| 目录 | 第1-8页 |
| 缩写词 | 第8-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 前言 | 第14-22页 |
| 1 文献综述 | 第14-20页 |
| ·植物启动子的结构特征与基因表达的关系 | 第14-15页 |
| ·植物启动子的分类及其特点 | 第15-17页 |
| ·植物启动子的克隆技术与功能鉴定 | 第17-20页 |
| 2 研究背景 | 第20-21页 |
| 3 本研究的内容与技术路线 | 第21-22页 |
| ·(木奈)果肉PPO基因5′端调控序列的克隆 | 第21页 |
| ·木奈嫩叶和果肉PPO基因启动子的功能鉴定 | 第21-22页 |
| 第一章(木奈)果肉PPO基因5′端调控序列的克隆 | 第22-41页 |
| 1.试验材料 | 第22-23页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·菌株和克隆载体 | 第22页 |
| ·常用试剂 | 第22页 |
| ·试剂盒、酶和Marker | 第22-23页 |
| ·引物合成 | 第23页 |
| 2.试验方法 | 第23-29页 |
| ·木奈基因组DNA的提取与测定 | 第23页 |
| ·木奈果肉PPO基因5′端调控序列的克隆 | 第23-27页 |
| ·目的片段的回收 | 第27页 |
| ·目的片段与T载体的连接 | 第27-28页 |
| ·感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第28页 |
| ·连接产物的转化与蓝白斑筛选 | 第28-29页 |
| ·重组子的筛选—菌落PCR | 第29页 |
| ·测序与序列分析 | 第29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-41页 |
| ·木奈基因组DNA的提取与酶切 | 第29-30页 |
| ·木奈果肉PPO基因5′端调控序列的克隆 | 第30-35页 |
| ·木奈果肉PPO基因5′端调控序列的顺式作用元件分析 | 第35-39页 |
| ·木奈果肉PPO基因5′端调控序列的核苷酸同源性分析 | 第39-41页 |
| 第二章 (木奈)嫩叶和果肉PPO基因启动子的功能鉴定 | 第41-53页 |
| 1.试验材料 | 第41-42页 |
| ·植物材料 | 第41页 |
| ·菌种和载体 | 第41页 |
| ·试剂和设备 | 第41页 |
| ·酶、试剂盒及Marker | 第41页 |
| ·引物合成 | 第41-42页 |
| 2.试验方法 | 第42-47页 |
| ·木奈基因组DNA提取与测定(同第一章2.1) | 第42页 |
| ·木奈嫩叶PPO基因5′端调控序列缺失片段的扩增 | 第42-43页 |
| ·木奈果肉PPO基因5′端调控序列缺失片段的扩增 | 第43-44页 |
| ·木奈PPO基因5′端调控序列缺失片段的克隆 | 第44页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第44页 |
| ·载体构建 | 第44-45页 |
| ·木奈嫩叶、果实的基因枪转化与GUS基因瞬时表达的研究 | 第45-47页 |
| 3.结果与分析 | 第47-53页 |
| ·含木奈嫩叶PPO基因5′端调控序列缺失片段的植物表达载体构建 | 第47-49页 |
| ·含木奈果肉PPO基因5′端调控序列缺失片段的植物表达载体构建 | 第49页 |
| ·木奈嫩叶、果实的基因枪转化与GUS基因瞬时表达 | 第49-53页 |
| 第三章 讨论 | 第53-58页 |
| 1.染色体步移技术在启动子克隆中的优势与局限性 | 第53-54页 |
| 2.植物启动子核苷酸序列的保守性 | 第54-55页 |
| 3.植物PPO基因的多基因家族性与其启动子组织特异性的关系 | 第55-56页 |
| 4.改造PPO基因启动子是抑制果实褐变的新途径 | 第56-57页 |
| 5.展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
