| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-7页 |
| 前言 | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-22页 |
| 1．1 白菜类作物转基因技术研究进展 | 第9-16页 |
| 1．1．1 农杆菌介导的转基因方法简介 | 第9-16页 |
| 1．1．1．1 依赖于组织或细胞培养的转化技术——叶盘法 | 第10-12页 |
| 1．1．1．2 不依赖组织或细胞培养的转化技术——原位渗入转化技术 | 第12-16页 |
| 1．2 植物抗虫基因研究进展 | 第16-22页 |
| 1．2．1 微生物来源的抗虫基因 | 第17页 |
| 1．2．2 植物来源的抗虫基因 | 第17-20页 |
| 1．2．2．1 蛋白酶抑制剂基因（Proteinase inhibitor, Pin） | 第17-19页 |
| 1．2．2．2 淀粉酶抑制剂基因 | 第19页 |
| 1．2．2．3 外源凝集素基因 | 第19-20页 |
| 1．2．2．4 来自植物的其它抗虫基因 | 第20页 |
| 1．2．3 动物来源的抗虫基因 | 第20-21页 |
| 1．2．4 植物抗虫基因工程存在的问题及其对策 | 第21-22页 |
| 第二章 抗虫基因载体的构建 | 第22-31页 |
| 2．1 材料 | 第22页 |
| 2．1．1 菌株和质粒 | 第22页 |
| 2．1．2 培养基 | 第22页 |
| 2．1．3 酶和试剂 | 第22页 |
| 2．2 双价抗虫载体pBBBast-PinⅡ-SIP的构建 | 第22-27页 |
| 2．2．1 pBBBast-PinⅡ和pBPC-VH_3的质粒图 | 第23页 |
| 2．2．2 pBBBast-PinⅡ、pBPC-VH_3质粒的提取及酶切 | 第23-24页 |
| 2．2．3 酶切末端的部分补平 | 第24页 |
| 2．2．4 所需片段的电泳回收 | 第24-25页 |
| 2．2．5 载体的连接、转化 | 第25页 |
| 2．2．6 载体pBBBast-PinⅡ-SIP的鉴定 | 第25-27页 |
| 2．2．6．1 XbaⅠ酶切鉴定 | 第25-26页 |
| 2．2．6．2 XbaⅠ、SphⅠ双酶切鉴定 | 第26-27页 |
| 2．3 单价抗虫载体pBBBast-SIP的构建 | 第27-31页 |
| 2．3．1 pBBBast、pBPC-VH_3的质粒图 | 第27-28页 |
| 2．3．2 pBBBast-SIP的构建 | 第28页 |
| 2．3．3 载体pBBBast-SIP的鉴定 | 第28-31页 |
| 2．3．3．1 EcoRⅠ、SacⅠ双酶切鉴定 | 第29页 |
| 2．3．3．2 PCR扩增SIP基因 | 第29-31页 |
| 第三章 49菜心的转化及抗性株的获得 | 第31-44页 |
| 3．1 材料和方法 | 第31-32页 |
| 3．1．1 植物材料 | 第31-32页 |
| 3．1．2 农杆菌 | 第32页 |
| 3．1．3 仪器和试剂 | 第32页 |
| 3．2 49菜心的真空转化 | 第32页 |
| 3．3 处理植株的栽培管理 | 第32-33页 |
| 3．4 花序浸渍法转化49菜心 | 第33页 |
| 3．5 转化株的筛选 | 第33页 |
| 3．6 抗性株的鉴定 | 第33-35页 |
| 3．6．1 氯酚红鉴定 | 第33页 |
| 3．6．2 抗性株基因组DNA的提取 | 第33-34页 |
| 3．6．3 PCR鉴定 | 第34页 |
| 3．6．3．1 bar基因的PCR扩增 | 第34页 |
| 3．6．3．2 SIP基因PCR | 第34页 |
| 3．6．4 PCR-Southern杂交 | 第34-35页 |
| 3．7 结果和分析 | 第35-43页 |
| 3．7．1 转化处理及Basta抗性株筛选情况 | 第35-36页 |
| 3．7．2 影响转化率的几个因素 | 第36-39页 |
| 3．7．2．1 植株生长阶段对转化率的影响 | 第36-37页 |
| 3．7．2．2 真空渗入时间对转化率的影响 | 第37-38页 |
| 3．7．2．3 菌株对转化率的影响 | 第38-39页 |
| 3．7．3 关于抗性株后代的遗传分析 | 第39-40页 |
| 3．7．4 氯酚红鉴定 | 第40页 |
| 3．7．5 PCR及PCR-Southern杂交 | 第40-43页 |
| 3．8 讨论 | 第43-44页 |
| 第四章 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 附录 | 第49-56页 |
| 附录1 LB培养基的配制 | 第49页 |
| 附录2 碱裂解法提取质粒 | 第49-51页 |
| 附录3 玻璃奶法回收DNA | 第51-52页 |
| 附录4 大肠杆菌JM109转化方法 | 第52页 |
| 附录5 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第52-53页 |
| 附录6 植物基因组DNA的提取 | 第53-54页 |
| 附录7 Southern杂交探针的制备及杂交步骤 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
