法第37-38页
   1.1 材料第37页
   1.2 培养基第37页
   1.3 无性再生体系的建立方法第37-38页
    1.3.1 外植体的选择与处理第37页
    1.3.2 诱导培养第37-38页
    1.3.3 增殖培养第38页
    1.3.4 生根培养第38页
  2 结果与分析第38-47页
   2.1 诱导培养第38-42页
    2.1.1 最佳接种时期和消毒时间的确定第38-39页
    2.1.2 植物生长调节剂对芽分化的影响第39-42页
   2.2 增殖培养第42-46页
    2.2.1 植物生长调节剂对芽苗生长的影响第42-44页
    2.2.2 植物生长调节剂对芽苗增殖的影响第44-45页
    2.2.3 抗生素对内生菌的抑制作用第45-46页
   2.3 生根培养第46-47页
  3 小结与讨论第47-49页
   3.1 取材第47页
   3.2 内生菌问题第47页
   3.3 增殖率第47-48页
   3.4 芽苗生根第48-49页
 二、 油(木奈)试管苗茎段及叶片再生不定芽的研究第49-55页
  1 材料与方法第49-50页
   1.1 材料第49页
   1.2 培养基第49页
   1.3 培养条件第49页
   1.4 外植体的处理方式第49页
   1.5 统计分析第49-50页
  2 结果与分析第50-54页
   2.1 再生不定芽的动态描述第50页
   2.2 植物生长调节剂对不定芽发生的影响第50-51页
   2.3 不同部分的茎段不定芽发生能力的差异第51-52页
   2.4 不同处理方式对茎段不定芽发生能力的影响第52-53页
   2.5 阶段暗培养及LH对茎段不定芽发生能力的影响第53-54页
  3 小结与讨论第54-55页
   3.1 茎段再生不定芽第54页
   3.2 叶片再生不定芽第54-55页
 三、 油(木奈)子叶和上胚轴再生不定芽的研究第55-60页
  1 材料与方法第55-56页
   1.1 材料第55页
   1.2 培养基第55页
   1.3 外植体的种类及培养条件第55页
   1.4 外植体的放置及处理方式第55页
   1.5 统计分析第55-56页
  2 结果与分析第56-58页
   2.1 6-BA对不定芽发生能力的影响第56-57页
   2.2 子叶不同部分横切片不定芽发生能力的差异第57页
   2.3 子叶不同损伤处理对不定芽发生能力的影响第57-58页
   2.4 上胚轴的不同放置和损伤对不定芽发生能力的影响第58页
  3 小结与讨论第58-60页
Ⅲ 农杆菌介导油(木奈)遗传转化的初步研究第60-79页
 一、 发根农杆菌介导油(木奈)遗传转化体系的研究第61-68页
  1 材料与方法第61-63页
   1.1 植物材料第61页
   1.2 发根农杆菌菌株及其培养第61-62页
    1.2.1 菌株种类第61-62页
    1.2.2 菌株的培养与保存第62页
   1.3 直接接种法诱导毛状根第62页
    1.3.1 转化菌液的制备第62页
    1.3.2 整体植株接种第62页
    1.3.3 茎段接种第62页
   1.4 共感染接种法诱导毛状根第62-63页
   1.5 毛状根的培养第63页
    1.5.1 脱菌培养第63页
    1.5.2 毛状根的诱导分化第63页
   1.6 毛状根的统计第63页
  2 结果与分析第63-66页
   2.1 直接接种法诱导毛状根第63-65页
   2.2 共感染法诱导毛状根第65-66页
   2.3 毛状根的培养第66页
  3 小结与讨论第66-68页
   3.1 不同的发根农杆菌菌株对不同类型的外植体侵染能力不同第66-67页
   3.2 转化油(木奈)诱导的毛状根未完全表现出典型的毛状根特征第67页
   3.3 未能使毛状根发生分化第67-68页
 二、 根癌农杆菌介导ACO基因转化油(木奈)的初步研究第68-79页
  1 材料与方法第68-74页
   1.1 材料第68-69页
    1.1.1 植物材料第68页
    1.1.2 植物表达载体和细菌菌株第68页
    1.1.3 工具酶及试剂第68页
    1.1.4 主要溶液白配制第68-69页
   1.2 方法第69-74页
    1.2.1 pBIO.8和pBIF1中ACO基因的鉴定第69-71页
    1.2.2 pBI0.8和pBIF1转化根癌农杆菌及PCR鉴定第71-72页
    1.2.3 ACO基因转化油(木奈)试管苗叶片和茎段第72-74页
  2 结果与分析第74-77页
   2.1 pBIO.8和pBIF1中ACO基因的鉴定第74-75页
    2.1.1 酶切鉴定第74页
    2.1.2 PCR鉴定第74-75页
   2.2 根癌农杆菌转化子的PCR鉴定第75-76页
   2.3 Kan的基础抗性测定第76页
   2.4 获得转化体第76-77页
   2.5 目的基因的PCR检测第77页
  3 小结与讨论第77-79页
   3.1 植物表达载体中目的基因的鉴定第77页
   3.2 目的基因转化根癌农杆菌第77页
   3.3 目的基因整合受体系统第77-79页
参考文献第79-91页
附录 1: pBIO.8和pBIP1的构建图第91-92页
附录 2: 图版第92-97页
致谢第97页

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