摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-12页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 三种新型细胞因子的研究进展 | 第13-31页 |
1 细胞因子的特点和分类 | 第14-15页 |
2 抗细胞凋亡因子DAD1 | 第15-16页 |
3 同种移植炎症因子AIF-1 | 第16-21页 |
·AIF-1结构特点 | 第17-19页 |
·AIF-1和它的同系物:Ibal、MRF-1和daintain | 第19-20页 |
·AIF-1的主要功能 | 第20-21页 |
4 G蛋白信号转导调节因子 | 第21-30页 |
·RGS蛋白的结构和分类 | 第21-24页 |
·RGS蛋白的主要功能 | 第24-28页 |
·RGS的调节 | 第28-30页 |
5 结语 | 第30-31页 |
第二章 青石斑鱼受脂多糖刺激后脾脏抑制消减杂交cDNA文库的构建 | 第31-59页 |
1 材料与方法 | 第32-47页 |
·材料 | 第32-34页 |
·方法 | 第34-47页 |
2 结果 | 第47-57页 |
·总RNA的制备 | 第47-48页 |
·双链cDNA的合成 | 第48-50页 |
·抑制性消减杂交 | 第50-52页 |
·消减效率分析 | 第52页 |
·消减文库的构建 | 第52页 |
·插入片段的PCR扩增 | 第52-53页 |
·测序结果分析 | 第53-56页 |
·RT-PCR验证消减基因的表达 | 第56-57页 |
3 讨论 | 第57-59页 |
第三章 青石斑鱼抗细胞凋亡因子DAD1的克隆及表达分析 | 第59-77页 |
1 材料与方法 | 第59-70页 |
·材料 | 第59-61页 |
·方法 | 第61-70页 |
2 结果 | 第70-75页 |
·抗细胞凋亡因子DAD1的克隆 | 第70-71页 |
·抗细胞凋亡因子DAD1的序列分析 | 第71-72页 |
·抗细胞凋亡因子DAD1在青石斑鱼不同组织中的表达分析 | 第72-75页 |
3 讨论 | 第75-77页 |
第四章 青石斑鱼同种移植炎症因子AIF-1的克隆和表达分析 | 第77-95页 |
1 材料与方法 | 第77-85页 |
·材料 | 第77-81页 |
·方法 | 第81-85页 |
2 结果 | 第85-93页 |
·AIF-1的克隆及序列分析 | 第85-86页 |
·AIF-1在青石斑鱼不同组织中的表达分析 | 第86-89页 |
·原核表达载体的构建 | 第89-90页 |
·融合蛋白的表达和纯化 | 第90-92页 |
·多克隆抗体的制备 | 第92页 |
·Western blot检测 | 第92-93页 |
3 讨论 | 第93-95页 |
第五章 青石斑鱼G蛋白信号转导调节因子RGS16的克隆和表达分析 | 第95-113页 |
1 材料与方法 | 第95-100页 |
·材料 | 第95-96页 |
·方法 | 第96-100页 |
2 结果 | 第100-111页 |
·RGS16的克隆及序列分析 | 第100-101页 |
·RGS16在青石斑鱼不同组织中的表达分析 | 第101-105页 |
·原核表达载体的构建 | 第105-106页 |
·RGS16融合蛋白的表达和纯化 | 第106页 |
·多克隆抗体的制备 | 第106页 |
·Western印迹检测 | 第106-108页 |
·重组杆状病毒转移载体的构建 | 第108页 |
·重组Bacmid DNA的获得 | 第108-109页 |
·RGS16基因在昆虫细胞中的表达 | 第109页 |
·Western印迹分析 | 第109-111页 |
3 讨论 | 第111-113页 |
全文小结 | 第113-115页 |
致谢 | 第115-116页 |
参考文献 | 第116-127页 |
附录 A 本文所用的缩略语 | 第127-129页 |
附录 B 攻读博士学位期间发表的学术论文及研究成果 | 第129页 |