中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
1 文献综述 | 第13-36页 |
·乙烯的生理作用 | 第13-19页 |
·乙烯和根毛 | 第14-15页 |
·乙烯和顶钩 | 第15-16页 |
·细胞壁代谢和果实软化 | 第16-17页 |
·光信号传导与类胡罗卜素积累 | 第17-18页 |
·乙烯的生物合成 | 第18-19页 |
·拟南芥乙烯信号传导系统的感受和传导 | 第19-29页 |
·拟南芥乙烯反应突变体 | 第19-21页 |
·拟南芥乙烯受体家族 | 第21-25页 |
·拟南芥乙烯受体的功能 | 第25-26页 |
·信号向细胞核的传递 | 第26-27页 |
·拟南芥中的乙烯信号感受与转导模型 | 第27-29页 |
·番茄的乙烯信号传导 | 第29-32页 |
·番茄突变体与乙烯受体基因的克隆 | 第29-30页 |
·番茄乙烯受体结构 | 第30-31页 |
·番茄乙烯受体基因的表达模式 | 第31-32页 |
·1-MCP对植物乙烯反应的抑制和应用 | 第32-34页 |
·前期工作基础 | 第34-36页 |
2 反义LeETR1、LeETR2基因在转基因番茄中的遗传分析 | 第36-49页 |
·引言 | 第36页 |
·材料与方法 | 第36-40页 |
·转基因材料 | 第36页 |
·主要试剂 | 第36-37页 |
·番茄种子的消毒 | 第37页 |
·植株生长条件 | 第37页 |
·转基因番茄子代植株的卡那霉素抗性测定 | 第37-38页 |
·番茄根组织GUS化学染色法 | 第38页 |
·番茄叶片DNA的提取(CTAB法) | 第38页 |
·转反义基因番茄T1代植株的PCR检测 | 第38-39页 |
·利用GUS基因在T1代花粉中的表达筛选转反义基因番茄纯合植株 | 第39-40页 |
·结果与分析 | 第40-46页 |
·转反义基因番茄与卡那霉素抗性 | 第40页 |
·卡那霉素浓度与番茄(T1)幼苗生长状况之间的关系 | 第40-41页 |
·转反义基因番茄植株根的GUS检测 | 第41-42页 |
·转反义基因番茄植株的PCR检测 | 第42-44页 |
·利用GUS基因在花粉中的表达获得转反义基因纯合植株 | 第44-46页 |
·讨论 | 第46-49页 |
3 乙烯受体基因LeETR1和LeETR2在转反义基因番茄中的表达特性研究 | 第49-58页 |
·材料与方法 | 第49-54页 |
·植物材料、质粒及菌种 | 第49页 |
·酶与化学试剂 | 第49页 |
·感受态细胞制备及转化 | 第49-51页 |
·感受态细胞制备方法 | 第49-50页 |
·质粒DNA转化大肠杆菌 | 第50页 |
·重组克隆的筛选与鉴定 | 第50页 |
·质粒提取 | 第50-51页 |
·含LeETR1~5 cDNA的pBS质粒的酶切及目的片段的回收 | 第51页 |
·番茄组织总RNA的提取 | 第51-52页 |
·总RNA浓度及纯度测定 | 第52页 |
·RNA浓度测定 | 第52页 |
·RNA纯度测定 | 第52页 |
·RNA电泳 | 第52-53页 |
·变性RNA转移至尼龙膜电泳 | 第53-54页 |
·杂交和放射自显影 | 第54页 |
·结果与分析 | 第54-57页 |
·含LeETR1~4 cDNA的pBS质粒提取 | 第54-55页 |
·LeETR1~4 cDNA pBS质粒的酶切鉴定及目的片段回收 | 第55页 |
·转反义基因番茄叶片里LeETR1和LeETR2基因的表达水平研究 | 第55-57页 |
·讨论 | 第57-58页 |
4 转反义乙烯受体基因番茄植株的形态特性研究 | 第58-71页 |
·引言 | 第58-59页 |
·材料和方法 | 第59-60页 |
·材料 | 第59页 |
·三重反应试验 | 第59页 |
·外植体脱落试验 | 第59页 |
·叶片的偏上生长特性分析 | 第59-60页 |
·番茄花瓣的脱落观察 | 第60页 |
·纤维素酶活性 | 第60页 |
·结果与分析 | 第60-69页 |
·转反义LeETR2基因番茄植株的三重反应特性 | 第60-61页 |
·乙烯对转反义LeETR2基因番茄植株叶柄偏上生长形态的影响 | 第61-62页 |
·番茄叶和花外植体的脱落速度 | 第62-63页 |
·外植体脱落区纤维素酶活性变化 | 第63-64页 |
·LeETR2基因对节间伸长生长的调控 | 第64-66页 |
·LeETR2基因对侧枝伸长生长调控 | 第66-67页 |
·LeETR2基因对花瓣脱落和叶片衰老发育调控 | 第67-69页 |
·讨论 | 第69-71页 |
5 转反义LeETR1和LeETR2基因的番茄果实成熟与衰老生理特性研究 | 第71-83页 |
·引言 | 第71页 |
·材料与方法 | 第71-73页 |
·材料 | 第71页 |
·外源乙烯处理 | 第71-72页 |
·测定项目与方法 | 第72-73页 |
·呼吸强度测定 | 第72页 |
·乙烯释放量测定 | 第72页 |
·果实硬度测定 | 第72页 |
·果实色差测定 | 第72页 |
·番茄果实色素测定 | 第72页 |
·纤维素酶(cellulase)活性测定 | 第72-73页 |
·多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性测定 | 第73页 |
·ACC氧化酶活性测定 | 第73页 |
·结果与分析 | 第73-81页 |
·转反义LeETR1番茄果实呼吸强度和乙烯释放强度的变化 | 第73-74页 |
·转反义LeETR1番茄果实色素物质变化 | 第74-76页 |
·转反义LeETR1番茄果实色泽的变化 | 第76页 |
·转反义LeETR1番茄果实硬度变化 | 第76-77页 |
·转反义LeETR1基因的番茄果实纤维素酶、PME和PG活性的变化 | 第77-78页 |
·转反义LeETR2番茄果实内源乙烯、TCI和硬度的变化 | 第78-80页 |
·外源乙烯处理对果实成熟的影响 | 第80-81页 |
·讨论 | 第81-83页 |
6 1-MCP和乙烯受体基因表达的关系 | 第83-91页 |
·引言 | 第83页 |
·材料和方法 | 第83-85页 |
·试剂 | 第83-84页 |
·番茄材料和处理 | 第84页 |
·测定项目与方法 | 第84-85页 |
·呼吸强度测定 | 第84页 |
·乙烯释放量测定 | 第84页 |
·果实硬度测定 | 第84页 |
·果实色差测定 | 第84页 |
·纤维素酶(cellulase)活性测定 | 第84页 |
·多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性测定 | 第84页 |
·ACC氧化酶活性测定 | 第84-85页 |
·Northern blot analysis | 第85页 |
·结果与分析 | 第85-89页 |
·番茄果实乙烯释放强度的变化 | 第85-86页 |
·1-MCP对番茄果实色泽变化的影响 | 第86-87页 |
·番茄果实硬度变化 | 第87页 |
·番茄果实纤维素酶和PG酶活性的变化 | 第87-88页 |
·番茄果实ACC氧化酶活性的变化 | 第88-89页 |
·LeETR3(NR)在果实中的表达水平 | 第89页 |
·讨论 | 第89-91页 |
7 讨论与总结 | 第91-96页 |
·番茄乙烯受体在乙烯信号传导系统中的分工与乙烯调控 | 第91-93页 |
·对现有番茄乙烯受体调控模式的质疑 | 第93-96页 |
8 后续研究展望 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-113页 |