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Varp与LRP6相互作用抑制性调控Wnt/b-catenin信号通路

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第1章 引言第11-37页
   ·Wnt 信号传导通路概述第12-14页
     ·Wnt 基因的发现及Wnt 信号传导通路的建立第12页
     ·Wnt/β-catenin 信号传导通路第12-14页
   ·LRP6 在Wnt 信号传导通路中的作用第14-27页
     ·Arrow/LRP5/LRP6 的发现及其结构第14-15页
     ·Arrow/LRP5/LRP6 参与Wnt 信号传导第15-16页
     ·Arrow/LRP5/LRP6 传导Wnt 信号的机制:Wnt 共受体模型第16-18页
     ·Arrow/LRP5/LRP6 的下游信号传导机制第18-22页
     ·Arrow/LRP5/LRP6 的调节第22-24页
     ·LRP5 的相关疾病第24-26页
     ·Arrow/LRP5/LRP6 研究展望第26-27页
   ·Rab5 鸟苷酸转换因子(GEF)第27-33页
     ·Rab 家族蛋白概述第27-28页
     ·Rab5 鸟苷酸转换因子第28-31页
     ·Rab5GEF 催化核心的结构及其作用机制第31-33页
     ·总结和展望第33页
   ·胞吞作用及其对细胞信号传导的调节作用简介第33-37页
     ·胞吞作用简介第33-35页
     ·胞吞作用与细胞信号传导第35-37页
第2章 实验材料与方法第37-59页
   ·菌种、细胞和文库第37页
   ·抗体及荧光标记试剂第37页
   ·质粒构建第37-40页
   ·酵母双杂交实验第40-43页
   ·反转录PCR第43-44页
   ·细胞培养第44页
   ·细胞转染第44-45页
   ·稳定细胞系的建立第45-46页
   ·原核、真核蛋白纯化第46-49页
     ·GST 融合蛋白的纯化第46-47页
     ·6xHis 融合蛋白的纯化第47-48页
     ·Flag 融合蛋白的纯化第48-49页
   ·体外结合实验第49-50页
   ·免疫共沉淀实验第50-51页
   ·SDS-PAGE 和免疫印记(western blot)第51-52页
   ·荧光酶报告实验第52-53页
   ·细胞内游离β-catenin 蛋白的检测第53-54页
   ·Rab5 与 Varp 蛋白的体外结合实验第54-55页
   ·Rab5 GDP/GTP 交换实验第55-56页
   ·免疫荧光实验第56-59页
第3章 Varp 基因的克隆及其特征和表达谱分析第59-63页
   ·结果与讨论第59-62页
     ·Varp 基因的克隆和特征分析第59-62页
     ·Varp 基因的表达谱分析第62页
   ·小结第62-63页
第4章 Varp 与LRP6 的相互作用第63-70页
   ·结果与讨论第63-69页
     ·Varp 和LRP6 在酵母和体外的相互作用第63-64页
     ·Varp 和LRP6 在哺乳动物细胞中的相互作用第64-67页
     ·Varp 和LRP6 相互作用区域的确定第67-69页
   ·小结第69-70页
第5章 Varp 对Wnt/LRP6 信号传导的调节作用第70-74页
   ·结果与讨论第70-73页
     ·过量表达Varp 蛋白抑制Wnt/LRP6 信号传导第70-71页
     ·降低内源型Varp 蛋白加强Wnt 信号活性第71-73页
   ·小结第73-74页
第6章 Varp 调节Wnt/LRP6 信号传导的机制探讨第74-80页
   ·结果与讨论第74-79页
     ·Varp 促进LRP6 蛋白的降解第74-76页
     ·Varp 对LRP6 受体内吞过程的调节第76-79页
   ·小节第79-80页
第7章 Varp 调节内吞体的动态变化第80-91页
   ·结果与讨论第80-89页
     ·Varp 是一个 Rab21 鸟嘌呤核苷酸转换因子第80-83页
     ·Varp 蛋白在细胞内的定位和对内吞体动态变化的调节第83-85页
     ·Varp 蛋白结构域对其细胞内定位和功能的作用第85-89页
   ·小节第89-91页
结论第91-92页
参考文献第92-105页
致谢第105-106页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第106页

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