| 中文摘要 | 第1-3页 |
| 英文摘要 | 第3-8页 |
| 引言 | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-46页 |
| ·类胰岛素生长因子 IGF 信号转导系统的研究进展 | 第12-29页 |
| ·IGF 的发现 | 第14-16页 |
| ·哺乳动物 IGF 信号系统 | 第16-21页 |
| ·IGFs | 第16-17页 |
| ·IGFs 受体 | 第17-18页 |
| ·IGFBPs | 第18-21页 |
| ·鱼类的 IGF 系统 | 第21-29页 |
| ·IGFs的结构功能和发育表达 | 第22页 |
| ·IGF-I 受体和下游信号网络 | 第22-25页 |
| ·IGFBPs 的结构表达和生理作用 | 第25-27页 |
| ·无颌类和脊索动物的 IGF 胰岛素/IGF超家族的进化 | 第27-29页 |
| ·小结 | 第29页 |
| ·新的模式生物---斑马鱼 | 第29-38页 |
| ·斑马鱼作为模式生物的优点 | 第29-30页 |
| ·研究的起源 | 第30-31页 |
| ·研究群体的出现 | 第31-33页 |
| ·跨入分子生物学时代 | 第33-35页 |
| ·斑马鱼模型的应用 | 第35-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| ·Morpholino基因沉默技术 | 第38-46页 |
| ·Morpholino 反义核酸阻断信使 mRNA的翻译 | 第39-40页 |
| ·用 Morpholino 技术模拟突变体的表型 | 第40-41页 |
| ·拟表型的变异 | 第41页 |
| ·非 morpholino 效应 | 第41-42页 |
| ·寡聚核苷酸的稳定性 | 第42-43页 |
| ·Morpholino的应用 | 第43-46页 |
| 第二章 IGFBP-3 的时空表达 | 第46-62页 |
| ·RT-PCR 分析 IGFBP-3 在斑马鱼胚胎和成体的表达 | 第46-50页 |
| ·材料和方法 | 第46-49页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·实验动物 | 第46-47页 |
| ·方法 | 第47-49页 |
| ·总 RNA的提取 | 第47页 |
| ·RT-PCR | 第47-49页 |
| ·结果 | 第49-50页 |
| ·IGFBP-3 mRNA在胚胎的时间表达和成体的空间表达 | 第49-50页 |
| ·整体原位杂交分析 IGFBP-3mRNA 在胚胎发育中的表达 | 第50-59页 |
| ·实验动物 | 第50页 |
| ·DIG-标记 RNA探针的制备 | 第50-52页 |
| ·质粒 DNA的分离纯化和线性化 | 第50页 |
| ·DIG-标记 RNA探针的合成 | 第50-52页 |
| ·胚胎整体原位杂交 | 第52-55页 |
| ·结果 | 第55-59页 |
| ·IGFBP-3 mRNA在胚胎发育中的时空表达 | 第55-59页 |
| ·讨论 | 第59-62页 |
| 第三章 IGFBP-3 对咽弓和内耳发育的调节 | 第62-87页 |
| ·实验动物 | 第63页 |
| ·方法 | 第63-70页 |
| ·DIG-标记 RNA探针的制备 | 第63页 |
| ·整体原位杂交分析 | 第63页 |
| ·蛋白质免疫印迹 | 第63-65页 |
| ·SDSPAGE 电泳 | 第63页 |
| ·Western blot | 第63-64页 |
| ·ECL 反应 | 第64-65页 |
| ·荧光标记微管蛋白免疫细胞化学 ICC | 第65-66页 |
| ·Morpholino knockdown | 第66页 |
| ·pCS2+ 表达载体 | 第66-68页 |
| ·检验 IGFBP-3 morpholino 功效的载体构建 | 第68-69页 |
| ·亚克隆构建 IGFBP-3 表达载体 | 第69页 |
| ·软骨细胞标记 AlcianBluestaining | 第69-70页 |
| ·统计分析 | 第70页 |
| ·结果 | 第70-84页 |
| ·IGFBP-3 morpholino功效和特异性的验证 | 第70-72页 |
| ·IGFBP-3 knockdown对咽弓形成和分化的影响 | 第72-75页 |
| ·IGFBP-3 knockdown对听囊形成和分化的影响 | 第75-78页 |
| ·IGFBP-3 Knockdown 对脑 心脏和血管形成的影响 | 第78-79页 |
| ·MO-抗性的 IGFBP-3 表达载体的构建和 mRNA功效检验 | 第79-81页 |
| ·过表达 MO-抗性的 IGFBP-3 对 knockdown 导致缺陷的营救 | 第81-84页 |
| ·讨论 | 第84-87页 |
| 第四章 IGFBP-3 在调节感光器官和神经组织发育中的作用 | 第87-106页 |
| ·方法 | 第87-88页 |
| ·胚胎整体原位杂交分析 | 第87-88页 |
| ·荧光标记神经元免疫细胞化学 | 第88页 |
| ·结果 | 第88-103页 |
| ·IGFBP-3 靶向 knockdown 眼睛发育的影响 | 第88-91页 |
| ·IGFBP-3knockdown 视网膜神经节轴突分化的影响 | 第91-95页 |
| ·IGFBP-3knockdown 对松果腺形成的影响 | 第95-98页 |
| ·IGFBP-3 knockdown对肌肉运动神经元分化的影响 | 第98-99页 |
| ·IGFBP-3knockdown 对头部和胸鳍大小的影响 | 第99页 |
| ·IGFBP-3 knockdown 对端脑和肌肉发育的影响 | 第99-101页 |
| ·外源 IGFBP-3 表达对视原基模式改变的恢复作用 | 第101-103页 |
| ·讨论 | 第103-106页 |
| 结论 | 第106-108页 |
| 附录 | 第108-111页 |
| 参考文献 | 第111-131页 |
| 发表文章 | 第131-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
