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香蕉果实成熟相关基因的克隆与表达分析

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
一、前言第10-23页
 1. 香蕉采后成熟研究进展第10-21页
   ·香蕉的经济价值第10-12页
   ·香蕉采后果实成熟生理研究进展第12-15页
     ·香蕉分子生物学研究现状第15-20页
   ·结束语第20-21页
 2. 目的和意义第21-23页
二、材料第23-24页
   ·实验试剂第23页
   ·实验仪器第23-24页
   ·实验材料第24页
三、实验方法第24-41页
   ·采后香蕉果实处理第24页
   ·香蕉采后果实乙烯及呼吸强度的测定第24-25页
   ·RACE 方法克隆香蕉新基因第25-35页
     ·引物设计与合成第25-27页
     ·香蕉果实总RNA 的提取第27-28页
     ·cDNA 第一链的合成第28-29页
     ·RACE 扩增基因第29-30页
     ·RACE 产物回收第30页
     ·扩增产物的连接与转化第30-31页
     ·重组子筛选与鉴定第31-32页
     ·基因完整编码序列的克隆第32-33页
     ·利用 SMART PCR cDNA 合成技术合成ds-cDNA第33-34页
     ·基因结构分析第34-35页
   ·基因表达分析第35-38页
     ·目的基因RT-PCR 引物合成第35页
     ·cDNA 第一链合成第35-36页
     ·RT-PCR 反应体系的建立第36-37页
     ·RT-PCR 结果分析第37-38页
   ·香蕉水通道蛋白(MAAQP1)植物表达载体构建第38-41页
     ·质粒和表达载体的双酶切第39页
     ·酶切产物的电泳胶回收第39页
     ·片段与载体的连接第39页
     ·E.coli DH5α感受态细胞制备及连接产物转化第39页
     ·质粒DNA 的微量提取第39页
     ·重组质粒的酶切鉴定第39页
     ·亚细胞定位第39-41页
四、结果与分析第41-78页
   ·香蕉水通道基因MAAQP1 的克隆与表达分析第41-51页
     ·香蕉果实总RNA 的提取第41页
     ·香蕉水通道蛋白基因3’, 5’RACE 基因扩增第41-42页
     ·香蕉水通道蛋白基因全长的获得第42-43页
     ·香蕉水通道蛋白基因GFP 融合蛋白表达载体的构建第43页
     ·水通道AQP 基因信息学分析第43-49页
     ·香蕉AQP1 的亚细胞定位第49-51页
   ·香蕉泛素结合酶基因的克隆第51-56页
     ·香蕉泛素结合酶基因3’RACE, 5’RACE 基因扩增第51-52页
     ·信息学分析第52-56页
   ·香蕉抗坏血酸过氧化物酶基因克隆第56-61页
     ·香蕉MaAPX 基因3’RACE, 5’RACE 基因扩增第56-57页
     ·MaAPX 生物信息学分析第57-61页
   ·香蕉乙二醛酶基因GL018 的克隆第61-66页
     ·香蕉 GLO18 的 3’ RACE, 5’RACE 基因扩增第61-62页
     ·信息学分析第62-66页
   ·香蕉乙二醛酶基因GL014 的克隆第66-70页
     ·香蕉 GLO14 的 3’ RACE, 5’RACE 基因扩增第66-67页
     ·信息学分析第67-70页
   ·基因组织特异性表达分析第70-78页
     ·香蕉采后果实乙烯变化第70-71页
       ·R NA 的提取第71-72页
     ·香蕉MaAQP1 在香蕉不同器官和果实不同成熟阶段的表达第72-74页
     ·香蕉MaUCE 在香蕉不同器官和果实不同成熟阶段的表达第74-75页
     ·香蕉MaAPX 在香蕉不同器官和果实不同成熟阶段的表达第75-76页
     ·香蕉MaGL018 在香蕉不同器官和果实不同成熟阶段的表达第76-77页
     ·香蕉MaGL014 在香蕉不同器官和果实不同成熟阶段的表达第77-78页
五、讨论第78-88页
   ·香蕉MAAQPL 的克隆与表达分析第78-80页
   ·香蕉泛素连接酶基因的克隆与表达分析第80-82页
   ·香蕉抗坏血酸过氧化物酶基因的克隆及表达分析第82-84页
   ·香蕉乙二醛酶家族基因的克隆与表达分析第84-88页
六、结论第88-89页
缩写词(ABBREVIATION)第89-90页
参考文献第90-96页
致谢第96页

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