摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第1章 引言 | 第11-37页 |
·Wnt 信号传导通路概述 | 第12-14页 |
·Wnt 基因的发现及Wnt 信号传导通路的建立 | 第12页 |
·Wnt/β-catenin 信号传导通路 | 第12-14页 |
·LRP6 在Wnt 信号传导通路中的作用 | 第14-27页 |
·Arrow/LRP5/LRP6 的发现及其结构 | 第14-15页 |
·Arrow/LRP5/LRP6 参与Wnt 信号传导 | 第15-16页 |
·Arrow/LRP5/LRP6 传导Wnt 信号的机制:Wnt 共受体模型 | 第16-18页 |
·Arrow/LRP5/LRP6 的下游信号传导机制 | 第18-22页 |
·Arrow/LRP5/LRP6 的调节 | 第22-24页 |
·LRP5 的相关疾病 | 第24-26页 |
·Arrow/LRP5/LRP6 研究展望 | 第26-27页 |
·Rab5 鸟苷酸转换因子(GEF) | 第27-33页 |
·Rab 家族蛋白概述 | 第27-28页 |
·Rab5 鸟苷酸转换因子 | 第28-31页 |
·Rab5GEF 催化核心的结构及其作用机制 | 第31-33页 |
·总结和展望 | 第33页 |
·胞吞作用及其对细胞信号传导的调节作用简介 | 第33-37页 |
·胞吞作用简介 | 第33-35页 |
·胞吞作用与细胞信号传导 | 第35-37页 |
第2章 实验材料与方法 | 第37-59页 |
·菌种、细胞和文库 | 第37页 |
·抗体及荧光标记试剂 | 第37页 |
·质粒构建 | 第37-40页 |
·酵母双杂交实验 | 第40-43页 |
·反转录PCR | 第43-44页 |
·细胞培养 | 第44页 |
·细胞转染 | 第44-45页 |
·稳定细胞系的建立 | 第45-46页 |
·原核、真核蛋白纯化 | 第46-49页 |
·GST 融合蛋白的纯化 | 第46-47页 |
·6xHis 融合蛋白的纯化 | 第47-48页 |
·Flag 融合蛋白的纯化 | 第48-49页 |
·体外结合实验 | 第49-50页 |
·免疫共沉淀实验 | 第50-51页 |
·SDS-PAGE 和免疫印记(western blot) | 第51-52页 |
·荧光酶报告实验 | 第52-53页 |
·细胞内游离β-catenin 蛋白的检测 | 第53-54页 |
·Rab5 与 Varp 蛋白的体外结合实验 | 第54-55页 |
·Rab5 GDP/GTP 交换实验 | 第55-56页 |
·免疫荧光实验 | 第56-59页 |
第3章 Varp 基因的克隆及其特征和表达谱分析 | 第59-63页 |
·结果与讨论 | 第59-62页 |
·Varp 基因的克隆和特征分析 | 第59-62页 |
·Varp 基因的表达谱分析 | 第62页 |
·小结 | 第62-63页 |
第4章 Varp 与LRP6 的相互作用 | 第63-70页 |
·结果与讨论 | 第63-69页 |
·Varp 和LRP6 在酵母和体外的相互作用 | 第63-64页 |
·Varp 和LRP6 在哺乳动物细胞中的相互作用 | 第64-67页 |
·Varp 和LRP6 相互作用区域的确定 | 第67-69页 |
·小结 | 第69-70页 |
第5章 Varp 对Wnt/LRP6 信号传导的调节作用 | 第70-74页 |
·结果与讨论 | 第70-73页 |
·过量表达Varp 蛋白抑制Wnt/LRP6 信号传导 | 第70-71页 |
·降低内源型Varp 蛋白加强Wnt 信号活性 | 第71-73页 |
·小结 | 第73-74页 |
第6章 Varp 调节Wnt/LRP6 信号传导的机制探讨 | 第74-80页 |
·结果与讨论 | 第74-79页 |
·Varp 促进LRP6 蛋白的降解 | 第74-76页 |
·Varp 对LRP6 受体内吞过程的调节 | 第76-79页 |
·小节 | 第79-80页 |
第7章 Varp 调节内吞体的动态变化 | 第80-91页 |
·结果与讨论 | 第80-89页 |
·Varp 是一个 Rab21 鸟嘌呤核苷酸转换因子 | 第80-83页 |
·Varp 蛋白在细胞内的定位和对内吞体动态变化的调节 | 第83-85页 |
·Varp 蛋白结构域对其细胞内定位和功能的作用 | 第85-89页 |
·小节 | 第89-91页 |
结论 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-105页 |
致谢 | 第105-106页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第106页 |