| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 引言 | 第9-25页 |
| ·端粒酶与肿瘤 | 第9-12页 |
| ·端粒 | 第9页 |
| ·端粒酶 | 第9-11页 |
| ·端粒-端粒酶假说 | 第11-12页 |
| ·端粒酶与肿瘤的治疗 | 第12页 |
| ·单链抗体与肿瘤 | 第12-23页 |
| ·单链抗体 | 第13-14页 |
| ·单链抗体的构建 | 第14-15页 |
| ·单链抗体在肿瘤诊断治疗中的应用 | 第15-18页 |
| ·单链抗体与病毒类疾病的诊治 | 第18-21页 |
| ·单链抗体的改进 | 第21-23页 |
| ·实验的目的及意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-39页 |
| ·试验材料 | 第25-28页 |
| ·菌株与细胞系 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·常用储备液及缓冲液 | 第26-27页 |
| ·细菌培养基 | 第27-28页 |
| ·细胞培养基 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-38页 |
| ·单克隆抗体可变区基因的克隆 | 第28-31页 |
| ·端粒酶ScFv 的构建 | 第31-36页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·端粒酶ScFv 的抗肿瘤作用检测 | 第37-38页 |
| ·数据处理 | 第38-39页 |
| 3 实验结果 | 第39-45页 |
| ·单克隆抗体可变区基因的克隆 | 第39-40页 |
| ·小鼠杂交瘤细胞中抽提总RNA | 第39页 |
| ·扩增轻链、重链可变区cDNA | 第39-40页 |
| ·转化子的筛选 | 第40页 |
| ·端粒酶scFv 的构建 | 第40-43页 |
| ·轻链、重链的连接 | 第40-41页 |
| ·转化子的筛选 | 第41页 |
| ·阳性克隆小量表达筛选 | 第41-42页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第42页 |
| ·western blot 检测 | 第42-43页 |
| ·真核载体的构建 | 第43-44页 |
| ·转化子的筛选 | 第43页 |
| ·质粒的双酶切消化 | 第43-44页 |
| ·端粒酶ScFv 生物学活性的检测 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| ·构建抗端粒酶逆转录酶hTERT 单链抗体的必要性 | 第45页 |
| ·linker 的选取 | 第45页 |
| ·蛋白纯化标签的选取以及蛋白复性条件的摸索 | 第45-46页 |
| ·选择pEGFP-C1 真核表达载体构建pEGFP-C1-ScFv | 第46页 |
| ·ScFv 的生物活性分析 | 第46-47页 |
| ·展望 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第54页 |