目录 | 第1-6页 |
英文缩略词 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-26页 |
1 玉米概述 | 第10-11页 |
2 植物分子标记的研究进展 | 第11-16页 |
·第1代分子标记 | 第11-13页 |
·RFLP标记技术 | 第11-12页 |
·RAPD标记技术 | 第12页 |
·AFLP标记技术 | 第12-13页 |
·第2代分子标记 | 第13-15页 |
·SSR标记技术 | 第13-14页 |
·ISSR标记技术 | 第14-15页 |
·第3代分子标记 | 第15-16页 |
·SNP标记技术 | 第15页 |
·EST标记技术 | 第15-16页 |
3 基因差异表达分析方法的研究进展 | 第16-19页 |
·差异显示PCR法 | 第16-17页 |
·消减杂交法 | 第17页 |
·基因芯片技术 | 第17-18页 |
·cDNA—AFLP技术 | 第18-19页 |
4 cDNA-AFLP技术的特点及应用 | 第19-24页 |
·cDNA—AFLP的技术特点 | 第19-22页 |
·cDNA—AFLP"假阳性"低,重复性高,可检测低丰度表达的mRNA | 第19-20页 |
·cDNA-AFLP可准确地反映基因间表达量的区别 | 第20-21页 |
·cDNA—AFLP技术中内切酶与引物的选择 | 第21页 |
·cDNA—AFLP可全面获取转录组的表达信息 | 第21-22页 |
·cDNA-AFLP技术在植物遗传育种上的应用 | 第22-24页 |
·遗传分子标记分析 | 第22页 |
·杂种优势遗传机理的研究 | 第22-23页 |
·基因表达特性研究及分离特异表达基因 | 第23-24页 |
5 本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
第二部分 玉米双低频酶cDNA-AFLP体系的建立 | 第26-36页 |
1 实验材料 | 第26页 |
·植物材料 | 第26页 |
·生化试剂 | 第26页 |
·相关器具 | 第26页 |
2 实验方法 | 第26-30页 |
·总RNA提取方法 | 第26-28页 |
·RNAiso Reagent法 | 第26-27页 |
·柱式试剂盒法 | 第27页 |
·异硫氰酸胍法 | 第27-28页 |
·双链cDNA的合成 | 第28-29页 |
·cDNA-AFLP体系 | 第29-30页 |
·所用接头和引物的DNA序列 | 第29页 |
·cDNA的酶切消化 | 第29页 |
·接头与酶切产物的连接 | 第29-30页 |
·预扩增反应 | 第30页 |
·选择性扩增反应 | 第30页 |
·扩增产物的分离 | 第30页 |
3 结果与分析 | 第30-34页 |
·三种方法提取的RNA检测结果 | 第30-31页 |
·AFLP预扩增产物检测结果 | 第31-32页 |
·选择性扩增产物检测结果 | 第32-34页 |
4 讨论 | 第34-36页 |
第三部分 玉米cDNA-AFLP表达差异分析 | 第36-47页 |
1 实验材料 | 第36-38页 |
·植物材料 | 第36-37页 |
·亲本材料 | 第36页 |
·近等基因材料 | 第36-37页 |
·生化试剂 | 第37-38页 |
·相关器具 | 第38页 |
2 实验方法 | 第38-42页 |
·玉米总RNA的提取(RNAiso Reagent法) | 第38页 |
·双链cDNA的合成 | 第38-39页 |
·cDNA-AFLP分析 | 第39-41页 |
·所用接头和引物的DNA序列 | 第39-40页 |
·cDNA的酶切消化 | 第40页 |
·接头与酶切产物的连接 | 第40页 |
·预扩增反应 | 第40页 |
·选择性扩增反应 | 第40-41页 |
·扩增产物的分离 | 第41页 |
·差异表达片段的回收及测序 | 第41-42页 |
·目标差异片段从PAGE凝胶中回收 | 第41页 |
·再扩增及回收纯化 | 第41页 |
·目标片段测序 | 第41-42页 |
3 结果与分析 | 第42-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
附录1 | 第53-54页 |
附录2 | 第54-56页 |
附录3 | 第56-59页 |