目录 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
缩略语 | 第8-9页 |
1 前言 | 第9-19页 |
·环境激素及有机锡 | 第9-11页 |
·性畸变机制的相关研究 | 第11-13页 |
·细胞色素P450酶系简介 | 第13-14页 |
·细胞色素P450酶系的基本特征 | 第13页 |
·对细胞色素P450的几点认识 | 第13页 |
·分类与命名 | 第13-14页 |
·CYP19、CYP4 | 第14-16页 |
·激素合成与CYP19 | 第14-15页 |
·CYP4 | 第15-16页 |
·细胞色素P450基因CYP的克隆策略 | 第16-17页 |
·本论文的研究内容和研究意义 | 第17-19页 |
2 主要仪器与试剂 | 第19-20页 |
·主要仪器 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
3 实验材料 | 第20页 |
4 实验方法 | 第20-30页 |
·雌、雄及性畸变疣荔枝螺P450酶系生化水平上的研究 | 第20-22页 |
·微粒体酶源的制备 | 第20页 |
·蛋白质含量测定 | 第20-21页 |
·细胞色素P450含量测定 | 第21页 |
·细胞色素b_5含量测定 | 第21页 |
·NADPH—细胞色素P450还原酶活性测定 | 第21页 |
·SDS—PAGE | 第21-22页 |
·对雌疣荔枝螺细胞色素P450基因CYP的探索研究 | 第22-30页 |
·疣荔枝螺基因组DNA的提取 | 第22页 |
·疣荔枝螺RNA的提取 | 第22-23页 |
·对疣荔枝螺CYP19基因的探究 | 第23-29页 |
·简并引物的设计与合成 | 第23-26页 |
·简并引物PCR反应条件的摸索 | 第26-27页 |
·RT—PCR | 第27页 |
·目的条带回收及二次PCR | 第27页 |
·二次PCR产物的克隆 | 第27-29页 |
·对疣荔枝螺CYP4基因的探索 | 第29页 |
·简并引物的设计与合成 | 第29页 |
·RT—PCR反应的程序步骤 | 第29页 |
·测序结果分析 | 第29-30页 |
5 结果与分析 | 第30-41页 |
·细胞色素P450酶系生化水平的分析 | 第30-31页 |
·细胞色素P450的吸收光谱 | 第30页 |
·细胞色素b_5的吸收光谱 | 第30页 |
·雌、雄和性畸变疣荔枝螺P450酶系三种组分的比较 | 第30-31页 |
·雌、雄和性畸变疣荔枝螺内脏团微粒体蛋白SDS—PAGE电泳结果 | 第31页 |
·疣荔枝螺细胞色素P450分子水平的探索研究 | 第31-41页 |
·疣荔枝螺基因组DNA的提取结果 | 第31页 |
·疣荔枝螺RNA的提取结果 | 第31-32页 |
·引物1、引物2研究的结果 | 第32-37页 |
·PCR结果 | 第32页 |
·RT—PCR结果 | 第32-33页 |
·克隆和酶切分析 | 第33页 |
·测序结果与序列比较 | 第33-34页 |
·BLAST序列分析 | 第34-37页 |
·引物3、引物4对疣荔枝螺的研究结果 | 第37-38页 |
·雌螺腹足RT—PCR的结果 | 第37页 |
·克隆、酶切分析及测序 | 第37-38页 |
·雌螺内脏团RT—PCR及测序的结果 | 第38页 |
·由引物3、引物4所得序列之分析 | 第38-41页 |
6 讨论 | 第41-46页 |
·疣荔枝螺生化水平的分析 | 第41-42页 |
·微粒体细胞色素P450酶系及其防护性生化反应 | 第41页 |
·微粒体细胞色素P450酶系在性激素合成和转化过程的功能以及性畸变现象 | 第41-42页 |
·对细胞色素P450吸收光谱的分析 | 第42页 |
·对疣荔枝螺细胞色素P450酶系测定结果的分析 | 第42页 |
·疣荔枝螺分子水平的分析 | 第42-46页 |
·简并PCR与简并引物设计 | 第42-43页 |
·相关结果讨论 | 第43-46页 |
7 小结 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-50页 |
附 | 第50-51页 |
致谢 | 第51页 |