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烟草内生细菌及其对烟草青枯病的防治作用研究

中文摘要第1-8页
Abstract第8-20页
第一章 前言第20-36页
 1 内生细菌研究进展第20-34页
   ·植物内生细菌概念、普遍存在性和生物多样性第20-26页
     ·植物内生细菌概念第20页
     ·植物内生细菌的普遍存在性和生物多样性第20-26页
   ·宿主-内生细菌-内生细菌的关系第26-27页
     ·宿主与内生细菌的关系第26页
     ·内生细菌之间的相互关系第26-27页
   ·内生细菌的侵染方式和传播途径第27-28页
   ·影响植物内生细菌定殖的因素第28-29页
     ·环境因子对植物内生菌的影响第28页
     ·宿主植物品种对植物内生菌的影响第28页
     ·宿主植物生育期对植物内生菌的影响第28-29页
     ·同一品种不同生长部位对植物内生菌的影响第29页
     ·同一品种不同的种植地对植物内生菌的影响第29页
   ·植物内生细菌定殖研究第29-30页
   ·内生细菌的生防作用及其机制第30-32页
     ·内生细菌对植物病害的生物防治作用第30-31页
     ·内生细菌的防病机制第31-32页
   ·植物内生菌在植物病害生物防治中存在的问题第32-33页
     ·内生细菌与宿主植物的互作第32页
     ·内生细菌的有害作用第32-33页
     ·植物内生细菌作为生防因子的开发与应用第33页
   ·展望第33-34页
     ·生物农药第33页
     ·绿色菌肥第33-34页
     ·构建植物内生多功能工程菌第34页
 2 本项研究的目的与意义第34-36页
第二章 烟草青枯病菌内生拮抗细菌的分离与鉴定第36-48页
 1 材料与方法第36-42页
   ·材料第36-37页
     ·感病品种第36页
     ·供试培养基第36-37页
     ·供试的酶、试剂及药品第37页
     ·主要仪器第37页
     ·16S rDNA的引物第37页
   ·方法第37-42页
     ·青枯病菌菌株的分离、纯化与致病力的测定第37-38页
     ·内生菌株分离、纯化及拮抗作用测定第38页
     ·内生细菌001、009、011的种类鉴定第38-42页
 2 结果与分析第42-45页
   ·青枯菌的分离与致病性鉴定第42页
   ·内生菌菌株分离与室内拮抗作用测定第42-43页
   ·001,009,011 3株内生菌株形态特征与生理生化性状第43-44页
   ·菌株001、009、011的16S rDNA序列扩增及阳性克隆的鉴定第44页
   ·16S rDNA序列测定及分析第44页
   ·系统发育分析和系统发育树的构建第44-45页
 3 小结与讨论第45-48页
   ·内生菌菌株分离与室内拮抗作用测定第45-46页
   ·001,009,011 3株内生菌种类鉴定第46-47页
   ·烟草青枯菌的分离与致病性鉴定第47-48页
第三章 001、009、011菌株生物学特性及抑菌谱测定第48-58页
 1 材料和方法第48-50页
   ·材料第48页
     ·供试菌株第48页
     ·供试的培养基第48页
     ·仪器第48页
   ·方法第48-50页
     ·内生菌株生物学特性测定第48-50页
     ·抑菌谱测定第50页
 2 结果与分析第50-57页
   ·内生菌株生物学特性第50-53页
     ·生长曲线第50-51页
     ·pH值对菌株生长的影响第51-52页
     ·温度对菌株生长的影响第52页
     ·碳、氮源利用第52-53页
     ·抗Rif标记001、009、011菌株内生定殖检测第53页
   ·菌株抑菌谱第53-57页
 3 小结与讨论第57-58页
   ·内生菌株生物学特性第57页
   ·菌株抑菌谱第57-58页
第四章 内生菌001菌株内生定殖研究第58-65页
 1 材料与方法第58-60页
   ·材料第58页
     ·供试菌体第58页
     ·供试烟草品种第58页
   ·方法第58-60页
     ·001菌株的诱变第58页
     ·接种菌的回收第58页
     ·不同菌液浓度的001菌株在烟草体内的定殖测定第58-59页
     ·001菌株入侵烟草的途径测定第59页
     ·在不同烟草品种上的定殖第59页
     ·001菌株浸种法接种在烟草K326植株中的生长动态第59页
     ·001菌株定殖部位的检测第59-60页
 2 结果与分析第60-62页
   ·001菌株不同菌液浓度接种在烟草K326体内的定殖第60页
   ·001菌株入侵烟草K326植株的途径第60-61页
   ·001菌株在不同烟草品种植株中的定殖第61页
   ·001菌株用浸种法接种在烟草K326植株中的生长动态第61-62页
   ·001菌株在烟草K326内的定殖第62页
 3 小结与讨论第62-65页
   ·不同菌液浓度001菌株接种在烟草K326体内的定殖第62页
   ·001菌株入侵烟草K326植株的途径第62-63页
   ·001菌株在不同烟草品种植株中的定殖第63页
   ·001菌株用浸种法接种在烟草K326植株中的生长动态第63页
   ·001菌株在植株内的定殖部位第63-65页
第五章 内生菌001菌株对烟草苗促生作用第65-73页
 1 材料与方法第65-67页
   ·材料第65页
     ·供试菌体第65页
     ·供试烟草品种第65页
     ·试剂与仪器第65页
   ·方法第65-67页
     ·001菌株对不同品种烟草苗的促生作用第65页
     ·001菌株不同的接种方法对烟草苗的促生作用第65-66页
     ·001菌液浸种烟草种子K326烟草苗内源激素含量的变化第66-67页
 2 结果与分析第67-71页
   ·001菌株对不同烟草品种的促生作用第67-70页
   ·不同的接种方法对烟草苗的促生作用第70页
   ·001菌株浸种K326后烟草内源激素含量的变化第70-71页
 3 小结与讨论第71-73页
   ·001菌株对烟草苗促生效果第71页
   ·001菌株浸种K326后烟草内源激素含量的变化第71-73页
第六章 内生菌001菌株抗菌物质纯化与理化性质第73-83页
 1 材料与方法第73-76页
   ·材料第73-74页
     ·拮抗菌第73页
     ·拮抗活性指示菌第73页
     ·培养基第73页
     ·主要仪器、试剂第73-74页
   ·方法第74-76页
     ·001菌株培养第74页
     ·拮抗活性检测第74页
     ·拮抗物质的制备与纯化第74-75页
     ·SDS-PAGE电泳第75-76页
     ·MALDI-TOF-MS质谱分析第76页
     ·氨基酸组成分析第76页
     ·粗提液的理化性质第76页
 2 结果与分析第76-81页
   ·拮抗物质的分离纯化第76-78页
     ·硫酸铵最佳饱和度确立第76-77页
     ·DEAE-Sepharose FF色谱第77页
     ·FPLC Phenyl FF疏水色谱第77页
     ·HPLC C18反相色谱第77-78页
   ·纯化抗菌蛋白H16对烟草青枯病菌拮抗活性的检测第78页
   ·SDS-PAGE电泳与分子量测定第78-79页
   ·MALDI-TOF-MS结果第79页
   ·氨基酸组成分析第79-80页
   ·粗提液理化性质第80-81页
     ·热稳定性第80页
     ·对蛋白酶的稳定性第80-81页
 3 小结与讨论第81-83页
   ·B. subtilis 001菌株发酵液抑菌物质的分离纯化第81-82页
   ·粗提液理化性质第82-83页
第七章 内生菌001菌株发酵条件的研究第83-99页
 1 材料与方法第83-86页
   ·材料第83页
     ·发酵菌种第83页
     ·培养基第83页
     ·仪器第83页
   ·方法第83页
     ·菌种的活化第83页
     ·液体种子的制备第83页
     ·菌体密度的测定和发酵液抑菌活性测定第83页
   ·摇瓶发酵第83-86页
     ·发酵培养基优化及正交优化实验第83-85页
     ·发酵条件优化第85-86页
   ·5L发酵罐试验第86页
     ·5L发酵罐转速的优化第86页
     ·5L发酵罐通气量的优化第86页
     ·5L发酵罐发酵条件正交优化实验第86页
     ·5L发酵罐最佳发酵时间第86页
 2 结果与分析第86-97页
   ·摇瓶发酵第86-94页
     ·发酵培养基起始浓度的优化及正交试验第86-90页
     ·发酵条件的优化第90-94页
   ·5L发酵罐试验第94-97页
     ·5L发酵罐转速的优化第94-95页
     ·5L发酵罐通气量的优化第95页
     ·001菌株5L发酵罐发酵条件正交优化第95-96页
     ·5L发酵罐的最佳发酵时间第96-97页
     ·5L罐优化发酵条件下连续6批次发酵结果第97页
 3 小结与讨论第97-99页
   ·001菌株培养基成分正交优化试验和摇瓶发酵条件的优化第97页
   ·001菌株5L发酵罐发酵条件正交优化和最佳发酵时间第97-99页
第八章 内生菌001菌株田间防效试验第99-104页
 1 材料和方法第99-101页
   ·材料第99-100页
     ·菌种第99页
     ·培养基第99页
     ·烟草品种第99页
     ·仪器第99页
     ·试验地点第99-100页
   ·方法第100-101页
     ·001菌株菌悬液的制备第100页
     ·处理方法第100页
     ·小区试验第100页
     ·2006年大面积田间防治试验第100页
     ·取样和调查第100-101页
 2 结果与分析第101-102页
 3 小结与讨论第102-104页
第九章 结论和创新点第104-108页
 1 主要研究结果第104-106页
 2 主要创新点第106-107页
 3 今后的研究方向与目标第107-108页
参考文献第108-118页
附件第118-124页
缩写词第124-125页
致谢第125-126页
个人简历第126-127页
在读期间科学技术成果第127页

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