摘要 | 第1-4页 |
Summary | 第4-8页 |
第一篇 文献综述 | 第8-25页 |
第一章 白细胞介素2 概况 | 第8-15页 |
1 IL-2 的分类、结构与功能 | 第8-9页 |
2 IL-2 受体(IL-2R) | 第9-10页 |
3 IL-2 的纯化和突变分析 | 第10-11页 |
4 白细胞介素2 的生物学功能 | 第11-12页 |
5 白介素2 基因克隆与表达 | 第12-13页 |
6 IL-2 在畜禽业中的应用前景 | 第13-15页 |
·传染性法氏囊病(IBD)是目前危害世界养禽业的两大传染病之一 | 第13页 |
·马立克病(MD)由 B 疱疹病毒引起的、具有高度接触传染性的肿瘤性疾病 | 第13-14页 |
·IL-2 在其他抗感染免疫中也发挥同样作用 | 第14-15页 |
第二章 大肠杆菌表达系统 | 第15-18页 |
1 大肠杆菌表达系统的特点 | 第15页 |
2 表达载体 | 第15-16页 |
3 外源基因在大肠杆菌中表达效率的影响因素 | 第16-18页 |
·密码子的选用 | 第16页 |
·外源基因mRNA 的稳定性 | 第16页 |
·翻译起始效率 | 第16-18页 |
第三章 巴斯德毕赤酵母( P.pastoris)研究进展 | 第18-25页 |
1 巴斯德毕赤酵母表达系统概述 | 第18-19页 |
2 巴斯德毕赤酵母菌株 | 第19页 |
3 巴斯德毕赤酵母表达载体 | 第19-21页 |
4 基因整合 | 第21页 |
5 影响外源基因表达的因素 | 第21-25页 |
·启动子的影响 | 第21-22页 |
·外源基因自身的影响 | 第22-23页 |
·信号肽 | 第23页 |
·基因剂量 | 第23页 |
·发酵条件 | 第23-25页 |
第二篇 研究报告 | 第25-54页 |
第一章 鸡 IL-2 cDNA 及其去信号肽 cDNA的克隆与原核表达 | 第25-42页 |
1 材料 | 第25-28页 |
·鸡胚和新城疫疫苗 | 第25页 |
·菌株和载体 | 第25页 |
·工具酶和主要试剂 | 第25-26页 |
·主要仪器 | 第26页 |
·试剂配制 | 第26-28页 |
2 方法 | 第28-33页 |
·目的基因的扩增 | 第28-29页 |
·目的基因的克隆 | 第29-30页 |
·重组克隆质粒的提取与鉴定 | 第30-31页 |
·重组表达质粒的构建 | 第31-32页 |
·重组表达质粒的提取与鉴定 | 第32页 |
·重组质粒的诱导表达与鉴定 | 第32-33页 |
·ChIL-2 全基因和去除信号肽基因mRNA 二级结构的预测 | 第33页 |
3 结果和分析 | 第33-40页 |
·RT-PCR 产物的鉴定 | 第33页 |
·重组克隆质粒的酶切鉴定 | 第33-34页 |
·重组原核表达质粒的酶切鉴定与测序 | 第34-35页 |
·表达产物SDS-PAGE 电泳 | 第35页 |
·表达产物的Western-bloting 鉴定 | 第35页 |
·ChIL-2 全基因和去除信号肽基因mRNA 二级结构的分析 | 第35-40页 |
4 讨论 | 第40-42页 |
第二章 鸡 IL-2 cDNA 及其去信号肽cDNA 酵母表达 | 第42-54页 |
1 材料 | 第42-43页 |
·菌株和载体 | 第42页 |
·工具酶和主要试剂 | 第42页 |
·主要仪器 | 第42页 |
·试剂配制 | 第42-43页 |
2 方法 | 第43-47页 |
·酵母重组表达质粒的构建 | 第43-44页 |
·酵母重组表达质粒提取与鉴定 | 第44页 |
·毕赤酵母菌的转化 | 第44-45页 |
·重组菌株的筛选与鉴定 | 第45-46页 |
·重组酵母菌的诱导表达与鉴定 | 第46-47页 |
·ChIL-2 全基因和去除信号肽基因mRNA 二级结构的预测 | 第47页 |
3 结果和分析 | 第47-52页 |
·重组表达质粒的鉴定 | 第47-48页 |
·重组表达质粒线性化 | 第48页 |
·高抗性重组酵母菌株的筛选 | 第48页 |
·重组酵母菌株基因组的PCR 鉴定 | 第48-50页 |
·重组酵母菌株的诱导表达 | 第50页 |
·Western-blotting 鉴别表达产物 | 第50页 |
·预测ChIL-2 全基因和去除信号肽基因mRNA 二级结构 | 第50-52页 |
4 讨论 | 第52-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
缩写词英汉对照表 | 第60-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简介 | 第63-64页 |
导师简介 | 第64-65页 |