摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
第一章 绪言 | 第13-25页 |
·细胞的趋化运动 | 第13-15页 |
·肿瘤转移 | 第15-17页 |
·肿瘤形成 | 第15-16页 |
·肿瘤转移 | 第16-17页 |
·表皮生长因子受体(EPIDERMAL GROWTH FACTOR RECEPTOR, EGFR) | 第17-20页 |
·EGFR 的结构 | 第18页 |
·EGFR 的功能 | 第18-20页 |
·乳腺癌研究现状 | 第20-22页 |
·本论文的研究基础 | 第22-23页 |
·本论文的研究方案 | 第23-25页 |
第二章 脂筏在EGFR 介导的乳腺癌趋化运动中的作用 | 第25-45页 |
·前言 | 第25-32页 |
·脂筏(lipid rafts)的存在 | 第25-28页 |
·细胞膜穴样内陷(Caveolae) | 第28-29页 |
·脂筏的功能 | 第29-30页 |
·脂筏与EGFR | 第30-32页 |
·实验假设 | 第32页 |
·实验主要仪器设备及材料 | 第32-33页 |
·实验方法 | 第33-36页 |
·细胞培养 | 第33页 |
·实验前的细胞处理 | 第33页 |
·细胞趋化运动和化学运动性分析 | 第33-34页 |
·细胞黏附实验 | 第34页 |
·分离脂筏 | 第34页 |
·划痕实验(伤口愈合实验) | 第34-35页 |
·F-actin 聚合实验 | 第35页 |
·Western blotting | 第35页 |
·流式细胞分析(FACS) | 第35-36页 |
·免疫染色 | 第36页 |
·实验结果 | 第36-43页 |
·EGFR 在乳腺癌细胞膜上的定位 | 第36-37页 |
·去除胆固醇对EGF 诱导的乳腺癌细胞趋化运动的影响 | 第37-38页 |
·EGF 诱导的细胞黏附和迁移 | 第38-41页 |
·EGFR 的内化 | 第41页 |
·EGF 诱导一些重要信号分子的活化 | 第41-43页 |
·实验讨论 | 第43-45页 |
第三章 PDK1 在EGFR 介导的乳腺癌细胞趋化运动中的调控作用 | 第45-65页 |
·前言 | 第45-49页 |
·PDK1 的发现 | 第45-46页 |
·PDK1 的结构 | 第46页 |
·PDK1 的功能 | 第46-49页 |
·PDK1 抑制剂 | 第49页 |
·实验假设 | 第49-50页 |
·实验主要仪器设备和材料 | 第50页 |
·实验方法 | 第50-52页 |
·质粒构建 | 第50-51页 |
·细胞转染 | 第51页 |
·RT-PCR | 第51-52页 |
·细胞增殖实验 | 第52页 |
·Western blotting | 第52页 |
·体内转移实验 | 第52页 |
·实验结果 | 第52-62页 |
·PDK1 降表达影响细胞迁移 | 第52-54页 |
·PDK1 降表达影响癌细胞趋化运动 | 第54-55页 |
·PDK1 降表达影响癌细胞黏附 | 第55-57页 |
·PDK1 降表达影响癌细胞肌动蛋白聚合 | 第57-58页 |
·PDK1 降表达影响EGF 诱导的Akt 、PKCζ和MAPK 的活化 | 第58-60页 |
·PDK1 过表达对EGF 诱导的趋化运动及细胞黏附的影响 | 第60-61页 |
·PDK1 降表达影响乳腺癌细胞转移 | 第61-62页 |
·实验讨论 | 第62-65页 |
第四章 PKCζ参与EGFR 介导的非小细胞肺癌细胞趋化运动 | 第65-75页 |
·前言 | 第65-67页 |
·肺癌 | 第65页 |
·PKC 家族 | 第65-66页 |
·PKCζ的结构 | 第66-67页 |
·PKCζ的功能 | 第67页 |
·非小细胞肺癌细胞的趋化运动研究 | 第67页 |
·实验假设 | 第67-68页 |
·实验主要设备和材料 | 第68页 |
·实验方法 | 第68-69页 |
·细胞培养 | 第68页 |
·流式细胞分析(FACS) | 第68页 |
·Western blotting | 第68-69页 |
·实验结果 | 第69-74页 |
·EGF 诱导NSCLC 细胞发生趋化运动 | 第69-70页 |
·PKC 家族在NSCLC 细胞趋化运动中的作用 | 第70-71页 |
·EGF 能够激活NSCLC 细胞中的PKCζ | 第71-72页 |
·PKCζ假底物抑制EGF 诱导的NSCLC 细胞趋化运动 | 第72-73页 |
·PKCζ受到 PI3K/Akt 信号通路的调节 | 第73-74页 |
·实验讨论 | 第74-75页 |
第五章 研发高效灵敏的乳腺癌转移检测试剂盒 | 第75-87页 |
·前言 | 第75-78页 |
·肿瘤转移检测 | 第75-76页 |
·肿瘤标志物 | 第76-77页 |
·PCR | 第77页 |
·免疫磁珠 | 第77-78页 |
·实验假设 | 第78-79页 |
·实验主要设备和材料 | 第79页 |
·实验方法 | 第79-81页 |
·准备细胞 | 第79页 |
·免疫磁珠富集癌细胞 | 第79-80页 |
·单细胞RT-PCR | 第80-81页 |
·注意事项 | 第81页 |
·实验结果 | 第81-84页 |
·单细胞RT-PCR 扩增乳腺癌细胞中的基因标志物 | 第82页 |
·免疫磁珠富集细胞 | 第82-83页 |
·免疫磁珠富集与单细胞RT-PCR 联用检测PBS 中混入的癌细胞 | 第83页 |
·免疫磁珠富集与单细胞RT-PCR 联用检测外周血中混入的癌细胞 | 第83-84页 |
·实验讨论 | 第84-87页 |
第六章 筛选PKCζ的小分子抑制剂 | 第87-91页 |
·前言 | 第87页 |
·实验假设 | 第87页 |
·实验主要设备和材料 | 第87页 |
·实验方法 | 第87-88页 |
·实验结果 | 第88-89页 |
·筛选细胞模型的建立 | 第88页 |
·PKCζ小分子抑制剂的筛选 | 第88-89页 |
·实验讨论 | 第89-91页 |
第七章 总结与展望 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-112页 |
附录 | 第112-115页 |
致谢 | 第115-117页 |