中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 综述 | 第8-23页 |
1.1 前言 | 第8页 |
1.2 纤连蛋白的分布 | 第8-9页 |
1.3 纤连蛋白的组织结构 | 第9-11页 |
1.4 纤连蛋白的多种异构体形式 | 第11-12页 |
1.5 纤连蛋白基因的结构 | 第12页 |
1.6 纤连蛋白在脊椎动物生长和发育过程中的功能 | 第12-15页 |
1.6.1 纤连蛋白在发育中的功能 | 第12-14页 |
1.6.2 纤连蛋白不同的剪接异构体在胚胎发育中的功能 | 第14-15页 |
1.7 斑马鱼是研究脊椎动物发育的极好模型 | 第15-16页 |
参考文献 | 第16-23页 |
第二章 斑马鱼第二个纤连蛋白基因(fn1b)的分子克隆 | 第23-38页 |
2.1 前言 | 第23页 |
2.2 材料与方法 | 第23-27页 |
2.2.1 斑马鱼的饲养 | 第23-24页 |
2.2.2 斑马鱼总 RNA的抽提 | 第24页 |
2.2.3 从总 RNA中分离m RNA | 第24-25页 |
2.2.3 RNA逆转录 | 第25页 |
2.2.4 5'-RACE-PCR | 第25页 |
2.2.5 End-end PCR | 第25-26页 |
2.2.6 DNA片段的切胶回收 | 第26页 |
2.2.7 DNA片段的克隆及测序 | 第26-27页 |
2.2.8 进化树的构建 | 第27页 |
2.3 结果 | 第27-35页 |
2.3.1 总RNA抽提 | 第27-28页 |
2.3.2 5'-RACE结果 | 第28页 |
2.3.3 End-end PCR结果 | 第28-31页 |
2.3.4 fn1b的基因序列结构 | 第31-34页 |
2.3.5 fn1b cDNA编码高度保守的纤连蛋白 | 第34-35页 |
2.4 讨论 | 第35-37页 |
参考文献 | 第37-38页 |
第三章 斑马鱼FN1b剪接异构体的鉴定 | 第38-48页 |
3.1 前言 | 第38页 |
3.2 材料与方法 | 第38-41页 |
3.2.1 斑马鱼肝脏组织总 RNA的抽提 | 第38-39页 |
3.2.2 RNA逆转录 | 第39页 |
3.2.3 PCR | 第39-40页 |
3.2.4 3'-RACE-PCR | 第40-41页 |
3.3 结果 | 第41-45页 |
3.3.1 EⅢB区剪接情况 | 第41-42页 |
3.3.2 EⅢA区剪接情况 | 第42-43页 |
3.3.3 V区剪接情况 | 第43-44页 |
3.3.4 其它剪接体的检测 | 第44-45页 |
3.4 讨论 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-48页 |
第四章 斑马鱼FN1b不同异构体的表达 | 第48-58页 |
4.1 前言 | 第48页 |
4.2 材料和方法 | 第48-53页 |
4.2.1 斑马鱼总 RNA的抽提 | 第48-49页 |
4.2.2 RNA逆转录 | 第49页 |
4.2.3 PCR方法检测FN1b异构体的表达 | 第49-50页 |
4.2.4 构建用来合成整体原位杂交的探针的质粒 | 第50页 |
4.2.5 地高辛标记的 RNA探针的体外合成 | 第50-51页 |
4.2.6 整体原位杂交 | 第51-53页 |
4.3 结果 | 第53-55页 |
4.3.1 FN1b异构体在斑马鱼不同胚胎发育时期的表达 | 第53-54页 |
4.3.2 FN1b在斑马鱼不同成体组织中的表达 | 第54页 |
4.3.3 fn1b在斑马鱼胚胎中的表达模式 | 第54-55页 |
4.4 讨论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-58页 |
致谢 | 第58页 |