中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-11页 |
文献综述 | 第11-23页 |
第一章 支气管败血波氏杆菌研究进展 | 第11-23页 |
·形态及培养特性 | 第11-12页 |
·流行病学 | 第12页 |
·临床症状及病理变化 | 第12-13页 |
·抗原 | 第13页 |
·毒素 | 第13-14页 |
·腺苷环化酶溶血素 | 第13-14页 |
·气管细胞毒素 | 第14页 |
·皮肤坏死毒素或不耐热毒素 | 第14页 |
·其他生物学特性 | 第14-15页 |
·丝状血凝素 | 第14-15页 |
·百日咳杆菌黏附素 | 第15页 |
·菌毛 | 第15页 |
·Ⅲ型分泌系统 | 第15页 |
·诊断和治疗 | 第15-16页 |
·免疫预防 | 第16页 |
·其他防治措施 | 第16页 |
·国内外研究进展 | 第16-23页 |
实验研究 | 第23-55页 |
第二章 兔支气管败血波氏杆菌ELISA 检测方法的建立 | 第23-35页 |
·细菌的分离鉴定 | 第23-24页 |
·材料与培养基 | 第23页 |
·方法 | 第23-24页 |
·结果 | 第24页 |
·外膜抗原、阴性血清及阳性血清的制备 | 第24页 |
·外膜抗原的制备 | 第24页 |
·阴性血清的制备 | 第24页 |
·阳性血清的制备 | 第24页 |
·酶联免疫吸附试验 | 第24-32页 |
·材料 | 第24页 |
·试剂 | 第24-25页 |
·仪器 | 第25页 |
·ELISA 检测方法 | 第25-27页 |
·ELISA 结果的判定 | 第27页 |
·ELISA 检测方法特异性试验 | 第27页 |
·待检血清检测的操作方法 | 第27-28页 |
·ELISA 试验结果 | 第28-32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
·ELISA 测定的干扰因素 | 第32页 |
·缩小ELISA 检测误差 | 第32页 |
·ELISA 结果判定 | 第32-33页 |
·质量控制指标 | 第33-34页 |
·小结 | 第34-35页 |
第三章 支气管败血波氏杆菌PCR 检测方法的建立 | 第35-40页 |
·材料与方法 | 第35-36页 |
·材料 | 第35页 |
·方法 | 第35-36页 |
·结果 | 第36-38页 |
·PCR 扩增 | 第36-37页 |
·PCR 特异性检测 | 第37页 |
·PCR 敏感性检测 | 第37页 |
·临床样品的PCR 检测 | 第37页 |
·细菌学检查与PCR 检测的比较 | 第37-38页 |
·微量凝集法与PCR 检测的比较 | 第38页 |
·讨论 | 第38-39页 |
·小结 | 第39-40页 |
第四章 支气管败血波氏杆菌(BB)FIMN 基因的克隆和序列分析 | 第40-47页 |
·材料 | 第40-41页 |
·菌种与质粒 | 第40页 |
·酶与试剂 | 第40页 |
·主要仪器与设备 | 第40页 |
·其他试剂 | 第40-41页 |
·方法 | 第41-44页 |
·目的片段的扩增与纯化回收 | 第41-42页 |
·目的基因的克隆 | 第42页 |
·重组质粒的提取与鉴定 | 第42-44页 |
·结果 | 第44-45页 |
·PCR 产物的电泳结果 | 第44页 |
·目的基因的克隆与鉴定 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-46页 |
·PCR 成功的关键 | 第45页 |
·fim N 基因的保守性 | 第45-46页 |
·小结 | 第46-47页 |
第五章 FIMN 基因原核表达载体的构建和表达 | 第47-55页 |
·材料 | 第47页 |
·质粒与菌种 | 第47页 |
·工具酶及试剂 | 第47页 |
·主要仪器与设备 | 第47页 |
·方法 | 第47-51页 |
·重组表达载体的构建与鉴定 | 第47-48页 |
·连接产物转化及质粒提取鉴定 | 第48页 |
·重组质粒在大肠杆菌中的表达 | 第48页 |
·表达蛋白的检测 | 第48-51页 |
·结果 | 第51-52页 |
·重组质粒酶切结果 | 第51页 |
·表达蛋白的SDS-PAGE 检测 | 第51-52页 |
·表达蛋白的Western blot 检测 | 第52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
·大肠杆菌表达系统的特点 | 第52-53页 |
·影响大肠杆菌表达系统表达的因素 | 第53页 |
·试验中遇到的问题 | 第53-54页 |
·小结 | 第54-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简介 | 第62页 |