| 第一章 文献综述 | 第1-28页 |
| ·1,3-丙二醇概况 | 第9-12页 |
| ·1,3-丙二醇的应用 | 第9页 |
| ·1,3-丙二醇的合成方法 | 第9-12页 |
| ·甘油转化生产1,3-丙二醇的菌种和代谢途径 | 第12-13页 |
| ·生物转化生产1,3-丙二醇的生产能力 | 第13-14页 |
| ·菌种的基因改造 | 第14-15页 |
| ·甘油代谢关键酶的纯化、酶学性质以及分子机制 | 第15-20页 |
| ·甘油脱氢酶 | 第15-17页 |
| ·1,3-丙二醇氧化还原酶 | 第17-18页 |
| ·甘油脱水酶 | 第18-20页 |
| ·氧化还原酶催化过程中的辅酶连续再生和截留 | 第20-25页 |
| ·辅酶再生方法 | 第21-24页 |
| ·辅酶截留方法 | 第24-25页 |
| ·本文主要研究内容和创新点 | 第25-28页 |
| 第二章 克雷伯杆菌生产1,3-丙二醇关键酶酶活力分析方法研究 | 第28-37页 |
| ·材料和方法 | 第28-32页 |
| ·菌种 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28-29页 |
| ·主要仪器与设备 | 第29-30页 |
| ·培养基 | 第30页 |
| ·培养方法 | 第30-31页 |
| ·无细胞抽提液的制备方法 | 第31页 |
| ·分析方法 | 第31-32页 |
| ·结果与讨论 | 第32-36页 |
| ·GDH、PDOR、GDHt三种酶在细胞中的内外分布 | 第32页 |
| ·细胞破碎条件的确定 | 第32-33页 |
| ·反应pH对酶活力测定的影响 | 第33-34页 |
| ·反应温度对酶活力测定的影响 | 第34-35页 |
| ·GDH、PDOR初速度反应时间的确定 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36页 |
| 本章小结 | 第36-37页 |
| 第三章 克雷伯杆菌生产1,3-丙二醇关键酶发酵条件研究 | 第37-50页 |
| ·材料和方法 | 第37-38页 |
| ·菌种 | 第37页 |
| ·主要仪器和设备 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37页 |
| ·培养方法 | 第37-38页 |
| ·无细胞抽提液的制备方法 | 第38页 |
| ·分析方法 | 第38页 |
| ·结果和讨论 | 第38-49页 |
| ·培养基组份的选择 | 第38-41页 |
| ·培养基优化 | 第41-44页 |
| ·发酵工艺条件对产酶的影响 | 第44-47页 |
| ·发酵过程的代谢曲线 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 本章小结 | 第49-50页 |
| 第四章 甘油脱氢酶和1,3-丙二醇氧化还原酶的纯化及性质研究 | 第50-69页 |
| ·材料和方法 | 第50-52页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第50-51页 |
| ·菌种 | 第51页 |
| ·培养基 | 第51页 |
| ·培养方法 | 第51页 |
| ·无细胞抽提液的制备方法 | 第51-52页 |
| ·酶活力测定 | 第52页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第52页 |
| ·电泳分析 | 第52页 |
| ·结果和讨论 | 第52-68页 |
| ·GDH和PDOR纯化策略的确定 | 第52-56页 |
| ·甘油脱氢酶的分离纯化 | 第56-58页 |
| ·甘油脱氢酶的酶学性质 | 第58-62页 |
| ·1,3-丙二醇氧化还原酶和甘油脱氢酶的分离纯化 | 第62-64页 |
| ·1,3-丙二醇氧化还原酶的酶学性质 | 第64-68页 |
| 本章小结 | 第68-69页 |
| 第五章 克雷伯杆菌利用甘油有氧发酵生产3-羟基丙醛的研究 | 第69-78页 |
| ·材料和方法 | 第69-71页 |
| ·菌种 | 第69-70页 |
| ·试剂和仪器 | 第70页 |
| ·培养基 | 第70页 |
| ·分析方法 | 第70-71页 |
| ·结果和讨论 | 第71-76页 |
| ·种子扩大培养时间对3-HPA发酵的影响 | 第71页 |
| ·接种量对3-HPA发酵的影响 | 第71-72页 |
| ·初始甘油浓度对3-HPA发酵的影响 | 第72页 |
| ·盐酸氨基脲的含量对3-HPA发酵的影响 | 第72-74页 |
| ·初始pH和温度对3-HPA发酵的影响 | 第74-75页 |
| ·3-HPA发酵过程的代谢曲线 | 第75-76页 |
| ·3-HPA稳定性的考察 | 第76页 |
| ·讨论 | 第76-77页 |
| 本章小结 | 第77-78页 |
| 第六章 高效液相色谱法同时测定甘油、3-羟基丙醛、二羟基丙酮和1,3-丙二醇 | 第78-83页 |
| ·材料和方法 | 第78-79页 |
| ·试剂和仪器 | 第78页 |
| ·色谱条件 | 第78-79页 |
| ·样品制备 | 第79页 |
| ·标准溶液配制 | 第79页 |
| ·定性与定量 | 第79页 |
| ·结果和讨论 | 第79-82页 |
| ·检测器的选择 | 第79页 |
| ·流动相的确定 | 第79页 |
| ·甘油、1,3-丙二醇、二羟基丙酮和3-羟基丙醛的色谱行为 | 第79-80页 |
| ·回归方程、相关系数及检出限 | 第80-81页 |
| ·精密度的考察 | 第81页 |
| ·回收率实验 | 第81-82页 |
| 本章小结 | 第82-83页 |
| 第七章甘油脱氢酶和1,3-丙二醇氧化还原酶反应机制和动力学 | 第83-99页 |
| ·材料和方法 | 第84页 |
| ·菌种 | 第84页 |
| ·培养基和培养方法 | 第84页 |
| ·无细胞抽提液的制备方法 | 第84页 |
| ·甘油脱氢酶和1,3-丙二醇氧化还原酶的分离纯化 | 第84页 |
| ·分批GDH、PDOR偶合酶催反应 | 第84页 |
| ·Gly、3-HPA、1,3-PD和DHA的含量测定 | 第84页 |
| ·结果与讨论 | 第84-97页 |
| ·GDH双底物酶促反应机制 | 第84-88页 |
| ·GDH双底物酶促反应速度方程及动力学常数求解 | 第88-90页 |
| ·PDOR双底物酶促反应机制 | 第90-93页 |
| ·PDOR 双底物酶促反应速度方程及动力学常数求解 | 第93-95页 |
| ·分批操作条件下GDH、PDOR偶合催化合成1,3-PD和DHA | 第95-97页 |
| 本章小结 | 第97-99页 |
| 第八章 克雷伯杆菌微胶囊化生产1,3-丙二醇的研究 | 第99-106页 |
| ·材料和方法 | 第99-101页 |
| ·菌种 | 第99页 |
| ·原料和试剂 | 第99页 |
| ·主要仪器与设备 | 第99页 |
| ·培养基 | 第99页 |
| ·培养方法 | 第99-100页 |
| ·微胶囊的制备和培养方法 | 第100页 |
| ·分析方法 | 第100-101页 |
| ·结果和讨论 | 第101-105页 |
| ·PDMDAAC对克雷伯杆菌生长的影响 | 第101页 |
| ·NaCS-PDMDAAC微胶囊的制备方法优化 | 第101-103页 |
| ·不同囊径微胶囊固定化多批次培养 | 第103-105页 |
| ·讨论 | 第105页 |
| 本章小结 | 第105-106页 |
| 第九章 无电荷超滤膜酶膜反应器中辅酶截留的研究 | 第106-115页 |
| ·材料和方法 | 第106-109页 |
| ·试剂 | 第106页 |
| ·主要仪器 | 第106-107页 |
| ·酶膜反应器装置 | 第107-108页 |
| ·辅酶含量测定、辅酶截留率和超滤流速的计算 | 第108-109页 |
| ·酶活力测定 | 第109页 |
| ·结果和讨论 | 第109-113页 |
| ·不同PEI/ NAD+比例、不同缓冲溶液对NAD+的截留率影响 | 第109页 |
| ·离子强度对辅酶截留率的影响 | 第109-110页 |
| ·超滤膜中NAD+与NADH截留率比较 | 第110-111页 |
| ·添加物牛血清白蛋白对辅酶截留率的影响 | 第111-112页 |
| ·温度对超滤流速的影响 | 第112页 |
| ·在不同离子强度下PEI对超滤流速的影响 | 第112-113页 |
| ·PEI对GDH和PDOR酶活力的影响 | 第113页 |
| 本章小结 | 第113-115页 |
| 第十章 结论 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-127页 |
| 作者在攻读博士学位期间发表论著与参加科研情况 | 第127-129页 |
| 致 谢 | 第129页 |
