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转拟南芥系统获得抗性调节基因(NPR1)烟草的获得及其遗传分析

中文摘要第1-7页
第一章 前言第7-16页
 1.1 转基因植物育种现状第7-8页
 1.2 植物抗病性研究现状及进展第8-12页
  1.2.1 抗病类型第8-9页
  1.2.2 植物抗病机制第9-10页
  1.2.3 植物抗病基因的克隆及应用第10-12页
 1.3 植物系统获得抗性研究现状与进展第12-13页
  1.3.1 植物系统获得抗病性概述第12页
  1.3.2 SAR的信号分子及传导途径第12-13页
 1.4 拟南芥NPR1基因第13-15页
 1.5 本研究目的与意义第15-16页
第二章 材料与方法第16-29页
 2.1 菌株和质粒第16页
 2.2 植物材料第16页
 2.3 培养基及培养条件第16-18页
  2.3.1 烟草基因转化用培养基配方第16-17页
  2.3.2 细菌培养基第17页
  2.3.3 培养条件第17-18页
  2.3.4 菌种保存第18页
 2.4 抗生素第18页
 2.5 常用溶液及缓冲液第18-19页
 2.6 转化方法与步骤第19-20页
  2.6.1 抗生素浓度实验第19页
  2.6.2 转化步骤第19-20页
 2.7 转化效率实验第20页
 2.8 DNA提取第20-23页
  2.8.1 质粒DNA的提取第21-22页
  2.8.2 烟草总DNA的提取第22-23页
 2.9 DNA的酶切、电泳及DNA片段浓度、大小测算第23页
  2.9.1 DNA酶切第23页
  2.9.2 电泳及DNA片段浓度、大小测算第23页
 2.10 DNA片段的回收第23-24页
 2.11 DNA-DNA杂交第24-26页
  2.11.1 Southern转移第24-25页
  2.11.2 探针标记第25页
  2.11.3 Southern杂交第25-26页
 2.12 PCR扩增DNA片段第26-27页
 2.13 ABI DNA自动测序系统测定DNA序列第27页
 2.14 T_0代转化再生植株的种植第27页
 2.15 烟草幼苗抗生素敏感实验第27页
 2.16 转基因烟草幼苗抗生素抗性遗传分析第27-28页
 2.17 T_1代植株培育第28-29页
第三章 结果与分析第29-45页
 3.1 烟草叶片组织对卡那霉素敏感性测定第29-30页
 3.2 不同浓度的激素配比对烟草再生频率的影响第30-31页
 3.3 叶盘侵染时间与菌液浓度对叶盘转化率的影响第31-32页
  3.3.1 叶盘侵染时间对叶盘转化率的影响第31-32页
  3.3.2 不同农杆菌菌液浓度对叶盘转化率的影响第32页
 3.4 生根实验第32-33页
 3.5 农杆菌介导烟草基因转化效率第33-35页
 3.6 转基因烟草T_0代分子鉴定第35-37页
  3.6.1 转基因植株的PCR分析第35-36页
  3.6.2 转基因植株的PCP—Southern Blotting分析第36-37页
 3.7 T_0代植株农艺性状观察第37-38页
 3.8 T_1代烟草幼苗抗生素敏感实验第38-39页
 3.9 转基因植株后代遗传分析第39-40页
 3.10 T_1代植株PCR分析第40-41页
 3.11 T_1代植株PCR产物测序第41-45页
第四章 讨论第45-47页
 4.1 农杆菌介导的烟草转化第45页
 4.2 转化外源基因的稳定性第45-46页
 4.3 拟南芥NPR1基因利用第46-47页
第五章 小结第47-48页
参考文献第48-54页
致谢第54页

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