| 1 引言 | 第1-19页 |
| ·尼帕病毒性脑炎概况 | 第9-11页 |
| ·流行病学 | 第9-10页 |
| ·临床表现 | 第10-11页 |
| ·病理学变化 | 第11页 |
| ·病原及其分子生物学特性 | 第11-14页 |
| ·病原 | 第11-12页 |
| ·尼帕病毒的基因组结构、结构蛋白及其功能 | 第12-14页 |
| ·NiV与其它副粘病毒的关系 | 第14-16页 |
| ·NiVE的诊断 | 第16-17页 |
| ·预防与控制 | 第17页 |
| ·本论文研究依据及意义 | 第17-19页 |
| 2 实验部分 | 第19-53页 |
| ·试验一 尼帕病毒F蛋白和G蛋白DNA免疫原性的研究 | 第19-25页 |
| ·材料与方法 | 第19-22页 |
| ·病毒 | 第19-20页 |
| ·基因材料与载体 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·细胞系与实验动物 | 第20页 |
| ·一步法制备DH5α大肠杆菌感受态 | 第20页 |
| ·真核表达质粒pCAGG-NiV-F和pCAGG-NiV-G的构建与鉴定 | 第20-21页 |
| ·真核表达质粒pCAGG-NiV-F和pCAGG-NiV-G的大量制备 | 第21页 |
| ·NiV-F和NiV-G基因表达蛋白的生物活性检测 | 第21页 |
| ·DNA免疫小鼠实验 | 第21页 |
| ·间接ELISA检测DNA免疫小鼠血清中的特异性抗体 | 第21-22页 |
| ·中和试验检测DNA免疫小鼠血清中的特异性中和抗体 | 第22页 |
| ·结果 | 第22-24页 |
| ·真核表达质粒pCAGG-NiV-F和pCAGG-NiV-G的酶切鉴定 | 第22页 |
| ·NiV F和G基因表达蛋白的生物活性检测 | 第22-23页 |
| ·间接ELISA检测DNA免疫小鼠血清中的特异性抗体 | 第23页 |
| ·中和试验检测DNA免疫小鼠血清中的特异性中和抗体 | 第23-24页 |
| ·讨论 | 第24-25页 |
| ·实验二 重组杆状病毒表达尼帕病毒F和G蛋白的研究 | 第25-45页 |
| ·材料与方法 | 第25-36页 |
| ·病毒、载体和受体菌 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·细菌培养基 | 第26页 |
| ·实验动物、细胞系及其培养基 | 第26页 |
| ·引物的设计与合成 | 第26-27页 |
| ·利用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统构建重组病毒 | 第27-31页 |
| ·间接免疫荧光检测重组杆状病毒表达蛋白 | 第31页 |
| ·原核表达F蛋白和G蛋白片段免疫小鼠制备血清 | 第31-34页 |
| ·重组杆状病毒表达蛋白的Western Blot检测 | 第34-35页 |
| ·重组杆状病毒表达蛋白免疫反应原性的检测 | 第35页 |
| ·重组杆状病毒表达蛋白免疫原性的检测 | 第35-36页 |
| ·结果 | 第36-43页 |
| ·重组质粒pFastBac~(TM)1-NF和pFastBac~(TM)1-NG的鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-NF和rBacmid-NG的鉴定 | 第37页 |
| ·重组杆状病毒的PCR鉴定 | 第37-38页 |
| ·间接免疫荧光（IFA）检测重组杆状病毒表达蛋白 | 第38页 |
| ·PCR扩增F’和G’基因 | 第38页 |
| ·序列测定 | 第38-39页 |
| ·原核表达质粒的鉴定 | 第39页 |
| ·原核表达F’和G’蛋白SDS-PAGE电泳分析 | 第39-40页 |
| ·原核表达蛋白的纯化 | 第40页 |
| ·重组杆状病毒表达蛋白的Western-Blot检测 | 第40-41页 |
| ·重组杆状病毒表达蛋白免疫反应原性的检测 | 第41页 |
| ·重组杆状病毒表达蛋白免疫原性的检测 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| ·实验三表达尼帕病毒F和G蛋白重组牛痘病毒的构建 | 第45-53页 |
| ·材料与方法 | 第45-48页 |
| ·病毒、基因材料 | 第45页 |
| ·载体、菌株和试剂 | 第45页 |
| ·引物设计 | 第45页 |
| ·重组转移载体pSC11-NF和pSC11-NG的构建 | 第45-46页 |
| ·转染 | 第46-47页 |
| ·重组牛痘病毒的筛选 | 第47页 |
| ·重组牛痘病毒的鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组牛痘病毒表达蛋白活性的检测 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-52页 |
| ·重组转移载体pSC11-NF和pSC11-NG的鉴定 | 第48-49页 |
| ·重组牛痘病毒的蚀斑纯化 | 第49-50页 |
| ·重组牛痘病毒的PCR鉴定 | 第50页 |
| ·重组牛痘病毒表达蛋白活性的检测 | 第50-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| 3 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录 | 第61-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
