中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-12页 |
前言 | 第12-16页 |
1 研究背景 | 第12-14页 |
2 研究目的 | 第14页 |
3 研究内容 | 第14-15页 |
主要技术路线 | 第15-16页 |
第一部分 乌头类中药对动物呼吸系统毒性的研究 | 第16-26页 |
1 SD大鼠3月经口给药毒性试验 | 第16-21页 |
·试验目的 | 第16页 |
·材料 | 第16页 |
·方法 | 第16-17页 |
·剂量设计与指标观察 | 第17-18页 |
·结果 | 第18-21页 |
2 Beagle犬呼吸系统安全药理试验 | 第21-24页 |
·试验目的 | 第21页 |
·材料 | 第21页 |
·方法 | 第21-22页 |
·剂量设计与指标观察 | 第22-23页 |
·结果 | 第23-24页 |
3 讨论 | 第24-25页 |
4 小结 | 第25-26页 |
第二部分 乌头碱对大鼠胚肺成纤维细胞的毒性研究 | 第26-45页 |
1 目的 | 第26页 |
2 材料 | 第26-27页 |
·实验动物 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26-27页 |
·主要试剂 | 第27页 |
3 试剂配制 | 第27-30页 |
·培养基的配制 | 第27-28页 |
·0.05%I型胶原酶溶液配制 | 第28页 |
·0.25%胰蛋白酶溶液配制 | 第28页 |
·PBS溶液配制 | 第28页 |
·100×双抗溶液的配制 | 第28-29页 |
·红细胞裂解液的配制 | 第29页 |
·乌头碱纯品溶液的配制 | 第29页 |
·MDA试剂的配制 | 第29-30页 |
4 细胞培养 | 第30-35页 |
·动物交配 | 第30页 |
·胎肺成纤维细胞的原代培养 | 第30-35页 |
5 指标检测与统计分析 | 第35-39页 |
·细胞鉴定(免疫细胞化学染色—SP法) | 第35-37页 |
·细胞氧化损伤的检测(MDA检测) | 第37-38页 |
·用流式细胞术检测细胞凋亡 | 第38页 |
·统计分析与结果判定 | 第38-39页 |
6 结果 | 第39-41页 |
·形态学鉴定 | 第39页 |
·免疫细胞化学染色(SP染色)鉴定 | 第39页 |
·MDA检测结果 | 第39-40页 |
·流式细胞检测细胞凋亡结果 | 第40-41页 |
7 讨论 | 第41-44页 |
·成纤维细胞鉴定 | 第41-42页 |
·MDA在细胞氧化损伤中的意义 | 第42-43页 |
·细胞凋亡率在细胞氧化损伤的意义 | 第43-44页 |
8 小结 | 第44-45页 |
第三部分 彗星实验检测乌头碱对中国仓鼠肺成纤维细胞的毒作用研究 | 第45-51页 |
1 目的 | 第45页 |
2 材料 | 第45-46页 |
·受试细胞 | 第45页 |
·受试药物 | 第45页 |
·主要仪器 | 第45页 |
·主要试剂 | 第45-46页 |
3 方法 | 第46-47页 |
·试剂和受试药物的配置 | 第46页 |
·细胞培养 | 第46页 |
·SCGE试验 | 第46-47页 |
4 观察指标 | 第47-48页 |
·拖尾细胞率 | 第47-48页 |
·拖尾细胞尾长 | 第48页 |
5 统计分析与结果判定 | 第48页 |
6 结果 | 第48-49页 |
7 讨论 | 第49-50页 |
8 小结 | 第50-51页 |
全文小结 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
文献综述 | 第56-73页 |
试验图片 | 第73-80页 |
附录 | 第80-81页 |
致谢 | 第81页 |