| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-25页 |
| ·昆虫热激蛋白的研究进展 | 第8-15页 |
| ·热激蛋白的概念 | 第8页 |
| ·热激蛋白的类型 | 第8-9页 |
| ·热激蛋白以及热激蛋白反应的特性 | 第9-10页 |
| ·热激蛋白的高度保守性 | 第9页 |
| ·热激反应的短时性 | 第9-10页 |
| ·热激蛋白的多样性 | 第10页 |
| ·热激蛋白70 | 第10-15页 |
| ·热激蛋白70家族 | 第10-11页 |
| ·热激蛋白70家族的功能 | 第11-14页 |
| ·热激蛋白70与昆虫抗热性的关系 | 第14-15页 |
| ·热激蛋白70基因表达的调控 | 第15-18页 |
| ·热激蛋白基因的表达 | 第15-16页 |
| ·热激蛋白70基因表达的调控 | 第16-18页 |
| ·定量PCR | 第18-25页 |
| ·定量PCR的概念 | 第19页 |
| ·定量PCR的类型 | 第19-22页 |
| ·竞争性PCR定量 | 第22-25页 |
| ·竞争性PCR定量的原理 | 第23页 |
| ·竞争性PCR竞争对照模板构建的原理 | 第23-24页 |
| ·竞争性PCR竞争对照模板构建的原则 | 第24-25页 |
| 2 引言 | 第25-27页 |
| 3 材料与方法 | 第27-37页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·供试昆虫 | 第27页 |
| ·引物 | 第27页 |
| ·主要试剂及工具酶 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-37页 |
| ·竞争性 PCR 内部竞争物的制备以及目标产物的检测 | 第27-35页 |
| ·供试昆虫的处理 | 第27-28页 |
| ·总RNA的提取 | 第28页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第28-29页 |
| ·RT-PCR | 第29-30页 |
| ·PCR产物纯化 | 第30-31页 |
| ·制备内部竞争物的 PCR 扩增及其纯化 | 第31页 |
| ·质粒的连接 | 第31-32页 |
| ·感受态细胞的制备和质粒的转化 | 第32-33页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第33页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第33-34页 |
| ·连接质粒的酶切鉴定 | 第34-35页 |
| ·序列测定和分析 | 第35页 |
| ·系列稀释的内部竞争物的制备 | 第35页 |
| ·竞争性PCR以及竞争性PCR标准曲线的绘制 | 第35-37页 |
| ·竞争性PCR | 第35页 |
| ·竞争性 PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第35页 |
| ·竞争性PCR标准曲线的绘制 | 第35-37页 |
| 4 结果与分析 | 第37-44页 |
| ·合适退火温度下PCR产物的检测 | 第37页 |
| ·酶切产物的检测 | 第37-38页 |
| ·热激蛋白基因的序列分析 | 第38-40页 |
| ·竞争性PCR竞争物的制备 | 第40-41页 |
| ·竞争性对照模板胶回收产物的PCR检测 | 第41页 |
| ·竞争性PCR内部竞争物的酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·竞争性PCR检测热激蛋白基因的量 | 第42-43页 |
| ·竞争性PCR的标准曲线 | 第43-44页 |
| 5 结论与讨论 | 第44-47页 |
| ·结论 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-47页 |
| ·试验影响因素讨论 | 第44-45页 |
| ·试验研究展望 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-57页 |
| 英文摘要 | 第57-58页 |