构建铁皮石斛多维指纹图谱方法的研究
| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 1 前言 | 第15-22页 |
| ·中药指纹图谱的研究进展 | 第15-18页 |
| ·药用石斛种质鉴定研究 | 第18-20页 |
| ·本论文研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-29页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·铁皮石斛毛细管电泳指纹图谱的构建 | 第24-25页 |
| ·样品溶液的制备 | 第24页 |
| ·电泳条件的选择 | 第24-25页 |
| ·毛细管柱、检测器、波长、柱温 | 第24页 |
| ·运行缓冲液的选择 | 第24页 |
| ·提取溶剂的选择 | 第24-25页 |
| ·铁皮石斛SRAP分子指纹图谱的构建 | 第25-26页 |
| ·石斛基因组DNA的提取 | 第25页 |
| ·PCR体系、程序与检测 | 第25-26页 |
| ·试验设计 | 第26页 |
| ·铁皮石斛多糖指纹图谱的构建 | 第26-29页 |
| ·石斛多糖的提取和纯化 | 第26页 |
| ·单糖和寡糖的ANTS衍生化 | 第26页 |
| ·石斛多糖的酶解 | 第26-27页 |
| ·寡糖标尺的构建 | 第27页 |
| ·多糖的全水解 | 第27页 |
| ·ANTS衍生物的电泳分离 | 第27-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-55页 |
| ·构建铁皮石斛的毛细管指纹图谱方法的研究 | 第29-35页 |
| ·电泳条件的选择 | 第29-30页 |
| ·检测波长的选择 | 第29页 |
| ·运行缓冲液的选择 | 第29-30页 |
| ·提取溶剂的选择 | 第30页 |
| ·提取方法的选择 | 第30页 |
| ·铁皮石斛毛细管电泳指纹图谱的建立 | 第30-35页 |
| ·共有指纹峰的确定 | 第30-31页 |
| ·精密度实验 | 第31页 |
| ·重现性实验 | 第31-32页 |
| ·稳定性实验 | 第32页 |
| ·相似度分析 | 第32页 |
| ·主成份分析与系统聚类 | 第32-34页 |
| ·判别分析 | 第34-35页 |
| ·构建铁皮石斛的SRAP分子指纹图谱方法的研究 | 第35-41页 |
| ·铁皮石斛SRAP-PCR反应体系的优化 | 第36-38页 |
| ·引物浓度对SRAP扩增的影响 | 第36页 |
| ·dNTP浓度对SRAP扩增的影响 | 第36-37页 |
| ·Mg~(2+)浓度对SRAP扩增的影响 | 第37页 |
| ·TaqDNA聚合酶用量对SRAP扩增的影响 | 第37-38页 |
| ·7种铁皮石斛样品之间的SRAP多态性分析 | 第38-41页 |
| ·不同石斛样品之间的SRAP多态性分析 | 第41页 |
| ·构建铁皮石斛的多糖指纹图谱方法的研究 | 第41-55页 |
| ·糖的衍生化 | 第42-43页 |
| ·不同的电泳条件对分离效果的影响 | 第43-45页 |
| ·荧光辅助糖电泳构建铁皮石斛多糖指纹的研究 | 第45-49页 |
| ·铁皮石斛多糖酶切指纹图谱的构建 | 第46-49页 |
| ·不同种石斛多糖酶切指纹图谱的比较 | 第49-52页 |
| ·荧光辅助糖电泳对铁皮石斛多糖结构的一些研究 | 第52-53页 |
| ·建立荧光辅助糖电泳方法的技术探讨 | 第53-55页 |
| 4. 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
