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斑马鱼中第二个纤连蛋白基因的识别与表达分析

中文摘要第1-7页
Abstract第7-8页
第一章 综述第8-23页
 1.1 前言第8页
 1.2 纤连蛋白的分布第8-9页
 1.3 纤连蛋白的组织结构第9-11页
 1.4 纤连蛋白的多种异构体形式第11-12页
 1.5 纤连蛋白基因的结构第12页
 1.6 纤连蛋白在脊椎动物生长和发育过程中的功能第12-15页
  1.6.1 纤连蛋白在发育中的功能第12-14页
  1.6.2 纤连蛋白不同的剪接异构体在胚胎发育中的功能第14-15页
 1.7 斑马鱼是研究脊椎动物发育的极好模型第15-16页
 参考文献第16-23页
第二章 斑马鱼第二个纤连蛋白基因(fn1b)的分子克隆第23-38页
 2.1 前言第23页
 2.2 材料与方法第23-27页
  2.2.1 斑马鱼的饲养第23-24页
  2.2.2 斑马鱼总 RNA的抽提第24页
  2.2.3 从总 RNA中分离m RNA第24-25页
  2.2.3 RNA逆转录第25页
  2.2.4 5'-RACE-PCR第25页
  2.2.5 End-end PCR第25-26页
  2.2.6 DNA片段的切胶回收第26页
  2.2.7 DNA片段的克隆及测序第26-27页
  2.2.8 进化树的构建第27页
 2.3 结果第27-35页
  2.3.1 总RNA抽提第27-28页
  2.3.2 5'-RACE结果第28页
  2.3.3 End-end PCR结果第28-31页
  2.3.4 fn1b的基因序列结构第31-34页
  2.3.5 fn1b cDNA编码高度保守的纤连蛋白第34-35页
 2.4 讨论第35-37页
 参考文献第37-38页
第三章 斑马鱼FN1b剪接异构体的鉴定第38-48页
 3.1 前言第38页
 3.2 材料与方法第38-41页
  3.2.1 斑马鱼肝脏组织总 RNA的抽提第38-39页
  3.2.2 RNA逆转录第39页
  3.2.3 PCR第39-40页
  3.2.4 3'-RACE-PCR第40-41页
 3.3 结果第41-45页
  3.3.1 EⅢB区剪接情况第41-42页
  3.3.2 EⅢA区剪接情况第42-43页
  3.3.3 V区剪接情况第43-44页
  3.3.4 其它剪接体的检测第44-45页
 3.4 讨论第45-47页
 参考文献第47-48页
第四章 斑马鱼FN1b不同异构体的表达第48-58页
 4.1 前言第48页
 4.2 材料和方法第48-53页
  4.2.1 斑马鱼总 RNA的抽提第48-49页
  4.2.2 RNA逆转录第49页
  4.2.3 PCR方法检测FN1b异构体的表达第49-50页
  4.2.4 构建用来合成整体原位杂交的探针的质粒第50页
  4.2.5 地高辛标记的 RNA探针的体外合成第50-51页
  4.2.6 整体原位杂交第51-53页
 4.3 结果第53-55页
  4.3.1 FN1b异构体在斑马鱼不同胚胎发育时期的表达第53-54页
  4.3.2 FN1b在斑马鱼不同成体组织中的表达第54页
  4.3.3 fn1b在斑马鱼胚胎中的表达模式第54-55页
 4.4 讨论第55-56页
 参考文献第56-58页
致谢第58页

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