摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-26页 |
1.1 细胞色素P450酶 | 第10-12页 |
1.1.1 细胞色素P450酶概述 | 第10-11页 |
1.1.2 细胞色素P450酶特征 | 第11页 |
1.1.3 P450酶催化的反应类型 | 第11-12页 |
1.2 细胞色素P450 BM-3酶 | 第12-15页 |
1.2.1 细胞色素P450 BM-3 | 第12页 |
1.2.2 细胞色素P450 BM-3的应用 | 第12-15页 |
1.2.2.1 P450 BM-3在医药工业中的应用 | 第12-13页 |
1.2.2.2 P450 BM-3在环境修复中的应用 | 第13-14页 |
1.2.2.3 P450 BM-3在化学工业中的应用 | 第14-15页 |
1.3 P450 BM-3酶活力测定 | 第15页 |
1.3.1 酶活力测定 | 第15页 |
1.3.2 P450 BM-3酶活测定研究进展 | 第15页 |
1.4 酶的固定化技术 | 第15-17页 |
1.4.1 酶的固定化技术概述 | 第15-16页 |
1.4.2 酶的固定化方法 | 第16-17页 |
1.5 细胞色素P450固定化的研究 | 第17-21页 |
1.5.1 吸附法固定化细胞色素P450的研究 | 第17-19页 |
1.5.2 共价结合法固定化细胞色素P450的研究 | 第19页 |
1.5.3 交联法固定化细胞色素P450的研究 | 第19-20页 |
1.5.4 包埋法固定化细胞色素P450的研究 | 第20-21页 |
1.6 生物微胶囊技术 | 第21-23页 |
1.6.1 生物微胶囊概述 | 第21-22页 |
1.6.2 常用的生物微胶囊体系 | 第22-23页 |
1.7 NaCS-PDMDAAC生物微胶囊 | 第23-24页 |
1.7.1 NaCS-PDMDAAC生物微胶囊概述 | 第23-24页 |
1.7.2 NaCS-PDMDAAC生物微胶囊的特点 | 第24页 |
1.8 本文的研究思路 | 第24-26页 |
第二章 10-对硝基苯氧基癸酸的合成及应用 | 第26-35页 |
2.1 前言 | 第26页 |
2.2 材料与方法 | 第26-29页 |
2.2.1 材料 | 第26-27页 |
2.2.2 实验方法 | 第27-28页 |
2.2.2.1 合成工艺路线 | 第27-28页 |
2.2.2.2 实验步骤 | 第28页 |
2.2.3 分析方法 | 第28-29页 |
2.2.3.1 波长扫描 | 第28页 |
2.2.3.2 核磁共振分析 | 第28-29页 |
2.3 在P450 BM-3活性测定中的应用 | 第29页 |
2.4 结果与讨论 | 第29-34页 |
2.4.1 10-溴代癸酸甲酯的合成 | 第29页 |
2.4.2 10-对硝基苯氧基癸酸甲酯的合成 | 第29-30页 |
2.4.3 10-对硝基苯氧基癸酸的合成 | 第30-33页 |
2.4.4 在P450 BM-3活性测定中的应用 | 第33-34页 |
2.5 小结 | 第34-35页 |
第三章 P450 BM-3粗酶的制备 | 第35-43页 |
3.1 前言 | 第35页 |
3.2 材料和方法 | 第35-41页 |
3.2.1 材料 | 第35-36页 |
3.2.2 实验方法 | 第36-41页 |
3.2.2.1 分析方法 | 第36-39页 |
3.2.2.2 感受态细胞的制备和质粒转化 | 第39-40页 |
3.2.2.3 菌种保存 | 第40页 |
3.2.2.4 发酵培养 | 第40页 |
3.2.2.5 P450 BM-3粗酶的制备 | 第40-41页 |
3.3 结果与讨论 | 第41-42页 |
3.3.1 发酵培养 | 第41页 |
3.3.2 P450 BM-3粗酶制备 | 第41-42页 |
3.4 小结 | 第42-43页 |
第四章 NaCS-PDMDAAC微胶囊的制备和性质研究 | 第43-55页 |
4.1 前言 | 第43页 |
4.2 材料和方法 | 第43-48页 |
4.2.1 试剂和设备 | 第43页 |
4.2.2 实验方法 | 第43-48页 |
4.2.2.1 NaCS-PDMDAAC微胶囊的制备 | 第43-45页 |
4.2.2.2 微胶囊性能的分析方法 | 第45页 |
4.2.2.3 微胶囊的扩散性能测定方法 | 第45-48页 |
4.3 结果和讨论 | 第48-53页 |
4.3.1 NaCS-PDMDAAC微胶囊的制备过程及其结构 | 第48-49页 |
4.3.1.1 制备过程的微胶囊形态变化 | 第48页 |
4.3.1.2 NaCS-PDMDAAC微胶囊的外观 | 第48-49页 |
4.3.2 微胶囊制备条件的初步研究 | 第49-50页 |
4.3.2.1 PDMDAAC分子量对微胶囊性质的影响 | 第49-50页 |
4.3.2.2 成胶囊时间对微胶囊性质的影响 | 第50页 |
4.3.3 NaCS-PDMDAAC微胶囊的传质性能 | 第50-53页 |
4.3.3.1 辅酶NADH在NaCS-PDMDAAC微胶囊中的扩散 | 第51页 |
4.3.3.2 底物10-pNCA在NaCS-PDMDAAC微胶囊中的扩散 | 第51-52页 |
4.3.3.3 BSA在NaCS-PDMDAAC微胶囊中的扩散 | 第52-53页 |
4.3.4 NaCS-PDMDAAC微胶囊与P450 BM-3的生物相容性 | 第53页 |
4.4 小结 | 第53-55页 |
第五章 NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化P450 BM-3的研究 | 第55-70页 |
5.1 前言 | 第55页 |
5.2 材料和方法 | 第55-58页 |
5.2.1 试剂和设备 | 第55-56页 |
5.2.2 实验方法 | 第56-58页 |
5.2.2.1 固定化酶的生物微胶囊的制备 | 第56页 |
5.2.2.2 固定化酶酶活的测定方法 | 第56-57页 |
5.2.2.3 固定化酶蛋白含量的测定 | 第57页 |
5.2.2.4 微胶囊固定化条件的研究方法 | 第57-58页 |
5.2.2.5 固定化酶性质的测定方法 | 第58页 |
5.3 结果与讨论 | 第58-69页 |
5.3.1 固定化P450 BM-3最佳条件的确定 | 第58-64页 |
5.3.1.1 NaCS浓度对固定化酶活性的影响 | 第58-59页 |
5.3.1.2 加酶量对固定化酶活性的影响 | 第59-60页 |
5.3.1.3 pH对固定化酶活性的影响 | 第60页 |
5.3.1.4 离子强度对固定化酶活性的影响 | 第60-61页 |
5.3.1.5 PDMDAAC分子量对固定化酶活性的影响 | 第61-62页 |
5.3.1.6 成胶囊时间对固定化酶活性的影响 | 第62页 |
5.3.1.7 保护剂加入对固定化酶活性的影响 | 第62-63页 |
5.3.1.8 扩散阻力对固定化酶活性的影响 | 第63-64页 |
5.3.2 固定化P450 BM-3酶的性质 | 第64-69页 |
5.3.2.1 P450 BM-3游离酶与固定化酶的最适温度 | 第64页 |
5.3.2.2 P450 BM-3游离酶与固定化酶的最适pH值 | 第64-65页 |
5.3.2.3 固定化酶对有机溶剂的耐性 | 第65-66页 |
5.3.2.4 固定化酶的热稳定性 | 第66页 |
5.3.2.5 固定化酶的pH稳定性 | 第66-68页 |
5.3.2.6 固定化酶的贮存稳定性 | 第68-69页 |
5.4 小结 | 第69-70页 |
第六章 结论与建议 | 第70-72页 |
6.1 结论 | 第70-71页 |
6.2 建议 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第79页 |