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拟南芥mTERF蛋白PDE191功能的初步研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 引言第8-20页
   ·光合作用第8页
   ·叶绿体第8-14页
     ·叶绿体起源和进化第9-10页
     ·叶绿体形态结构及功能第10-11页
     ·叶绿体的发育第11-12页
     ·拟南芥叶绿体功能基因研究进展第12-14页
   ·植物叶色突变第14-16页
   ·mTERF家族蛋白研究进展第16-20页
     ·mTERF家族的进化第17-18页
     ·mTERF家族的结构特征及功能第18-20页
2 材料与方法第20-40页
   ·实验材料第20-23页
     ·植物材料第20页
     ·主要仪器第20-21页
     ·菌株、质粒第21页
       ·菌株第21页
       ·质粒载体第21页
     ·抗生素第21-22页
     ·培养基配方第22-23页
   ·实验方法第23-40页
     ·拟南芥的培养、种植、农杆菌转化以及转基因植株的筛选第23-24页
       ·拟南芥的无菌培养第23页
       ·拟南芥的种植及农杆菌的转化第23-24页
       ·筛选拟南芥转基因植株第24页
       ·拟南芥杂交第24页
     ·T-DNA插入突变体的鉴定第24-25页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第25-26页
     ·大肠杆菌感受态细胞的转化第26-27页
     ·农杆菌感受态细胞的制备第27页
     ·农杆菌感受态细胞的转化第27-28页
     ·克隆载体的鉴定第28页
     ·质粒DNA的少量制备 碱裂解法第28-29页
     ·酶切鉴定体系小量酶解反应第29页
     ·连接体系的建立第29页
     ·载体构建第29-31页
       ·互补载体的构建第29-30页
       ·亚细胞定位载体的构建第30-31页
     ·拟南芥DNA和RNA的抽取第31-32页
       ·拟南芥DNA的抽取第31页
       ·拟南芥RNA的抽取第31-32页
     ·RT-PCR和Real-Time PCR第32-33页
       ·RNA反转录合成cDNA第一链第32-33页
       ·半定量PCR第33页
     ·原生质体导入亚细胞定位GFP载体第33-35页
     ·透射电镜观察第35-36页
     ·RNA印迹杂交(Northern Blot)第36-40页
3 结果与讨论第40-55页
   ·pde191-1突变体的获得及连锁分析第40-41页
   ·pde191突变体的遗传互补实验第41-42页
   ·突变体pde191的表型分析第42-43页
   ·PDE191的沉默导致拟南芥叶绿体不能正常发育第43-44页
   ·PDE191基因转录本分析第44-45页
   ·PDE191序列分析及进化情况分析第45-48页
   ·PDE191蛋白的亚细胞定位分析第48-49页
   ·PDE191转录本的表达模式第49-50页
   ·pde191突变体对质体基因表达的影响第50-51页
   ·PDE191基因的转录终止功能初步研究第51页
   ·讨论第51-55页
     ·PDE191基因的突变导致植株白化致死第52页
     ·PDE191基因是叶绿体生长发育的必须基因第52-53页
     ·PDE191是mTERF蛋白家族的一员第53-54页
     ·PDE191蛋白的缺失对质体基因转录的影响第54-55页
参考文献第55-60页
致谢第60-62页

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