| 第一部分 NDV HN基因核酸疫苗的大量制备研究 | 第1-35页 |
| 第一章 引言?? | 第12-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-23页 |
| ·质粒和菌种 | 第14页 |
| ·试剂 | 第14页 |
| ·自配溶液?? | 第14-16页 |
| ·主要实验仪器 | 第16-17页 |
| ·工程菌的转化 | 第17-19页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第17-18页 |
| ·转化 | 第18页 |
| ·转化细菌的鉴定 | 第18-19页 |
| ·工程菌培养时间的选择 | 第19页 |
| ·工程菌的收集与裂解 | 第19-20页 |
| ·核酸沉淀方法的选择 | 第20页 |
| ·核酸疫苗(重组质粒DNA)的纯化 | 第20-23页 |
| ·LiCl和PEG联合纯化法 | 第20-21页 |
| ·Q-Sepharose FF阴离子交换色谱法 | 第21页 |
| ·DEAE-纤维素阴离子交换色谱法 | 第21-22页 |
| ·羟基磷灰石(HA)柱层析法 | 第22页 |
| ·核酸疫苗纯化方法的选择 | 第22-23页 |
| 第三章 结果与分析 | 第23-32页 |
| ·转化细菌的鉴定 | 第23-24页 |
| ·抽提质粒DNA鉴定 | 第23页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第23-24页 |
| ·质粒DNA提取与纯化 | 第24-32页 |
| ·细菌培养时间的选择 | 第24-25页 |
| ·细菌裂解方法的比较 | 第25页 |
| ·核酸沉淀剂的选择 | 第25-26页 |
| ·LiCl与聚乙二醇(PEG)联合纯化质粒DNA | 第26-27页 |
| ·Q-Sepharose FF阴离子交换色谱法纯化结果 | 第27-29页 |
| ·DEAE-纤维素层析法纯化结果 | 第29-30页 |
| ·HA柱层析法纯化结果 | 第30-31页 |
| ·核酸疫苗纯化方法的比较 | 第31-32页 |
| 第四章 讨论 | 第32-34页 |
| ·关于细菌培养 | 第32页 |
| ·关于细菌的裂解 | 第32页 |
| ·关于DEAE-纤维素与Q-Sepharose FF在核酸疫苗纯化上的应用 | 第32-33页 |
| ·关于HA柱层析纯化质粒DNA | 第33-34页 |
| 第五章 结论 | 第34-35页 |
| 第二部分NDV HN基因核酸疫苗的免疫效果研究 | 第35-57页 |
| 第一章 引言 | 第35-37页 |
| 第二章 材料与方法 | 第37-46页 |
| ·实验动物 | 第37页 |
| ·核酸疫苗与菌株 | 第37页 |
| ·试剂的配制 | 第37-39页 |
| ·主要实验仪器 | 第39页 |
| ·核酸疫苗的制备 | 第39-41页 |
| ·细菌的转化 | 第39页 |
| ·重组细菌的培养与收集 | 第39页 |
| ·转化菌的裂解 | 第39页 |
| ·重组质粒DNA的纯化与鉴定 | 第39-40页 |
| ·减毒沙门氏菌的转化 | 第40-41页 |
| ·核酸疫苗在Balb/C小鼠体内的表达检测 | 第41-43页 |
| ·免疫用核酸疫苗的酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·Balb/C小鼠的免疫 | 第42页 |
| ·体液免疫检测 | 第42-43页 |
| ·核酸疫苗在SPF鸡体内表达检测 | 第43-46页 |
| ·SPF鸡分组与免疫接种 | 第43-44页 |
| ·采血与分离血清 | 第44页 |
| ·ELISA检测免疫鸡血清中IgG抗体 | 第44-45页 |
| ·血凝抑制(HI)试验 | 第45-46页 |
| 第三章 结果与分析 | 第46-51页 |
| ·免疫用核酸疫苗的鉴定结果 | 第46页 |
| ·转化核酸疫苗的重组沙门氏菌的PCR鉴定结果 | 第46-47页 |
| ·小鼠体内检测试验结果 | 第47-48页 |
| ·NDV纯化结果 | 第47页 |
| ·ELISA条件的确定 | 第47-48页 |
| ·SPF鸡的体内表达检测 | 第48-51页 |
| ·ELISA试验条件的确定 | 第48-49页 |
| ·ELISA检测血清样品结果 | 第49-50页 |
| ·HI试验结果 | 第50-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-56页 |
| ·增强核酸疫苗免疫效果的策略 | 第51-55页 |
| ·关于ELISA检测方法的讨论 | 第55页 |
| ·关于利用减毒沙门氏菌在核酸疫苗中的应用 | 第55-56页 |
| 第五章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |