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基因点突变检测新方法及新型界面设计的免疫传感器研究

摘要第1-8页
Abstract第8-19页
第1章 绪论第19-24页
   ·单碱基多态性第19-20页
     ·单碱基多态性的概念及检测意义第19页
     ·单碱基突变的检测方法第19-20页
   ·电化学免疫传感器第20-21页
     ·电化学免疫传感器及其分类第20-21页
     ·电化学免疫传感界面的构建方法第21页
   ·压电免疫传感器第21-22页
     ·压电免疫传感器的原理第21-22页
     ·压电免疫传感界面的构建方法第22页
   ·本研究论文的构想第22-24页
第2章 纳米金凝集变色效应结合高忠实性DNA 连接酶用于单碱基突变检测第24-37页
   ·前言第24-26页
   ·实验部分第26-27页
     ·试剂和仪器第26页
     ·核酸链纳米金的修饰第26-27页
     ·点突变的检测第27页
     ·细胞中基因DNA 的提取第27页
     ·基因DNA 的PCR 扩增第27页
   ·结果和讨论第27-36页
     ·核酸标记金纳米颗粒的制备及特性第27-28页
     ·野生型或突变型目标链与金标DNA 探针的杂交反应第28-29页
     ·熔链分析第29-31页
     ·探针设计第31页
     ·金标探针进行野生型或突变型目标链的连接分析第31-33页
     ·基因DNA 的分析第33-36页
   ·小结第36-37页
第3章 DNA 连接酶介导的纳米金凝集反应用于多目标链单碱基突变的同时检测第37-47页
   ·前言第37-39页
   ·实验部分第39-40页
     ·试剂和仪器第39页
     ·溶液中多组分的同时测定第39-40页
   ·结果和讨论第40-46页
     ·探针设计第40页
     ·熔链分析第40-42页
     ·影响连接反应的因素第42-44页
     ·金标DNA 探针对野生型或突变型目标链进行连接检测第44-46页
   ·小结第46-47页
第4章 基于等温滚环扩增反应和纳米金凝集变色的DNA 单碱基突变检测第47-52页
   ·前言第47-48页
   ·实验部分第48-49页
     ·试剂和仪器第48页
     ·金标核酸探针的制备第48页
     ·探针的酶连反应第48页
     ·滚环扩增反应的检测第48-49页
   ·结果和讨论第49-51页
     ·环形探针的设计第49-50页
     ·成环反应温度的选择第50页
     ·单碱基突变的检测第50-51页
   ·小结第51-52页
第5章 分子信标变构控制的电化学通道用于单碱基错配DNA 目标链的无试剂检测第52-62页
   ·前言第52-54页
   ·实验部分第54-56页
     ·试剂和仪器第54-55页
     ·电极的预处理和分子信标的固定第55页
     ·电极表面分子信标的固定密度第55-56页
     ·分子信标稳定性的考察第56页
     ·分子信标环状部分与目标链杂交双链的熔链温度的考察第56页
     ·目标链的检测第56页
     ·传感器的再生第56页
   ·结果与讨论第56-61页
     ·分子信标环状部分与目标链杂交双链的熔链温度的考察第56-58页
     ·分子信标稳定性的考察第58-59页
     ·传感器的电化学响应特性第59-61页
     ·碱基不匹配目标链的区分第61页
     ·目标链的检测第61页
     ·传感器的再生第61页
   ·小结第61-62页
第6章 Aptamer Beacon 变构控制的电化学通道用于凝血酶的无试剂检测第62-67页
   ·前言第62-64页
   ·实验部分第64页
     ·试剂和仪器第64页
     ·电极的预处理和分子信标识体的固定第64页
     ·凝血酶的检测第64页
   ·结果与讨论第64-66页
     ·分子信标识体修饰电极的电化学特性第64-66页
     ·凝血酶的检测第66页
     ·传感器的再生第66页
   ·小结第66-67页
第7章 基于等离子体聚合膜的电容型免疫传感器第67-77页
   ·前言第67-68页
   ·实验部分第68-69页
     ·试剂和仪器第68页
     ·传感器的制备第68-69页
     ·实验方法第69页
   ·结果和讨论第69-76页
     ·等离子体聚合膜的特性第69-71页
     ·电容测量中激励频率的优化第71-73页
     ·传感界面的循环伏安特性第73页
     ·抗体培育浓度的选择第73页
     ·非特异性吸附试验第73-74页
     ·传感器的响应特性第74-75页
     ·传感器的再生第75页
     ·人血清样品的分析第75-76页
   ·小结第76-77页
第8章 基于1,6-己二硫醇和纳米金自组装可再生的电容型免疫传感器研究第77-88页
   ·前言第77-78页
   ·实验部分第78-80页
     ·试剂和仪器第78页
     ·胶体金的制备第78-79页
     ·传感界面的构建第79-80页
     ·免疫反应的检测第80页
   ·结果和讨论第80-87页
     ·原理第80-81页
     ·电极表面的绝缘性第81-82页
     ·pH 和离子强度对绝缘层稳定性的影响第82页
     ·抗体的固定化条件第82-85页
     ·非特异性吸附和回收率实验第85-86页
     ·传感器的响应特性第86-87页
     ·免疫传感器的再生第87页
   ·小结第87-88页
第9章 酶催化沉积放大的电化学阻抗法用于人IgM 的免疫检测第88-97页
   ·前言第88-89页
   ·实验部分第89-91页
     ·试剂和仪器第89页
     ·金电极的预处理第89-90页
     ·免疫反应及酶标抗体在电极表面的固定第90页
     ·酶催化沉积反应第90-91页
   ·结果与讨论第91-96页
     ·电极界面的电化学阻抗特性第91页
     ·蛋白A 浓度的影响第91-92页
     ·抗体包被过程中酸度、稀释度的影响第92-94页
     ·酶标抗体用量的优化第94页
     ·pH 和反应时间对酶催化氧化沉积的影响第94-96页
     ·IgM 的测定第96页
   ·小结第96-97页
第10章 纳米金聚集复合物放大的计时电位法测定补体C3第97-105页
   ·前言第97-98页
   ·实验部分第98-99页
     ·试剂和仪器第98页
     ·金标羊抗人C_3 和金标兔抗羊IgG 的制备及免疫复合物的形成第98页
     ·金电极的预处理第98页
     ·抗体及免疫复合物的固定第98-99页
     ·测定方法第99页
   ·结果与讨论第99-104页
     ·免疫传感器的计时电位特征第99-100页
     ·抗体包被条件的优化第100页
     ·金标羊抗人C_3 与金标兔抗羊IgG 的配比对电极响应的影响第100-102页
     ·补体C_3 的测定第102-103页
     ·传感器的再生第103-104页
   ·小结第104-105页
第11章 基于邻苯二胺电聚合膜和PSS 聚电解质自组装界面的压电免疫传感器第105-115页
   ·前言第105-106页
   ·实验部分第106-107页
     ·试剂和仪器第106页
     ·电聚合膜的制备第106页
     ·聚电解质自组装及抗体包被第106页
     ·共价交联法抗体固定第106页
     ·测量方法第106-107页
     ·传感器的再生第107页
   ·结果与讨论第107-114页
     ·电聚合邻苯二胺膜第107页
     ·PSS 自组装和IgG Ab 固定第107-112页
     ·酸度对免疫反应的影响第112页
     ·传感器的响应特性第112-114页
   ·小结第114-115页
第12章 基于磁性纳米颗粒固定的压电免疫传感器的研究第115-122页
   ·前言第115页
   ·实验部分第115-118页
     ·仪器与试剂第115页
     ·压电传感器的制备第115-116页
     ·氨基化核壳磁性纳米颗粒的合成第116-118页
     ·核壳磁性纳米颗粒的抗体修饰及在压电晶振表面的固定第118页
     ·检测过程第118页
     ·传感器再生第118页
   ·结果与讨论第118-121页
     ·磁场的作用第118-119页
     ·晶振表面生物磁性颗粒固定量的估算第119页
     ·非特异性吸附的消除第119-121页
     ·传感器的再生第121页
   ·小结第121-122页
结论第122-123页
参考文献第123-138页
附录 A 攻读学位期间发表的学术论文目录第138-141页
致谢第141页

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