黄单胞菌α-淀粉酶基因的克隆、测序及其进化研究
| 摘要 | 第1-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-26页 |
| ·基因克隆方法 | 第9-17页 |
| ·构建基因文库 | 第9-10页 |
| ·聚合酶链式反应 | 第10-15页 |
| ·差异表达基因的克隆 | 第15-16页 |
| ·DNA改组技术 | 第16-17页 |
| ·其他克隆方法 | 第17页 |
| ·重组子的筛选 | 第17-18页 |
| ·核苷酸测序 | 第18页 |
| ·α-淀粉酶研究概况 | 第18-22页 |
| ·α-淀粉酶作用机理 | 第19页 |
| ·α-淀粉酶性质 | 第19-20页 |
| ·生产α-淀粉酶的主要微生物类群 | 第20页 |
| ·α-淀粉酶基因结构特点 | 第20-21页 |
| ·α-淀粉酶基因体外诱变 | 第21页 |
| ·α-淀粉酶应用前景 | 第21-22页 |
| ·基因分子进化 | 第22-26页 |
| ·基因分子进化 | 第22页 |
| ·基因分子进化的研究方法 | 第22-26页 |
| 2 引言 | 第26-27页 |
| 3 材料与方法 | 第27-37页 |
| ·试验材料 | 第27-31页 |
| ·菌株 | 第27页 |
| ·质粒载体 | 第27-30页 |
| ·PCR引物 | 第30页 |
| ·酶与DNA标准分子量 | 第30页 |
| ·其他分子生物学试剂和生化试剂 | 第30-31页 |
| ·试验仪器 | 第31页 |
| ·试验方法 | 第31-37页 |
| ·培养基配制 | 第31-32页 |
| ·溶液配制 | 第32页 |
| ·菌种的活化与保藏 | 第32页 |
| ·基因组DNA的提取、纯化与保存 | 第32页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第32页 |
| ·质粒的制备 | 第32页 |
| ·PCR体系的构建 | 第32-34页 |
| ·酶切、酶连与转化 | 第34页 |
| ·重组子的筛选与验证 | 第34-36页 |
| ·DNA序列测定 | 第36页 |
| ·基因序列同源性分析 | 第36页 |
| ·基因分子进化分析 | 第36-37页 |
| 4 结果与分析 | 第37-56页 |
| ·目的DNA的制备 | 第37-38页 |
| ·基因组DNA的抽提 | 第37页 |
| ·目的DNA的PCR扩增 | 第37-38页 |
| ·目的DNA的酶切与回收 | 第38页 |
| ·质粒DNA的制备 | 第38-39页 |
| ·质粒DNA的扩增与抽提 | 第38-39页 |
| ·质粒DNA的酶切与回收 | 第39页 |
| ·酶连、转化与重组子的蓝白斑筛选 | 第39-40页 |
| ·质粒DNA与目的DNA的酶连与转化 | 第39-40页 |
| ·重组子的蓝白斑筛选 | 第40页 |
| ·重组子的鉴定 | 第40-45页 |
| ·重组子的酶切鉴定 | 第40页 |
| ·重组子的PCR鉴定 | 第40-45页 |
| ·重组子的功能鉴定 | 第45页 |
| ·测序结果 | 第45-46页 |
| ·基因号申请 | 第46页 |
| ·基因序列的同源性分析及进化树的构建 | 第46-56页 |
| ·基因序列的同源性分析 | 第46-53页 |
| ·基因进化树的构建 | 第53-55页 |
| ·添加其他α-淀粉酶基因后的进化分析 | 第55-56页 |
| 5 结论与讨论 | 第56-63页 |
| ·引物与基因序列比对分析 | 第56-60页 |
| ·引物与基因序列配对几率分析 | 第60-62页 |
| ·基因进化分析 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-76页 |
| 英文摘要 | 第76-77页 |
