| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-40页 |
| 1 植物逆境与抗逆反应 | 第11-34页 |
| ·植物逆境及逆境种类 | 第11-16页 |
| ·温度胁迫 | 第11-12页 |
| ·高温胁迫 | 第12页 |
| ·低温胁迫 | 第12页 |
| ·水分胁迫 | 第12-13页 |
| ·干旱胁迫 | 第12-13页 |
| ·淹涝胁迫 | 第13页 |
| ·盐胁迫 | 第13页 |
| ·氧化胁迫 | 第13-16页 |
| ·氧化胁迫来源 | 第13-14页 |
| ·活性氧的生物学效应 | 第14-15页 |
| ·植物抗氧化系统 | 第15页 |
| ·非酶抗氧化剂 | 第15页 |
| ·抗氧化酶类 | 第15页 |
| ·植物活性氧代谢与抗逆性 | 第15-16页 |
| ·植物抗逆反应信号传导途径 | 第16-24页 |
| ·植物基因表达调控 | 第17-18页 |
| ·植物转录因子与基因表达调控 | 第17-18页 |
| ·分子开关 | 第18页 |
| ·植物逆境信号分子 | 第18-24页 |
| ·水杨酸 | 第19页 |
| ·茉莉酸类物质 | 第19-20页 |
| ·激素作为信号物质 | 第20-24页 |
| ·逆境下ABA调节的基因表达 | 第20-22页 |
| ·乙烯与植物逆境 | 第22-24页 |
| ·植物逆境胁迫相关基因的克隆及功能研究 | 第24-28页 |
| ·植物基因分离方法 | 第24-28页 |
| ·基于胁迫前后mRNA的表达差异 | 第24-26页 |
| ·基于基因图谱和基因序列的基因分离方法 | 第26页 |
| ·基于基因产物的基因分离方法 | 第26-27页 |
| ·基因组学／蛋白组学／生物信息学方法 | 第27-28页 |
| ·基因工程技术在提高植物抗逆性中的应用 | 第28-34页 |
| ·植物转基因方法简介 | 第28-31页 |
| ·农杆菌介导的植物转化 | 第29页 |
| ·DNA直接转化 | 第29-30页 |
| ·基因枪法 | 第29页 |
| ·化学药剂诱导法 | 第29-30页 |
| ·电穿孔法(electroporation) | 第30页 |
| ·显微注射法(microinjection) | 第30页 |
| ·低能离子束法(Ionimplantation) | 第30页 |
| ·脂质体介导转化 | 第30-31页 |
| ·病毒载体转化 | 第31页 |
| ·转基因技术在植物抗逆研究中的应用 | 第31-34页 |
| ·转基因植物抗逆性研究展望 | 第34页 |
| 2 谷胱甘肽硫转移酶GSTs(Glutathione S-transferases GSTs)及其gst基因概述 | 第34-38页 |
| ·GSTs在细胞中的功能 | 第35-36页 |
| ·通过GSH的偶联解毒 | 第35页 |
| ·标签作用 | 第35-36页 |
| ·保护细胞免受氧化性损伤 | 第36页 |
| ·连接作用(非酶性结合和细胞内运输) | 第36页 |
| ·GST的进化 | 第36-37页 |
| ·植物GST基因的分类 | 第37-38页 |
| ·TYPE Ⅰ | 第37页 |
| ·TYPE Ⅱ | 第37页 |
| ·TYPE Ⅲ | 第37-38页 |
| ·未分类的gst基因 | 第38页 |
| ·GST基因的表达调控 | 第38页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第38-40页 |
| 第二章 烟草中受乙烯利调控基因的克隆及其在多种植物逆境中的表达模式研究 | 第40-58页 |
| ·材料和方法 | 第41-48页 |
| ·材料的种植及处理 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-48页 |
| ·样品总RNA的提取 | 第41-42页 |
| ·mRNA的反转录 | 第42页 |
| ·差别条带的分离和回收 | 第42-45页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第42-43页 |
| ·银染 | 第43-44页 |
| ·差异片段回收 | 第44页 |
| ·从琼脂糖中回收DNA | 第44-45页 |
| ·差别基因的测序分析 | 第45页 |
| ·将差异片段克隆进T载体 | 第45页 |
| ·测序 | 第45页 |
| ·点杂交 | 第45-46页 |
| ·探针标记 | 第45页 |
| ·Southern杂交 | 第45-46页 |
| ·反转录PCR | 第46页 |
| ·快速获得cDNA末端(Rapid Amplification of cDNA Ends, RACE) | 第46-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-54页 |
| ·乙烯利调控基因的分离 | 第48页 |
| ·差异片段的点杂交验证 | 第48-49页 |
| ·差异片段序列分析 | 第49-52页 |
| ·受乙烯利诱导表达的基因片段在各种逆境胁迫中的表达模式分析 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54-58页 |
| 第三章 水稻中受氧化胁迫调控基因的克隆及其表达模式的研究 | 第58-68页 |
| ·材料和方法 | 第59-61页 |
| ·材料的种植及处理 | 第59页 |
| ·方法 | 第59-61页 |
| ·差别条带的Northern杂交分析 | 第59-61页 |
| ·含甲醛的琼脂糖凝胶电泳 | 第60页 |
| ·转膜 | 第60-61页 |
| ·Northern杂交 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-64页 |
| ·受氧化胁迫调节表达cDNA片段的分离 | 第61-62页 |
| ·差异表达序列的序列分析及表达模式研究 | 第62-64页 |
| ·讨论 | 第64-68页 |
| 第四章 谷胱甘肽S转移酶基因转化烟草的研究 | 第68-89页 |
| ·材料和方法 | 第69-79页 |
| ·材料 | 第69页 |
| ·方法 | 第69-79页 |
| ·碱裂解法小量制备质粒 | 第69-70页 |
| ·细菌的收获 | 第69页 |
| ·制备质粒 | 第69-70页 |
| ·电激法将质粒转化农杆菌 | 第70-71页 |
| ·农杆菌介导目的基因转化烟草:叶盘法转化 | 第71页 |
| ·烟草基因组DNA的提取 | 第71-73页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第73页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第73-74页 |
| ·gst-cr1在原核细菌中的表达 | 第74-75页 |
| ·植物粗酶提取 | 第75页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第75-76页 |
| ·酶活测定 | 第76-77页 |
| ·GST活力测定 | 第76页 |
| ·GPX活力测定 | 第76页 |
| ·SOD活力测定 | 第76页 |
| ·APX活力测定 | 第76-77页 |
| ·POD活力测定 | 第77页 |
| ·CAT活力测定 | 第77页 |
| ·Southern杂交验证 | 第77-78页 |
| ·烟草总DNA限制性酶切 | 第77页 |
| ·将DNA从琼脂糖凝胶转移到固相支持体上 | 第77-78页 |
| ·Northern杂交分析 | 第78页 |
| ·叶盘离子渗漏率测定 | 第78-79页 |
| ·结果与分析 | 第79-86页 |
| ·转化质粒酶切检测 | 第79-80页 |
| ·gst-cr1在大肠杆菌中的表达 | 第80页 |
| ·GST基因转化烟草 | 第80-82页 |
| ·外源基因gst-cr1在烟草中的表达 | 第82-83页 |
| ·转基因烟草抗氧化胁迫能力检测 | 第83-84页 |
| ·转基因及对照烟草在MV处理过程中各种抗氧化酶活力检测 | 第84-86页 |
| ·讨论 | 第86-89页 |
| 参考文献 | 第89-116页 |
| 附录Ⅰ | 第116-121页 |
| 附录Ⅱ | 第121-132页 |
| 在读期间发表和待发表的研究论文 | 第132-133页 |
| 致谢 | 第133页 |
