摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
一、前言 | 第10-23页 |
1. 香蕉采后成熟研究进展 | 第10-21页 |
·香蕉的经济价值 | 第10-12页 |
·香蕉采后果实成熟生理研究进展 | 第12-15页 |
·香蕉分子生物学研究现状 | 第15-20页 |
·结束语 | 第20-21页 |
2. 目的和意义 | 第21-23页 |
二、材料 | 第23-24页 |
·实验试剂 | 第23页 |
·实验仪器 | 第23-24页 |
·实验材料 | 第24页 |
三、实验方法 | 第24-41页 |
·采后香蕉果实处理 | 第24页 |
·香蕉采后果实乙烯及呼吸强度的测定 | 第24-25页 |
·RACE 方法克隆香蕉新基因 | 第25-35页 |
·引物设计与合成 | 第25-27页 |
·香蕉果实总RNA 的提取 | 第27-28页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第28-29页 |
·RACE 扩增基因 | 第29-30页 |
·RACE 产物回收 | 第30页 |
·扩增产物的连接与转化 | 第30-31页 |
·重组子筛选与鉴定 | 第31-32页 |
·基因完整编码序列的克隆 | 第32-33页 |
·利用 SMART PCR cDNA 合成技术合成ds-cDNA | 第33-34页 |
·基因结构分析 | 第34-35页 |
·基因表达分析 | 第35-38页 |
·目的基因RT-PCR 引物合成 | 第35页 |
·cDNA 第一链合成 | 第35-36页 |
·RT-PCR 反应体系的建立 | 第36-37页 |
·RT-PCR 结果分析 | 第37-38页 |
·香蕉水通道蛋白(MAAQP1)植物表达载体构建 | 第38-41页 |
·质粒和表达载体的双酶切 | 第39页 |
·酶切产物的电泳胶回收 | 第39页 |
·片段与载体的连接 | 第39页 |
·E.coli DH5α感受态细胞制备及连接产物转化 | 第39页 |
·质粒DNA 的微量提取 | 第39页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第39页 |
·亚细胞定位 | 第39-41页 |
四、结果与分析 | 第41-78页 |
·香蕉水通道基因MAAQP1 的克隆与表达分析 | 第41-51页 |
·香蕉果实总RNA 的提取 | 第41页 |
·香蕉水通道蛋白基因3’, 5’RACE 基因扩增 | 第41-42页 |
·香蕉水通道蛋白基因全长的获得 | 第42-43页 |
·香蕉水通道蛋白基因GFP 融合蛋白表达载体的构建 | 第43页 |
·水通道AQP 基因信息学分析 | 第43-49页 |
·香蕉AQP1 的亚细胞定位 | 第49-51页 |
·香蕉泛素结合酶基因的克隆 | 第51-56页 |
·香蕉泛素结合酶基因3’RACE, 5’RACE 基因扩增 | 第51-52页 |
·信息学分析 | 第52-56页 |
·香蕉抗坏血酸过氧化物酶基因克隆 | 第56-61页 |
·香蕉MaAPX 基因3’RACE, 5’RACE 基因扩增 | 第56-57页 |
·MaAPX 生物信息学分析 | 第57-61页 |
·香蕉乙二醛酶基因GL018 的克隆 | 第61-66页 |
·香蕉 GLO18 的 3’ RACE, 5’RACE 基因扩增 | 第61-62页 |
·信息学分析 | 第62-66页 |
·香蕉乙二醛酶基因GL014 的克隆 | 第66-70页 |
·香蕉 GLO14 的 3’ RACE, 5’RACE 基因扩增 | 第66-67页 |
·信息学分析 | 第67-70页 |
·基因组织特异性表达分析 | 第70-78页 |
·香蕉采后果实乙烯变化 | 第70-71页 |
·R NA 的提取 | 第71-72页 |
·香蕉MaAQP1 在香蕉不同器官和果实不同成熟阶段的表达 | 第72-74页 |
·香蕉MaUCE 在香蕉不同器官和果实不同成熟阶段的表达 | 第74-75页 |
·香蕉MaAPX 在香蕉不同器官和果实不同成熟阶段的表达 | 第75-76页 |
·香蕉MaGL018 在香蕉不同器官和果实不同成熟阶段的表达 | 第76-77页 |
·香蕉MaGL014 在香蕉不同器官和果实不同成熟阶段的表达 | 第77-78页 |
五、讨论 | 第78-88页 |
·香蕉MAAQPL 的克隆与表达分析 | 第78-80页 |
·香蕉泛素连接酶基因的克隆与表达分析 | 第80-82页 |
·香蕉抗坏血酸过氧化物酶基因的克隆及表达分析 | 第82-84页 |
·香蕉乙二醛酶家族基因的克隆与表达分析 | 第84-88页 |
六、结论 | 第88-89页 |
缩写词(ABBREVIATION) | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-96页 |
致谢 | 第96页 |