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由表皮生长因子受体介导的癌细胞趋化运动机制初探

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
第一章 绪言第13-25页
   ·细胞的趋化运动第13-15页
   ·肿瘤转移第15-17页
     ·肿瘤形成第15-16页
     ·肿瘤转移第16-17页
   ·表皮生长因子受体(EPIDERMAL GROWTH FACTOR RECEPTOR, EGFR)第17-20页
     ·EGFR 的结构第18页
     ·EGFR 的功能第18-20页
   ·乳腺癌研究现状第20-22页
   ·本论文的研究基础第22-23页
   ·本论文的研究方案第23-25页
第二章 脂筏在EGFR 介导的乳腺癌趋化运动中的作用第25-45页
   ·前言第25-32页
     ·脂筏(lipid rafts)的存在第25-28页
     ·细胞膜穴样内陷(Caveolae)第28-29页
     ·脂筏的功能第29-30页
     ·脂筏与EGFR第30-32页
   ·实验假设第32页
   ·实验主要仪器设备及材料第32-33页
   ·实验方法第33-36页
     ·细胞培养第33页
     ·实验前的细胞处理第33页
     ·细胞趋化运动和化学运动性分析第33-34页
     ·细胞黏附实验第34页
     ·分离脂筏第34页
     ·划痕实验(伤口愈合实验)第34-35页
     ·F-actin 聚合实验第35页
     ·Western blotting第35页
     ·流式细胞分析(FACS)第35-36页
     ·免疫染色第36页
   ·实验结果第36-43页
     ·EGFR 在乳腺癌细胞膜上的定位第36-37页
     ·去除胆固醇对EGF 诱导的乳腺癌细胞趋化运动的影响第37-38页
     ·EGF 诱导的细胞黏附和迁移第38-41页
     ·EGFR 的内化第41页
     ·EGF 诱导一些重要信号分子的活化第41-43页
   ·实验讨论第43-45页
第三章 PDK1 在EGFR 介导的乳腺癌细胞趋化运动中的调控作用第45-65页
   ·前言第45-49页
     ·PDK1 的发现第45-46页
     ·PDK1 的结构第46页
     ·PDK1 的功能第46-49页
     ·PDK1 抑制剂第49页
   ·实验假设第49-50页
   ·实验主要仪器设备和材料第50页
   ·实验方法第50-52页
     ·质粒构建第50-51页
     ·细胞转染第51页
     ·RT-PCR第51-52页
     ·细胞增殖实验第52页
     ·Western blotting第52页
     ·体内转移实验第52页
   ·实验结果第52-62页
     ·PDK1 降表达影响细胞迁移第52-54页
     ·PDK1 降表达影响癌细胞趋化运动第54-55页
     ·PDK1 降表达影响癌细胞黏附第55-57页
     ·PDK1 降表达影响癌细胞肌动蛋白聚合第57-58页
     ·PDK1 降表达影响EGF 诱导的Akt 、PKCζ和MAPK 的活化第58-60页
     ·PDK1 过表达对EGF 诱导的趋化运动及细胞黏附的影响第60-61页
     ·PDK1 降表达影响乳腺癌细胞转移第61-62页
   ·实验讨论第62-65页
第四章 PKCζ参与EGFR 介导的非小细胞肺癌细胞趋化运动第65-75页
   ·前言第65-67页
     ·肺癌第65页
     ·PKC 家族第65-66页
     ·PKCζ的结构第66-67页
     ·PKCζ的功能第67页
     ·非小细胞肺癌细胞的趋化运动研究第67页
   ·实验假设第67-68页
   ·实验主要设备和材料第68页
   ·实验方法第68-69页
     ·细胞培养第68页
     ·流式细胞分析(FACS)第68页
     ·Western blotting第68-69页
   ·实验结果第69-74页
     ·EGF 诱导NSCLC 细胞发生趋化运动第69-70页
     ·PKC 家族在NSCLC 细胞趋化运动中的作用第70-71页
     ·EGF 能够激活NSCLC 细胞中的PKCζ第71-72页
     ·PKCζ假底物抑制EGF 诱导的NSCLC 细胞趋化运动第72-73页
     ·PKCζ受到 PI3K/Akt 信号通路的调节第73-74页
   ·实验讨论第74-75页
第五章 研发高效灵敏的乳腺癌转移检测试剂盒第75-87页
   ·前言第75-78页
     ·肿瘤转移检测第75-76页
     ·肿瘤标志物第76-77页
     ·PCR第77页
     ·免疫磁珠第77-78页
   ·实验假设第78-79页
   ·实验主要设备和材料第79页
   ·实验方法第79-81页
     ·准备细胞第79页
     ·免疫磁珠富集癌细胞第79-80页
     ·单细胞RT-PCR第80-81页
     ·注意事项第81页
   ·实验结果第81-84页
     ·单细胞RT-PCR 扩增乳腺癌细胞中的基因标志物第82页
     ·免疫磁珠富集细胞第82-83页
     ·免疫磁珠富集与单细胞RT-PCR 联用检测PBS 中混入的癌细胞第83页
     ·免疫磁珠富集与单细胞RT-PCR 联用检测外周血中混入的癌细胞第83-84页
   ·实验讨论第84-87页
第六章 筛选PKCζ的小分子抑制剂第87-91页
   ·前言第87页
   ·实验假设第87页
   ·实验主要设备和材料第87页
   ·实验方法第87-88页
   ·实验结果第88-89页
     ·筛选细胞模型的建立第88页
     ·PKCζ小分子抑制剂的筛选第88-89页
   ·实验讨论第89-91页
第七章 总结与展望第91-93页
参考文献第93-112页
附录第112-115页
致谢第115-117页

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