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鸡IL-2cDNA及其去信号肽cDNA的原核和酵母表达研究

摘要第1-4页
Summary第4-8页
第一篇 文献综述第8-25页
 第一章 白细胞介素2 概况第8-15页
  1 IL-2 的分类、结构与功能第8-9页
  2 IL-2 受体(IL-2R)第9-10页
  3 IL-2 的纯化和突变分析第10-11页
  4 白细胞介素2 的生物学功能第11-12页
  5 白介素2 基因克隆与表达第12-13页
  6 IL-2 在畜禽业中的应用前景第13-15页
   ·传染性法氏囊病(IBD)是目前危害世界养禽业的两大传染病之一第13页
   ·马立克病(MD)由 B 疱疹病毒引起的、具有高度接触传染性的肿瘤性疾病第13-14页
   ·IL-2 在其他抗感染免疫中也发挥同样作用第14-15页
 第二章 大肠杆菌表达系统第15-18页
  1 大肠杆菌表达系统的特点第15页
  2 表达载体第15-16页
  3 外源基因在大肠杆菌中表达效率的影响因素第16-18页
   ·密码子的选用第16页
   ·外源基因mRNA 的稳定性第16页
   ·翻译起始效率第16-18页
 第三章 巴斯德毕赤酵母( P.pastoris)研究进展第18-25页
  1 巴斯德毕赤酵母表达系统概述第18-19页
  2 巴斯德毕赤酵母菌株第19页
  3 巴斯德毕赤酵母表达载体第19-21页
  4 基因整合第21页
  5 影响外源基因表达的因素第21-25页
   ·启动子的影响第21-22页
   ·外源基因自身的影响第22-23页
   ·信号肽第23页
   ·基因剂量第23页
   ·发酵条件第23-25页
第二篇 研究报告第25-54页
 第一章 鸡 IL-2 cDNA 及其去信号肽 cDNA的克隆与原核表达第25-42页
  1 材料第25-28页
   ·鸡胚和新城疫疫苗第25页
   ·菌株和载体第25页
   ·工具酶和主要试剂第25-26页
   ·主要仪器第26页
   ·试剂配制第26-28页
  2 方法第28-33页
   ·目的基因的扩增第28-29页
   ·目的基因的克隆第29-30页
   ·重组克隆质粒的提取与鉴定第30-31页
   ·重组表达质粒的构建第31-32页
   ·重组表达质粒的提取与鉴定第32页
   ·重组质粒的诱导表达与鉴定第32-33页
   ·ChIL-2 全基因和去除信号肽基因mRNA 二级结构的预测第33页
  3 结果和分析第33-40页
   ·RT-PCR 产物的鉴定第33页
   ·重组克隆质粒的酶切鉴定第33-34页
   ·重组原核表达质粒的酶切鉴定与测序第34-35页
   ·表达产物SDS-PAGE 电泳第35页
   ·表达产物的Western-bloting 鉴定第35页
   ·ChIL-2 全基因和去除信号肽基因mRNA 二级结构的分析第35-40页
  4 讨论第40-42页
 第二章 鸡 IL-2 cDNA 及其去信号肽cDNA 酵母表达第42-54页
  1 材料第42-43页
   ·菌株和载体第42页
   ·工具酶和主要试剂第42页
   ·主要仪器第42页
   ·试剂配制第42-43页
  2 方法第43-47页
   ·酵母重组表达质粒的构建第43-44页
   ·酵母重组表达质粒提取与鉴定第44页
   ·毕赤酵母菌的转化第44-45页
   ·重组菌株的筛选与鉴定第45-46页
   ·重组酵母菌的诱导表达与鉴定第46-47页
   ·ChIL-2 全基因和去除信号肽基因mRNA 二级结构的预测第47页
  3 结果和分析第47-52页
   ·重组表达质粒的鉴定第47-48页
   ·重组表达质粒线性化第48页
   ·高抗性重组酵母菌株的筛选第48页
   ·重组酵母菌株基因组的PCR 鉴定第48-50页
   ·重组酵母菌株的诱导表达第50页
   ·Western-blotting 鉴别表达产物第50页
   ·预测ChIL-2 全基因和去除信号肽基因mRNA 二级结构第50-52页
  4 讨论第52-54页
结论第54-55页
参考文献第55-60页
缩写词英汉对照表第60-62页
致谢第62-63页
作者简介第63-64页
导师简介第64-65页

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