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兔波氏杆菌病诊断方法的研究及fimN基因的原核表达

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-11页
文献综述第11-23页
 第一章 支气管败血波氏杆菌研究进展第11-23页
   ·形态及培养特性第11-12页
   ·流行病学第12页
   ·临床症状及病理变化第12-13页
   ·抗原第13页
   ·毒素第13-14页
     ·腺苷环化酶溶血素第13-14页
     ·气管细胞毒素第14页
     ·皮肤坏死毒素或不耐热毒素第14页
   ·其他生物学特性第14-15页
     ·丝状血凝素第14-15页
     ·百日咳杆菌黏附素第15页
     ·菌毛第15页
     ·Ⅲ型分泌系统第15页
   ·诊断和治疗第15-16页
   ·免疫预防第16页
   ·其他防治措施第16页
   ·国内外研究进展第16-23页
实验研究第23-55页
 第二章 兔支气管败血波氏杆菌ELISA 检测方法的建立第23-35页
   ·细菌的分离鉴定第23-24页
     ·材料与培养基第23页
     ·方法第23-24页
     ·结果第24页
   ·外膜抗原、阴性血清及阳性血清的制备第24页
     ·外膜抗原的制备第24页
     ·阴性血清的制备第24页
     ·阳性血清的制备第24页
   ·酶联免疫吸附试验第24-32页
     ·材料第24页
     ·试剂第24-25页
     ·仪器第25页
     ·ELISA 检测方法第25-27页
     ·ELISA 结果的判定第27页
     ·ELISA 检测方法特异性试验第27页
     ·待检血清检测的操作方法第27-28页
     ·ELISA 试验结果第28-32页
   ·讨论第32-34页
     ·ELISA 测定的干扰因素第32页
     ·缩小ELISA 检测误差第32页
     ·ELISA 结果判定第32-33页
     ·质量控制指标第33-34页
   ·小结第34-35页
 第三章 支气管败血波氏杆菌PCR 检测方法的建立第35-40页
   ·材料与方法第35-36页
     ·材料第35页
     ·方法第35-36页
   ·结果第36-38页
     ·PCR 扩增第36-37页
     ·PCR 特异性检测第37页
     ·PCR 敏感性检测第37页
     ·临床样品的PCR 检测第37页
     ·细菌学检查与PCR 检测的比较第37-38页
     ·微量凝集法与PCR 检测的比较第38页
   ·讨论第38-39页
   ·小结第39-40页
 第四章 支气管败血波氏杆菌(BB)FIMN 基因的克隆和序列分析第40-47页
   ·材料第40-41页
     ·菌种与质粒第40页
     ·酶与试剂第40页
     ·主要仪器与设备第40页
     ·其他试剂第40-41页
   ·方法第41-44页
     ·目的片段的扩增与纯化回收第41-42页
     ·目的基因的克隆第42页
     ·重组质粒的提取与鉴定第42-44页
   ·结果第44-45页
     ·PCR 产物的电泳结果第44页
     ·目的基因的克隆与鉴定第44-45页
   ·讨论第45-46页
     ·PCR 成功的关键第45页
     ·fim N 基因的保守性第45-46页
   ·小结第46-47页
 第五章 FIMN 基因原核表达载体的构建和表达第47-55页
   ·材料第47页
     ·质粒与菌种第47页
     ·工具酶及试剂第47页
     ·主要仪器与设备第47页
   ·方法第47-51页
     ·重组表达载体的构建与鉴定第47-48页
     ·连接产物转化及质粒提取鉴定第48页
     ·重组质粒在大肠杆菌中的表达第48页
     ·表达蛋白的检测第48-51页
   ·结果第51-52页
     ·重组质粒酶切结果第51页
     ·表达蛋白的SDS-PAGE 检测第51-52页
     ·表达蛋白的Western blot 检测第52页
   ·讨论第52-54页
     ·大肠杆菌表达系统的特点第52-53页
     ·影响大肠杆菌表达系统表达的因素第53页
     ·试验中遇到的问题第53-54页
   ·小结第54-55页
结论第55-56页
参考文献第56-61页
致谢第61-62页
作者简介第62页

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