中文摘要 | 第1-17页 |
英文摘要 | 第17-25页 |
符号说明 | 第25-26页 |
正文 | 第26-68页 |
第一节 PDCD4在人神经胶质瘤中的表达状态及其临床意义 | 第26-43页 |
一、前言 | 第26-29页 |
(一) PDCD4的发现和生物学特点 | 第26-27页 |
(二) PDCD4与肿瘤发生的关系 | 第27-28页 |
(三) 研究目的 | 第28-29页 |
二、材料 | 第29-32页 |
三、方法 | 第32-37页 |
(一) RT-PCR | 第32-34页 |
(二) Western blot | 第34-36页 |
(三) 免疫组化 | 第36-37页 |
(四) 病人生存状况的追踪调查 | 第37页 |
(五) 统计学分析方法 | 第37页 |
四、结果 | 第37-40页 |
(一) PDCD4在人胶质瘤细胞系中的表达 | 第37-38页 |
(二) PDCD4在人原发性胶质瘤中的表达 | 第38-39页 |
(三) PDCD4表达缺失与胶质瘤临床病理特征的关系 | 第39-40页 |
(四) PDCD4表达与脑胶质瘤患者预后的关系 | 第40页 |
五、讨论 | 第40-42页 |
六、小结 | 第42-43页 |
第二节 PDCD4 5'CpG岛高频甲基化与胶质瘤PDCD4mRNA缺失的关系 | 第43-58页 |
一、前言 | 第43-47页 |
(一) CpG岛与DNA甲基化 | 第43-44页 |
(二) DNA甲基化与抑癌基因的失活 | 第44页 |
(三) 研究DNA甲基化的常用方法 | 第44-46页 |
(四) 抑癌基因甲基化与脑胶质瘤 | 第46页 |
(五) 研究目的 | 第46-47页 |
二、材料 | 第47页 |
三、方法 | 第47-52页 |
(一) PDCD4 5'CpG岛的预测及甲基化特异性引物的设计 | 第47-49页 |
(二) 甲基化特异性PCR(MSP) | 第49-50页 |
(三) 胶质瘤细胞系中基因的去甲基化处理 | 第50页 |
(四) RT-PCR、Western blot检测PDCD4的表达 | 第50-51页 |
(五) 细胞免疫化学检测PDCD4的表达 | 第51页 |
(六) 统计学分析 | 第51-52页 |
四、结果 | 第52-55页 |
(一) PDCD4 5'CpG岛的位置以及甲基化检测引物的设计和优化 | 第52页 |
(二) 在胶质瘤细胞系中发现PDCD4 5'CpG岛存在甲基化 | 第52页 |
(三) 在原发性胶质瘤中发现PDCD4 5'CpG岛存在甲基化 | 第52-53页 |
(四) MSP产物测序进一步确定PDCD45'CpG岛发生甲基化 | 第53页 |
(五) PDCD4 5'CpG岛甲基化与胶质瘤中PDCD4表达缺失的相关研究 | 第53页 |
(六) 去甲基化药物处理胶质瘤细胞系后可恢复PDCD4的表达 | 第53-55页 |
五、讨论 | 第55-57页 |
六、小结 | 第57-58页 |
第三节 外源性PDCD4在神经胶质瘤细胞系的表达及其对细胞生长、凋亡和克隆形成的影响 | 第58-68页 |
一、前言 | 第58-61页 |
(一) PDCD4对于肿瘤细胞凋亡和细胞周期的研究进展 | 第58-59页 |
(二) PDCD4抑制肿瘤细胞生长的可能分子机制 | 第59-60页 |
(三) 研究目的 | 第60-61页 |
二、材料 | 第61页 |
三、方法 | 第61-63页 |
(一) 胶质瘤细胞系培养 | 第61页 |
(二) 外源性PDCD4转染胶质瘤细胞系 | 第61-62页 |
(三) RT-PCR、Western blot检测PDCD4表达 | 第62页 |
(四) 细胞周期的检测 | 第62页 |
(五) 细胞凋亡的检测 | 第62-63页 |
(六) 克隆形成试验 | 第63页 |
(七) 统计学分析方法 | 第63页 |
四、结果 | 第63-66页 |
(一) 外源性PDCD4基因在胶质瘤细胞的表达 | 第63-64页 |
(二) PDCD4表达对胶质瘤细胞形态的影响 | 第64页 |
(三) PDCD4表达对胶质瘤细胞生长速率的影响 | 第64页 |
(四) PDCD4表达对胶质瘤细胞克隆形成的影响 | 第64-65页 |
(五) PDCD4表达对胶质瘤细胞周期的影响 | 第65页 |
(六) PDCD4表达对胶质瘤细胞凋亡的影响 | 第65-66页 |
五、讨论 | 第66-67页 |
六、小结 | 第67-68页 |
附图表 | 第68-86页 |
参考文献 | 第86-95页 |
致谢 | 第95-96页 |
发表论文 | 第96-99页 |
附件1 英文文章1 | 第99-105页 |
附件2 英文文章2 | 第105-112页 |
附件3 英文文章3 | 第112-145页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第145页 |