第一篇 文献综述 | 第1-68页 |
1 植物基因工程的发展现状、前景及存在的问题 | 第12-34页 |
·植物基因工程的发展现状 | 第12-14页 |
·植物基因工程的遗传转化方法 | 第14-17页 |
·植物基因工程应用性进展 | 第17-24页 |
·提高产量和品质的植物基因工程 | 第17-19页 |
·抗虫的植物基因工程 | 第19页 |
·抗除草剂的植物基因工程 | 第19-20页 |
·抗病毒的植物基因工程 | 第20-23页 |
·用于医药生产的植物基因工程 | 第23-24页 |
·植物基因工程的发展前景 | 第24-26页 |
·植物基因工程存在的问题 | 第26-34页 |
·植物基因工程存在的技术问题 | 第26-27页 |
·植物基因工程存在的潜在应用问题 | 第27-34页 |
2 大豆基因工程的现状及发展前景 | 第34-43页 |
·大豆再生体系研究进展 | 第35-38页 |
·大豆体细胞胚胎发生再生系统 | 第35-37页 |
·大豆器官发生再生系统 | 第37页 |
·原生质体再生系统 | 第37-38页 |
·大豆遗传转化研究进展 | 第38-42页 |
·农杆菌介导法(agrobacterium-mediated) | 第38-39页 |
·基因枪法(particle gun) | 第39-40页 |
·原位转化法 | 第40页 |
·聚乙二醇(PEG)介导法 | 第40-41页 |
·电击法(Electroporation) | 第41页 |
·花粉管通道法(Direct introduction exogenous DNA,DIED) | 第41页 |
·显微注射法(Microinjection) | 第41-42页 |
·大豆转基因研究的发展方向 | 第42-43页 |
3 抗逆性改良的基因工程 | 第43-54页 |
·植物对逆境胁迫的适应性 | 第44-45页 |
·逆境胁迫诱导基因的调控与表达 | 第45-46页 |
·耐盐、抗旱机制 | 第46页 |
·一些已分离和鉴定的抗逆基因作用机理 | 第46-48页 |
·通过基因转移改良植物抗逆性 | 第48-52页 |
·DREB 转录因子基因及其应用 | 第52-54页 |
4 Bar 基因和转Bar 基因作物的研究进展 | 第54-58页 |
·Bar 基因和转Bar 基因作物的研究现状 | 第54-56页 |
·Bar 基因在作物遗传育种上的应用 | 第56-58页 |
5 植物反应器与植物疫苗 | 第58-68页 |
·植物反应器 | 第58-60页 |
·植物疫苗 | 第60-61页 |
·口蹄疫疫苗的研究进展 | 第61-68页 |
第二篇 试验内容 | 第68-124页 |
第一章 将携带抗逆相关基因质粒pRdGM-200 向农杆菌转化的研究 | 第68-84页 |
1 材料 | 第68-70页 |
·菌株与质粒 | 第68-69页 |
·药品和试剂 | 第69页 |
·PCR 引物 | 第69-70页 |
·主要仪器设备 | 第70页 |
·工程菌液培养基 | 第70页 |
2 方法 | 第70-76页 |
·质粒DNA 的小量提取 | 第70-71页 |
·pRdGM-200 质粒的农杆菌转化 | 第71-75页 |
·冻融法 | 第71-73页 |
·电击法 | 第73-75页 |
·转化菌株的鉴定 | 第75-76页 |
·PCR 鉴定 | 第75-76页 |
·酶切鉴定 | 第76页 |
3 结果与分析 | 第76-81页 |
·冻融法转化农杆菌菌株的获得 | 第76-78页 |
·不同生长时期细胞对转化率的影响 | 第76-77页 |
·感受态农杆菌细胞处理方式对转化率的影响 | 第77-78页 |
·电击法转化农杆菌菌株的获得 | 第78-80页 |
·不同电场强度对转化效率的影响 | 第78页 |
·脉冲持续时间对转化效率的影响 | 第78-79页 |
·不同生长时期细胞对电转化率的影响 | 第79-80页 |
·农杆菌重组子检测 | 第80-81页 |
·PCR 检测结果 | 第80页 |
·酶切检测结果 | 第80-81页 |
4 讨论 | 第81-84页 |
第二章 利用农杆菌介导法将抗逆相关的GM 基因导入大豆的研究 | 第84-104页 |
1 材料 | 第85-87页 |
·植物材料 | 第85页 |
·菌株与质粒 | 第85页 |
·培养基 | 第85-86页 |
·酶及生化试剂 | 第86页 |
·主要仪器设备 | 第86-87页 |
2 方法 | 第87-95页 |
·大豆遗传转化体系 | 第87-88页 |
·农杆菌的侵染及筛选 | 第88-89页 |
·转基因植株的耐旱耐盐性鉴定 | 第89页 |
·抗性植株的分子检测 | 第89-95页 |
3 结果与分析 | 第95-101页 |
·农杆菌转化大豆未成熟子叶遗传转化体系的建立 | 第95-99页 |
·耐旱耐盐性鉴定 | 第99-100页 |
·抗性植株的分子检测 | 第100-101页 |
4 讨论 | 第101-104页 |
第三章 用基因枪法将抗逆相关的GM 基因导入大豆的研究 | 第104-116页 |
1 材料 | 第104-106页 |
·植物材料 | 第104页 |
·供试质粒 | 第104-105页 |
·培养基 | 第105页 |
·主要设备 | 第105-106页 |
2 方法 | 第106-111页 |
·植物材料诱导及处理 | 第106页 |
·质粒DNA 的大量提取与纯化 | 第106-108页 |
·基因枪轰击 | 第108-109页 |
·抗性体细胞胚筛选及植株再生 | 第109页 |
·抗性植株的检测 | 第109-111页 |
3 结果和分析 | 第111-113页 |
·抗性筛选剂PPT 浓度的确定 | 第111-112页 |
·抗性植株PCR 检测 | 第112页 |
·抗性植株 PCR-southern 杂交结果 | 第112-113页 |
4 讨论 | 第113-116页 |
第四章 农杆菌介导法将FMDV 全长基因P1 导入大豆的研究 | 第116-124页 |
1 材料 | 第116-118页 |
·植物材料 | 第116-117页 |
·菌株和质粒 | 第117页 |
·培养基 | 第117页 |
·酶和生化试剂 | 第117-118页 |
·主要仪器设备 | 第118页 |
2 方法 | 第118-121页 |
·大豆未成熟子叶的转化 | 第118-120页 |
·抗性植株的检测与鉴定 | 第120-121页 |
3 结果与分析 | 第121-122页 |
·PCR 鉴定结果 | 第121-122页 |
·阳性植株 PCR-southern 杂交鉴定结果 | 第122页 |
4 讨论 | 第122-124页 |
结论 | 第124-126页 |
参考文献 | 第126-132页 |
附录Ⅰ 图版 | 第132-133页 |
附录Ⅱ 图版说明 | 第133-140页 |