| 中文摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-8页 |
| 第1章 绪论 | 第8-25页 |
| ·RIP 的研究概况 | 第8-17页 |
| ·RIP 的定义和研究历史 | 第8-9页 |
| ·RIP 的分类和分布 | 第9-10页 |
| ·RIP 的结构与功能 | 第10-12页 |
| ·RIP 的酶学性质 | 第12-17页 |
| ·RIP 的应用 | 第17-22页 |
| ·抗生育活性 | 第17页 |
| ·抗艾滋病病毒活性 | 第17-18页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第18-19页 |
| ·植物的防御作用 | 第19-21页 |
| ·调节细胞代谢的作用 | 第21页 |
| ·作为储存蛋白 | 第21-22页 |
| ·RIP 研究的意义 | 第22-23页 |
| ·RIP 基因克隆的研究进展 | 第23-25页 |
| 第2章 材料与方法 | 第25-44页 |
| ·实验材料 | 第25-29页 |
| ·菌种和质粒 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·主要生化试剂 | 第26-27页 |
| ·主要缓冲液和试剂配置 | 第27-28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28-29页 |
| ·主要实验器具 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-44页 |
| ·RIP 的提取 | 第29-30页 |
| ·RIP cDNA 3′-端的克隆 | 第30-37页 |
| ·RIP cDNA 5′-端的克隆 | 第37-43页 |
| ·RIP基因的cDNA全长序列及验证 | 第43-44页 |
| 第3章 结果与分析 | 第44-64页 |
| ·黑木耳RIP 的提取 | 第44-46页 |
| ·黑木耳菌丝体的培养 | 第44页 |
| ·菌丝体RIP 的粗提 | 第44页 |
| ·黑木耳RIP 的纯化 | 第44-45页 |
| ·高压液相色谱测定RIP 的纯度 | 第45-46页 |
| ·RIP cDNA 3′-端的克隆 | 第46-56页 |
| ·RIP 的N-末端的氨基酸序列分析 | 第46-47页 |
| ·RIP 的 MALDI-TOF 质谱分析 | 第47-48页 |
| ·cDNA 3′-RACE 反应上游 PCR 引物的设计 | 第48-51页 |
| ·菌丝体总RNA 的提取和纯度检测 | 第51-53页 |
| ·RIP cDNA 的3′-RACE 反应 | 第53页 |
| ·3′-RACE反应DNA片段的回收 | 第53-54页 |
| ·克隆载体的构建及重组质粒的转化 | 第54页 |
| ·阳性重组质粒的鉴定 | 第54-56页 |
| ·3′-端基因片段的序列测定与分析 | 第56页 |
| ·RIP cDNA 5′-端的克隆 | 第56-61页 |
| ·菌丝体总RNA 的提取和纯度检测 | 第56-57页 |
| ·5′-RACE反应下游特异性PCR引物的设计 | 第57页 |
| ·RIP cDNA 的5′-RACE 反应 | 第57-58页 |
| ·5′-RACE反应DNA片段的回收 | 第58页 |
| ·克隆载体的构建及重组质粒的转化 | 第58-59页 |
| ·阳性重组质粒的鉴定 | 第59-60页 |
| ·cDNA 5′-端基因片段的序列测定 | 第60-61页 |
| ·RIP基因的全长cDNA序列 | 第61-64页 |
| 第4章 讨论 | 第64-67页 |
| ·黑木耳RIP 的提取 | 第64页 |
| ·基因克隆过程中的蓝白筛选 | 第64页 |
| ·基因克隆的3′-RACE 法 | 第64-65页 |
| ·基因克隆的5′-RACE 法 | 第65页 |
| ·PCR 条件的优化 | 第65-66页 |
| ·关于后续工作 | 第66-67页 |
| 第5章 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第76-77页 |