| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-24页 |
| 1 生物固氮的研究意义 | 第10页 |
| 2 固氮芽孢杆菌的研究进展 | 第10-15页 |
| ·固氮芽孢杆菌在农业方面的应用及现状 | 第10-12页 |
| ·固氮芽孢杆菌的分类研究现状 | 第12-13页 |
| ·芽孢杆菌的分类鉴定方法 | 第13-15页 |
| 3 根际联合固氮菌与植物的相互作用 | 第15-19页 |
| ·根际联合固氮菌对植物的促进作用 | 第15-16页 |
| ·联合固氮作用的影响因素 | 第16-17页 |
| ·固氮作用的测定方法 | 第17-19页 |
| 4 PCR-DGGE技术的原理及应用前景 | 第19-23页 |
| ·DGGE技术基本原理 | 第19-20页 |
| ·PCR-DGGE技术基本流程 | 第20页 |
| ·PCR-DGGE技术在微生物生态学中的应用 | 第20-22页 |
| ·DGGE技术的优越性和局限性 | 第22-23页 |
| 5 本论文研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 高效固氮芽孢菌的分离筛选、纯化及鉴定 | 第24-34页 |
| 1 材料与方法 | 第24-29页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·土壤来源 | 第24页 |
| ·基础培养基 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-29页 |
| ·菌种分离 | 第24页 |
| ·菌种纯化和保存 | 第24-25页 |
| ·菌种形态观察 | 第25页 |
| ·固氮酶活性测定 | 第25页 |
| ·生理生化测定 | 第25-28页 |
| ·16S rDNA序列分析鉴定 | 第28-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-32页 |
| ·固氮芽孢杆菌的筛选 | 第29页 |
| ·菌株固氮酶活性的测定 | 第29页 |
| ·12株高固氮酶活菌株的形态特征 | 第29-30页 |
| ·菌株的生理生化测定 | 第30-32页 |
| ·16S rDNA序列测定 | 第32页 |
| ·16S rDNA PCR扩增 | 第32页 |
| ·16S rDNA序列测定和分析 | 第32页 |
| 3 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 固氮芽孢杆菌对小白菜的接种效应 | 第34-39页 |
| 1 材料与方法 | 第34-36页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·供试菌株 | 第34页 |
| ·供试盆 | 第34页 |
| ·供试土壤 | 第34页 |
| ·小白菜种子表面灭菌处理 | 第34页 |
| ·育苗及移栽 | 第34页 |
| ·接种剂制备 | 第34页 |
| ·营养液配制 | 第34-35页 |
| ·试验设计与方法 | 第35页 |
| ·测定项目及方法 | 第35-36页 |
| ·植株生长情况观测比较 | 第35页 |
| ·植株产量测定 | 第35页 |
| ·植株体内总含氮量检测 | 第35页 |
| ·根际土壤理化性质检测 | 第35-36页 |
| ·数据分析 | 第36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-37页 |
| ·接种固氮芽孢杆菌对植株生长的影响 | 第36页 |
| ·接种固氮芽孢杆菌对植株产量和全氮量的影响 | 第36-37页 |
| ·B3、S9菌株对土壤全氮、有效磷和速效钾的影响 | 第37页 |
| 3 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 固氮芽孢杆菌对根际土壤细菌多样性的影响 | 第39-44页 |
| 1 材料与方法 | 第39-41页 |
| ·土壤样品 | 第39页 |
| ·土壤总 DNA提取 | 第39-40页 |
| ·SDS-chloroform法 | 第39页 |
| ·蛋白酶K法 | 第39-40页 |
| ·土壤总DNA的16S rDNA V3区扩增 | 第40页 |
| ·引物 | 第40页 |
| ·PCR扩增反应体系 | 第40页 |
| ·PCR反应条件 | 第40页 |
| ·电泳检测 | 第40页 |
| ·PCR反应产物的变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析 | 第40-41页 |
| ·变性梯度凝胶电泳(DGGE)后的特异条带分析 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-43页 |
| ·两种方法提取土壤总DNA的结果比较 | 第41页 |
| ·16S rDNA V3高变区的PCR扩增 | 第41页 |
| ·PCR产物的DGGE分析 | 第41-42页 |
| ·聚类分析结果 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-44页 |
| 第五章 高效固氮芽孢杆菌B3、S9的环境适应性检测 | 第44-47页 |
| 1 材料和方法 | 第44-45页 |
| ·菌株 | 第44页 |
| ·环境因子对菌株固氮活性影响试验设计 | 第44-45页 |
| ·温度影响试验 | 第44页 |
| ·酸碱度影响试验 | 第44页 |
| ·铵盐影响试验 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-46页 |
| ·温度对菌株固氮酶活性的影响 | 第45页 |
| ·酸碱度对菌株生长和固氮酶活性的影响 | 第45-46页 |
| ·铵盐对菌株生长和固氮酶活性的影响 | 第46页 |
| 3 讨论 | 第46-47页 |
| 第六章 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 附录 | 第54-62页 |
| 1 气相色谱仪测定的乙烯峰高图 | 第54-57页 |
| 2 12株菌的菌落形状图 | 第57-58页 |
| 3 菌体染色图 | 第58-60页 |
| 4 小白菜收获期盆栽图 | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62页 |