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乙烯受体基因LeETR1和LeETR2在番茄乙烯受体系统中的生理学功能定位

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-13页
1 文献综述第13-36页
   ·乙烯的生理作用第13-19页
     ·乙烯和根毛第14-15页
     ·乙烯和顶钩第15-16页
     ·细胞壁代谢和果实软化第16-17页
     ·光信号传导与类胡罗卜素积累第17-18页
     ·乙烯的生物合成第18-19页
   ·拟南芥乙烯信号传导系统的感受和传导第19-29页
     ·拟南芥乙烯反应突变体第19-21页
     ·拟南芥乙烯受体家族第21-25页
     ·拟南芥乙烯受体的功能第25-26页
     ·信号向细胞核的传递第26-27页
     ·拟南芥中的乙烯信号感受与转导模型第27-29页
   ·番茄的乙烯信号传导第29-32页
     ·番茄突变体与乙烯受体基因的克隆第29-30页
     ·番茄乙烯受体结构第30-31页
     ·番茄乙烯受体基因的表达模式第31-32页
   ·1-MCP对植物乙烯反应的抑制和应用第32-34页
   ·前期工作基础第34-36页
2 反义LeETR1、LeETR2基因在转基因番茄中的遗传分析第36-49页
   ·引言第36页
   ·材料与方法第36-40页
     ·转基因材料第36页
     ·主要试剂第36-37页
     ·番茄种子的消毒第37页
     ·植株生长条件第37页
     ·转基因番茄子代植株的卡那霉素抗性测定第37-38页
     ·番茄根组织GUS化学染色法第38页
     ·番茄叶片DNA的提取(CTAB法)第38页
     ·转反义基因番茄T1代植株的PCR检测第38-39页
     ·利用GUS基因在T1代花粉中的表达筛选转反义基因番茄纯合植株第39-40页
   ·结果与分析第40-46页
     ·转反义基因番茄与卡那霉素抗性第40页
     ·卡那霉素浓度与番茄(T1)幼苗生长状况之间的关系第40-41页
     ·转反义基因番茄植株根的GUS检测第41-42页
     ·转反义基因番茄植株的PCR检测第42-44页
     ·利用GUS基因在花粉中的表达获得转反义基因纯合植株第44-46页
   ·讨论第46-49页
3 乙烯受体基因LeETR1和LeETR2在转反义基因番茄中的表达特性研究第49-58页
   ·材料与方法第49-54页
     ·植物材料、质粒及菌种第49页
     ·酶与化学试剂第49页
     ·感受态细胞制备及转化第49-51页
       ·感受态细胞制备方法第49-50页
       ·质粒DNA转化大肠杆菌第50页
       ·重组克隆的筛选与鉴定第50页
       ·质粒提取第50-51页
       ·含LeETR1~5 cDNA的pBS质粒的酶切及目的片段的回收第51页
     ·番茄组织总RNA的提取第51-52页
     ·总RNA浓度及纯度测定第52页
       ·RNA浓度测定第52页
       ·RNA纯度测定第52页
     ·RNA电泳第52-53页
     ·变性RNA转移至尼龙膜电泳第53-54页
     ·杂交和放射自显影第54页
   ·结果与分析第54-57页
     ·含LeETR1~4 cDNA的pBS质粒提取第54-55页
     ·LeETR1~4 cDNA pBS质粒的酶切鉴定及目的片段回收第55页
     ·转反义基因番茄叶片里LeETR1和LeETR2基因的表达水平研究第55-57页
   ·讨论第57-58页
4 转反义乙烯受体基因番茄植株的形态特性研究第58-71页
   ·引言第58-59页
   ·材料和方法第59-60页
     ·材料第59页
     ·三重反应试验第59页
     ·外植体脱落试验第59页
     ·叶片的偏上生长特性分析第59-60页
     ·番茄花瓣的脱落观察第60页
     ·纤维素酶活性第60页
   ·结果与分析第60-69页
     ·转反义LeETR2基因番茄植株的三重反应特性第60-61页
     ·乙烯对转反义LeETR2基因番茄植株叶柄偏上生长形态的影响第61-62页
     ·番茄叶和花外植体的脱落速度第62-63页
     ·外植体脱落区纤维素酶活性变化第63-64页
     ·LeETR2基因对节间伸长生长的调控第64-66页
     ·LeETR2基因对侧枝伸长生长调控第66-67页
     ·LeETR2基因对花瓣脱落和叶片衰老发育调控第67-69页
   ·讨论第69-71页
5 转反义LeETR1和LeETR2基因的番茄果实成熟与衰老生理特性研究第71-83页
   ·引言第71页
   ·材料与方法第71-73页
     ·材料第71页
     ·外源乙烯处理第71-72页
     ·测定项目与方法第72-73页
       ·呼吸强度测定第72页
       ·乙烯释放量测定第72页
       ·果实硬度测定第72页
       ·果实色差测定第72页
       ·番茄果实色素测定第72页
       ·纤维素酶(cellulase)活性测定第72-73页
       ·多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性测定第73页
       ·ACC氧化酶活性测定第73页
   ·结果与分析第73-81页
     ·转反义LeETR1番茄果实呼吸强度和乙烯释放强度的变化第73-74页
     ·转反义LeETR1番茄果实色素物质变化第74-76页
     ·转反义LeETR1番茄果实色泽的变化第76页
     ·转反义LeETR1番茄果实硬度变化第76-77页
     ·转反义LeETR1基因的番茄果实纤维素酶、PME和PG活性的变化第77-78页
     ·转反义LeETR2番茄果实内源乙烯、TCI和硬度的变化第78-80页
     ·外源乙烯处理对果实成熟的影响第80-81页
   ·讨论第81-83页
6 1-MCP和乙烯受体基因表达的关系第83-91页
   ·引言第83页
   ·材料和方法第83-85页
     ·试剂第83-84页
     ·番茄材料和处理第84页
     ·测定项目与方法第84-85页
       ·呼吸强度测定第84页
       ·乙烯释放量测定第84页
       ·果实硬度测定第84页
       ·果实色差测定第84页
       ·纤维素酶(cellulase)活性测定第84页
       ·多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性测定第84页
       ·ACC氧化酶活性测定第84-85页
       ·Northern blot analysis第85页
   ·结果与分析第85-89页
     ·番茄果实乙烯释放强度的变化第85-86页
     ·1-MCP对番茄果实色泽变化的影响第86-87页
     ·番茄果实硬度变化第87页
     ·番茄果实纤维素酶和PG酶活性的变化第87-88页
     ·番茄果实ACC氧化酶活性的变化第88-89页
     ·LeETR3(NR)在果实中的表达水平第89页
   ·讨论第89-91页
7 讨论与总结第91-96页
   ·番茄乙烯受体在乙烯信号传导系统中的分工与乙烯调控第91-93页
   ·对现有番茄乙烯受体调控模式的质疑第93-96页
8 后续研究展望第96-97页
参考文献第97-113页

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