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对疣荔枝螺细胞色素P450酶系及其基因CYP的研究

目录第1-5页
中文摘要第5-6页
英文摘要第6-8页
缩略语第8-9页
1 前言第9-19页
   ·环境激素及有机锡第9-11页
   ·性畸变机制的相关研究第11-13页
   ·细胞色素P450酶系简介第13-14页
     ·细胞色素P450酶系的基本特征第13页
     ·对细胞色素P450的几点认识第13页
     ·分类与命名第13-14页
   ·CYP19、CYP4第14-16页
     ·激素合成与CYP19第14-15页
     ·CYP4第15-16页
   ·细胞色素P450基因CYP的克隆策略第16-17页
   ·本论文的研究内容和研究意义第17-19页
2 主要仪器与试剂第19-20页
   ·主要仪器第19页
   ·主要试剂第19-20页
3 实验材料第20页
4 实验方法第20-30页
   ·雌、雄及性畸变疣荔枝螺P450酶系生化水平上的研究第20-22页
     ·微粒体酶源的制备第20页
     ·蛋白质含量测定第20-21页
     ·细胞色素P450含量测定第21页
     ·细胞色素b_5含量测定第21页
     ·NADPH—细胞色素P450还原酶活性测定第21页
     ·SDS—PAGE第21-22页
   ·对雌疣荔枝螺细胞色素P450基因CYP的探索研究第22-30页
     ·疣荔枝螺基因组DNA的提取第22页
     ·疣荔枝螺RNA的提取第22-23页
     ·对疣荔枝螺CYP19基因的探究第23-29页
       ·简并引物的设计与合成第23-26页
       ·简并引物PCR反应条件的摸索第26-27页
       ·RT—PCR第27页
       ·目的条带回收及二次PCR第27页
       ·二次PCR产物的克隆第27-29页
     ·对疣荔枝螺CYP4基因的探索第29页
       ·简并引物的设计与合成第29页
       ·RT—PCR反应的程序步骤第29页
     ·测序结果分析第29-30页
5 结果与分析第30-41页
   ·细胞色素P450酶系生化水平的分析第30-31页
     ·细胞色素P450的吸收光谱第30页
     ·细胞色素b_5的吸收光谱第30页
     ·雌、雄和性畸变疣荔枝螺P450酶系三种组分的比较第30-31页
     ·雌、雄和性畸变疣荔枝螺内脏团微粒体蛋白SDS—PAGE电泳结果第31页
   ·疣荔枝螺细胞色素P450分子水平的探索研究第31-41页
     ·疣荔枝螺基因组DNA的提取结果第31页
     ·疣荔枝螺RNA的提取结果第31-32页
     ·引物1、引物2研究的结果第32-37页
       ·PCR结果第32页
       ·RT—PCR结果第32-33页
       ·克隆和酶切分析第33页
       ·测序结果与序列比较第33-34页
       ·BLAST序列分析第34-37页
     ·引物3、引物4对疣荔枝螺的研究结果第37-38页
       ·雌螺腹足RT—PCR的结果第37页
       ·克隆、酶切分析及测序第37-38页
       ·雌螺内脏团RT—PCR及测序的结果第38页
     ·由引物3、引物4所得序列之分析第38-41页
6 讨论第41-46页
   ·疣荔枝螺生化水平的分析第41-42页
     ·微粒体细胞色素P450酶系及其防护性生化反应第41页
     ·微粒体细胞色素P450酶系在性激素合成和转化过程的功能以及性畸变现象第41-42页
     ·对细胞色素P450吸收光谱的分析第42页
     ·对疣荔枝螺细胞色素P450酶系测定结果的分析第42页
   ·疣荔枝螺分子水平的分析第42-46页
     ·简并PCR与简并引物设计第42-43页
     ·相关结果讨论第43-46页
7 小结第46-47页
参考文献第47-50页
第50-51页
致谢第51页

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