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致病性迟缓爱德华菌的检测及其胞外产物的免疫效果评价

中文摘要第1-7页
引  言第7-8页
第一篇 文献综述第8-23页
 病原细菌胞外产物(extracellular products,ECP)研究进展第14-8页
 迟缓爱德华菌(Edwarsiella tarda,Et)免疫学研究进展第8-23页
第二篇 实验部分第23-39页
 A 致病性迟缓爱德华菌的检测第23-32页
  1 材料与方法第23-26页
   1.1 菌株和培养第23-24页
   1.2 胞外产物(ECP)的提取及其抗血清的制备第24页
   1.3 毒力因子检测第24-25页
   1.4 致病性ECP的Dot-ELISA检测第25页
   1.5 Et的动物致死性第25-26页
  2 结果第26-29页
   2.1 毒力因子检测第26页
   2.2 ECP的Dot-ELISA检测结果第26页
   2.3 动物致病性第26-29页
  3 讨论第29-32页
 B 致病性爱德华菌检测试剂盒的研制第32-39页
  1 材料与方法第32-34页
   1.1 菌株和培养第32页
   1.2 胞外产物(ECP)的提取及其抗血清的制备第32页
   1.3 Dot-ELISA的建立第32-33页
   1.4 ECP抗血清的冻干及冻干保护剂选择第33页
   1.5 试剂盒的敏感性试验第33-34页
   1.6 试剂盒的稳定性试验第34页
   1.7 试剂盒的特异性试验第34页
  2 结果第34-36页
   2.1 Dot-ELISA条件的优化第34-35页
   2.2 ECP抗血清的冻干及保护剂选择第35页
   2.3 试剂盒的敏感性试验第35页
   2.4 重复性试验第35页
   2.5 保存期试验第35-36页
   2.6 特异性试验第36页
  3 讨论第36-39页
C 迟缓爱德华菌对小鼠和剑尾鱼的免疫保护试验第39-47页
 1 材料与方法第39-41页
  1.1 菌株与培养第39页
  1.2 疫苗的制备第39-40页
  1.3 动物免疫及分组第40页
  1.4 小鼠血清抗体检测第40-41页
  1.5 攻击保护试验第41页
 2 结果第41-43页
  2.1 疫苗的制备第41页
  2.2 小鼠的抗体动态第41-42页
  2.3 小鼠攻击保护试验第42页
  2.4 剑尾鱼的攻击保护试验第42-43页
 3 讨论第43-47页
D 迟缓爱德华菌胞外产物的电泳图谱分析第47-52页
 1 材料与方法第47-48页
  1.1 菌株与培养第47页
  1.2 ECP的提取与抗血清制备第47页
  1.3 ECP的SDS-PAGE第47-48页
  1.4 ECP的免疫电泳分析第48页
 2 结果第48-49页
  2.1 SDS-PAGE第48页
  2.2 免疫转印分析第48-49页
 3 讨论第49-52页
E 迟缓爱德华菌Et溶血素基因真核表达质粒的构建及表达第52-62页
 1 材料第52-53页
 2 方法第53-59页
  2.1 质粒pED102的小量提取第53页
  2.2 引物设计及PCR扩增溶血素基因第53-54页
  2.3 溶血素基因hly真核表达载体的构建第54-56页
  2.4 重组质粒pHL在sp2/0细胞中的瞬时表达第56-59页
 3 结果第59-61页
  3.1 溶血素基因的PCR扩增结果第59页
  3.2 重组质粒的鉴定第59-60页
  3.3 重组质粒pHL在sp2/0细胞中的瞬时表达第60-61页
 4 讨论第61-62页
全文总结第62-63页
英文摘要第63-64页
附录1 致病性迟缓爱德华菌检测试剂盒使用说明书第64-65页
附录2 真核重组质粒pHL测序结果第65-66页
致谢第66页

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