| 摘要 | 第1-4页 |
| Summary | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| 1 国内外研究现状 | 第8-16页 |
| ·产甲酸草酸杆菌生物学特性 | 第9页 |
| ·产甲酸草酸杆菌与宿主的关系 | 第9-13页 |
| ·产甲酸草酸杆菌与肾石病形成之间的关系 | 第9-10页 |
| ·产甲酸草酸杆菌在胃肠道中的共生及影响共生的因素 | 第10-12页 |
| ·产甲酸草酸杆菌分解草酸的机理 | 第12页 |
| ·草酸的肠道吸收和转运 | 第12-13页 |
| ·产甲酸草酸杆菌降解草酸的酶类 | 第13-14页 |
| ·草酰辅酶A脱羧酶 | 第13-14页 |
| ·甲酰辅酶A转移酶 | 第14页 |
| ·产甲酸草酸杆菌草酸转运蛋白OxlT | 第14页 |
| ·产甲酸草酸杆菌检测技术 | 第14-15页 |
| ·利用产甲酸草酸杆菌进行肾石病预防和治疗 | 第15页 |
| ·展望 | 第15-16页 |
| 2 研究目的和意义 | 第16页 |
| 3 研究内容和方法 | 第16-17页 |
| 第二章 产甲酸草酸杆菌OXC基因的克隆和序列分析 | 第17-27页 |
| 1 前言 | 第17-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-21页 |
| ·材料 | 第18页 |
| ·菌种和质粒 | 第18页 |
| ·酶和试剂 | 第18页 |
| ·仪器与设备 | 第18页 |
| ·方法 | 第18-21页 |
| ·产甲酸草酸杆菌DNA的提取 | 第18-19页 |
| ·目的片段的扩增与回收 | 第19页 |
| ·目的基因的克隆 | 第19-20页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第20-21页 |
| 3 结果与分析 | 第21-25页 |
| ·产甲酸草酸杆菌的主要生物学特性 | 第21-22页 |
| ·PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳结果 | 第22页 |
| ·重组质粒pGEM-T-oxc的PCR扩增和酶切鉴定 | 第22-23页 |
| ·oxc基因序列的同源性和变异性 | 第23页 |
| ·OXC酶蛋白的结构预测 | 第23-25页 |
| ·OXC酶蛋白的抗原性及亲水性 | 第23-24页 |
| ·OXC酶蛋白的跨膜区域 | 第24页 |
| ·OXC酶蛋白的二级结构 | 第24-25页 |
| ·OXC酶蛋白保守区 | 第25页 |
| 4 讨论 | 第25-27页 |
| 第三章 产甲酸草酸杆菌OXC基因核心区的原核表达 | 第27-40页 |
| 1 前言 | 第27页 |
| 2 材料和方法 | 第27-33页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·菌种和质粒 | 第27页 |
| ·试剂、工具酶及试剂盒 | 第27-28页 |
| ·主要仪器与设备 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-33页 |
| ·引物设计与合成 | 第28页 |
| ·目的DNA片段的PCR扩增 | 第28页 |
| ·目的DNA片段与载体的酶切和回收 | 第28-29页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组表达质粒pET-oxc-1的诱导表达和条件优化 | 第30页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE检测 | 第30-32页 |
| ·重组蛋白的提纯及复性 | 第32-33页 |
| ·阴性对照抗原的制备 | 第33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-36页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第33-34页 |
| ·目的DNA片段的扩增 | 第33页 |
| ·重组表达质粒的构建及其鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组菌表达优化条件及表达产物的检测 | 第34-36页 |
| ·重组菌表达优化条件 | 第35页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组OXC-1蛋白提纯和复性效果 | 第36页 |
| ·包涵体提取物的鉴定 | 第36页 |
| ·包涵体纯化物的鉴定 | 第36页 |
| ·复性产物的鉴定 | 第36页 |
| 4 讨论 | 第36-40页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第37页 |
| ·pET28(a)+表达载体 | 第37页 |
| ·诱导表达 | 第37-38页 |
| ·包涵体的变性、复性 | 第38-40页 |
| 第四章 结论 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 缩写词英汉对照 | 第48-50页 |
| 作者简介 | 第50-51页 |
| 导师简介 | 第51-52页 |