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新的抑癌基因PDCD4在人神经胶质瘤中的缺失及其机制研究

中文摘要第1-17页
英文摘要第17-25页
符号说明第25-26页
正文第26-68页
 第一节 PDCD4在人神经胶质瘤中的表达状态及其临床意义第26-43页
  一、前言第26-29页
   (一) PDCD4的发现和生物学特点第26-27页
   (二) PDCD4与肿瘤发生的关系第27-28页
   (三) 研究目的第28-29页
  二、材料第29-32页
  三、方法第32-37页
   (一) RT-PCR第32-34页
   (二) Western blot第34-36页
   (三) 免疫组化第36-37页
   (四) 病人生存状况的追踪调查第37页
   (五) 统计学分析方法第37页
  四、结果第37-40页
   (一) PDCD4在人胶质瘤细胞系中的表达第37-38页
   (二) PDCD4在人原发性胶质瘤中的表达第38-39页
   (三) PDCD4表达缺失与胶质瘤临床病理特征的关系第39-40页
   (四) PDCD4表达与脑胶质瘤患者预后的关系第40页
  五、讨论第40-42页
  六、小结第42-43页
 第二节 PDCD4 5'CpG岛高频甲基化与胶质瘤PDCD4mRNA缺失的关系第43-58页
  一、前言第43-47页
   (一) CpG岛与DNA甲基化第43-44页
   (二) DNA甲基化与抑癌基因的失活第44页
   (三) 研究DNA甲基化的常用方法第44-46页
   (四) 抑癌基因甲基化与脑胶质瘤第46页
   (五) 研究目的第46-47页
  二、材料第47页
  三、方法第47-52页
   (一) PDCD4 5'CpG岛的预测及甲基化特异性引物的设计第47-49页
   (二) 甲基化特异性PCR(MSP)第49-50页
   (三) 胶质瘤细胞系中基因的去甲基化处理第50页
   (四) RT-PCR、Western blot检测PDCD4的表达第50-51页
   (五) 细胞免疫化学检测PDCD4的表达第51页
   (六) 统计学分析第51-52页
  四、结果第52-55页
   (一) PDCD4 5'CpG岛的位置以及甲基化检测引物的设计和优化第52页
   (二) 在胶质瘤细胞系中发现PDCD4 5'CpG岛存在甲基化第52页
   (三) 在原发性胶质瘤中发现PDCD4 5'CpG岛存在甲基化第52-53页
   (四) MSP产物测序进一步确定PDCD45'CpG岛发生甲基化第53页
   (五) PDCD4 5'CpG岛甲基化与胶质瘤中PDCD4表达缺失的相关研究第53页
   (六) 去甲基化药物处理胶质瘤细胞系后可恢复PDCD4的表达第53-55页
  五、讨论第55-57页
  六、小结第57-58页
 第三节 外源性PDCD4在神经胶质瘤细胞系的表达及其对细胞生长、凋亡和克隆形成的影响第58-68页
  一、前言第58-61页
   (一) PDCD4对于肿瘤细胞凋亡和细胞周期的研究进展第58-59页
   (二) PDCD4抑制肿瘤细胞生长的可能分子机制第59-60页
   (三) 研究目的第60-61页
  二、材料第61页
  三、方法第61-63页
   (一) 胶质瘤细胞系培养第61页
   (二) 外源性PDCD4转染胶质瘤细胞系第61-62页
   (三) RT-PCR、Western blot检测PDCD4表达第62页
   (四) 细胞周期的检测第62页
   (五) 细胞凋亡的检测第62-63页
   (六) 克隆形成试验第63页
   (七) 统计学分析方法第63页
  四、结果第63-66页
   (一) 外源性PDCD4基因在胶质瘤细胞的表达第63-64页
   (二) PDCD4表达对胶质瘤细胞形态的影响第64页
   (三) PDCD4表达对胶质瘤细胞生长速率的影响第64页
   (四) PDCD4表达对胶质瘤细胞克隆形成的影响第64-65页
   (五) PDCD4表达对胶质瘤细胞周期的影响第65页
   (六) PDCD4表达对胶质瘤细胞凋亡的影响第65-66页
  五、讨论第66-67页
  六、小结第67-68页
附图表第68-86页
参考文献第86-95页
致谢第95-96页
发表论文第96-99页
附件1 英文文章1第99-105页
附件2 英文文章2第105-112页
附件3 英文文章3第112-145页
学位论文评阅及答辩情况表第145页

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