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微胶囊固定化细胞色素P450 BM-3的研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
第一章 文献综述第10-26页
 1.1 细胞色素P450酶第10-12页
  1.1.1 细胞色素P450酶概述第10-11页
  1.1.2 细胞色素P450酶特征第11页
  1.1.3 P450酶催化的反应类型第11-12页
 1.2 细胞色素P450 BM-3酶第12-15页
  1.2.1 细胞色素P450 BM-3第12页
  1.2.2 细胞色素P450 BM-3的应用第12-15页
   1.2.2.1 P450 BM-3在医药工业中的应用第12-13页
   1.2.2.2 P450 BM-3在环境修复中的应用第13-14页
   1.2.2.3 P450 BM-3在化学工业中的应用第14-15页
 1.3 P450 BM-3酶活力测定第15页
  1.3.1 酶活力测定第15页
  1.3.2 P450 BM-3酶活测定研究进展第15页
 1.4 酶的固定化技术第15-17页
  1.4.1 酶的固定化技术概述第15-16页
  1.4.2 酶的固定化方法第16-17页
 1.5 细胞色素P450固定化的研究第17-21页
  1.5.1 吸附法固定化细胞色素P450的研究第17-19页
  1.5.2 共价结合法固定化细胞色素P450的研究第19页
  1.5.3 交联法固定化细胞色素P450的研究第19-20页
  1.5.4 包埋法固定化细胞色素P450的研究第20-21页
 1.6 生物微胶囊技术第21-23页
  1.6.1 生物微胶囊概述第21-22页
  1.6.2 常用的生物微胶囊体系第22-23页
 1.7 NaCS-PDMDAAC生物微胶囊第23-24页
  1.7.1 NaCS-PDMDAAC生物微胶囊概述第23-24页
  1.7.2 NaCS-PDMDAAC生物微胶囊的特点第24页
 1.8 本文的研究思路第24-26页
第二章 10-对硝基苯氧基癸酸的合成及应用第26-35页
 2.1 前言第26页
 2.2 材料与方法第26-29页
  2.2.1 材料第26-27页
  2.2.2 实验方法第27-28页
   2.2.2.1 合成工艺路线第27-28页
   2.2.2.2 实验步骤第28页
  2.2.3 分析方法第28-29页
   2.2.3.1 波长扫描第28页
   2.2.3.2 核磁共振分析第28-29页
 2.3 在P450 BM-3活性测定中的应用第29页
 2.4 结果与讨论第29-34页
  2.4.1 10-溴代癸酸甲酯的合成第29页
  2.4.2 10-对硝基苯氧基癸酸甲酯的合成第29-30页
  2.4.3 10-对硝基苯氧基癸酸的合成第30-33页
  2.4.4 在P450 BM-3活性测定中的应用第33-34页
 2.5 小结第34-35页
第三章 P450 BM-3粗酶的制备第35-43页
 3.1 前言第35页
 3.2 材料和方法第35-41页
  3.2.1 材料第35-36页
  3.2.2 实验方法第36-41页
   3.2.2.1 分析方法第36-39页
   3.2.2.2 感受态细胞的制备和质粒转化第39-40页
   3.2.2.3 菌种保存第40页
   3.2.2.4 发酵培养第40页
   3.2.2.5 P450 BM-3粗酶的制备第40-41页
 3.3 结果与讨论第41-42页
  3.3.1 发酵培养第41页
  3.3.2 P450 BM-3粗酶制备第41-42页
 3.4 小结第42-43页
第四章 NaCS-PDMDAAC微胶囊的制备和性质研究第43-55页
 4.1 前言第43页
 4.2 材料和方法第43-48页
  4.2.1 试剂和设备第43页
  4.2.2 实验方法第43-48页
   4.2.2.1 NaCS-PDMDAAC微胶囊的制备第43-45页
   4.2.2.2 微胶囊性能的分析方法第45页
   4.2.2.3 微胶囊的扩散性能测定方法第45-48页
 4.3 结果和讨论第48-53页
  4.3.1 NaCS-PDMDAAC微胶囊的制备过程及其结构第48-49页
   4.3.1.1 制备过程的微胶囊形态变化第48页
   4.3.1.2 NaCS-PDMDAAC微胶囊的外观第48-49页
  4.3.2 微胶囊制备条件的初步研究第49-50页
   4.3.2.1 PDMDAAC分子量对微胶囊性质的影响第49-50页
   4.3.2.2 成胶囊时间对微胶囊性质的影响第50页
  4.3.3 NaCS-PDMDAAC微胶囊的传质性能第50-53页
   4.3.3.1 辅酶NADH在NaCS-PDMDAAC微胶囊中的扩散第51页
   4.3.3.2 底物10-pNCA在NaCS-PDMDAAC微胶囊中的扩散第51-52页
   4.3.3.3 BSA在NaCS-PDMDAAC微胶囊中的扩散第52-53页
  4.3.4 NaCS-PDMDAAC微胶囊与P450 BM-3的生物相容性第53页
 4.4 小结第53-55页
第五章 NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化P450 BM-3的研究第55-70页
 5.1 前言第55页
 5.2 材料和方法第55-58页
  5.2.1 试剂和设备第55-56页
  5.2.2 实验方法第56-58页
   5.2.2.1 固定化酶的生物微胶囊的制备第56页
   5.2.2.2 固定化酶酶活的测定方法第56-57页
   5.2.2.3 固定化酶蛋白含量的测定第57页
   5.2.2.4 微胶囊固定化条件的研究方法第57-58页
   5.2.2.5 固定化酶性质的测定方法第58页
 5.3 结果与讨论第58-69页
  5.3.1 固定化P450 BM-3最佳条件的确定第58-64页
   5.3.1.1 NaCS浓度对固定化酶活性的影响第58-59页
   5.3.1.2 加酶量对固定化酶活性的影响第59-60页
   5.3.1.3 pH对固定化酶活性的影响第60页
   5.3.1.4 离子强度对固定化酶活性的影响第60-61页
   5.3.1.5 PDMDAAC分子量对固定化酶活性的影响第61-62页
   5.3.1.6 成胶囊时间对固定化酶活性的影响第62页
   5.3.1.7 保护剂加入对固定化酶活性的影响第62-63页
   5.3.1.8 扩散阻力对固定化酶活性的影响第63-64页
  5.3.2 固定化P450 BM-3酶的性质第64-69页
   5.3.2.1 P450 BM-3游离酶与固定化酶的最适温度第64页
   5.3.2.2 P450 BM-3游离酶与固定化酶的最适pH值第64-65页
   5.3.2.3 固定化酶对有机溶剂的耐性第65-66页
   5.3.2.4 固定化酶的热稳定性第66页
   5.3.2.5 固定化酶的pH稳定性第66-68页
   5.3.2.6 固定化酶的贮存稳定性第68-69页
 5.4 小结第69-70页
第六章 结论与建议第70-72页
 6.1 结论第70-71页
 6.2 建议第71-72页
参考文献第72-78页
致谢第78-79页
攻读硕士学位期间发表论文情况第79页

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