中文摘要 | 第1-7页 |
引 言 | 第7-8页 |
第一篇 文献综述 | 第8-23页 |
病原细菌胞外产物(extracellular products,ECP)研究进展 | 第14-8页 |
迟缓爱德华菌(Edwarsiella tarda,Et)免疫学研究进展 | 第8-23页 |
第二篇 实验部分 | 第23-39页 |
A 致病性迟缓爱德华菌的检测 | 第23-32页 |
1 材料与方法 | 第23-26页 |
1.1 菌株和培养 | 第23-24页 |
1.2 胞外产物(ECP)的提取及其抗血清的制备 | 第24页 |
1.3 毒力因子检测 | 第24-25页 |
1.4 致病性ECP的Dot-ELISA检测 | 第25页 |
1.5 Et的动物致死性 | 第25-26页 |
2 结果 | 第26-29页 |
2.1 毒力因子检测 | 第26页 |
2.2 ECP的Dot-ELISA检测结果 | 第26页 |
2.3 动物致病性 | 第26-29页 |
3 讨论 | 第29-32页 |
B 致病性爱德华菌检测试剂盒的研制 | 第32-39页 |
1 材料与方法 | 第32-34页 |
1.1 菌株和培养 | 第32页 |
1.2 胞外产物(ECP)的提取及其抗血清的制备 | 第32页 |
1.3 Dot-ELISA的建立 | 第32-33页 |
1.4 ECP抗血清的冻干及冻干保护剂选择 | 第33页 |
1.5 试剂盒的敏感性试验 | 第33-34页 |
1.6 试剂盒的稳定性试验 | 第34页 |
1.7 试剂盒的特异性试验 | 第34页 |
2 结果 | 第34-36页 |
2.1 Dot-ELISA条件的优化 | 第34-35页 |
2.2 ECP抗血清的冻干及保护剂选择 | 第35页 |
2.3 试剂盒的敏感性试验 | 第35页 |
2.4 重复性试验 | 第35页 |
2.5 保存期试验 | 第35-36页 |
2.6 特异性试验 | 第36页 |
3 讨论 | 第36-39页 |
C 迟缓爱德华菌对小鼠和剑尾鱼的免疫保护试验 | 第39-47页 |
1 材料与方法 | 第39-41页 |
1.1 菌株与培养 | 第39页 |
1.2 疫苗的制备 | 第39-40页 |
1.3 动物免疫及分组 | 第40页 |
1.4 小鼠血清抗体检测 | 第40-41页 |
1.5 攻击保护试验 | 第41页 |
2 结果 | 第41-43页 |
2.1 疫苗的制备 | 第41页 |
2.2 小鼠的抗体动态 | 第41-42页 |
2.3 小鼠攻击保护试验 | 第42页 |
2.4 剑尾鱼的攻击保护试验 | 第42-43页 |
3 讨论 | 第43-47页 |
D 迟缓爱德华菌胞外产物的电泳图谱分析 | 第47-52页 |
1 材料与方法 | 第47-48页 |
1.1 菌株与培养 | 第47页 |
1.2 ECP的提取与抗血清制备 | 第47页 |
1.3 ECP的SDS-PAGE | 第47-48页 |
1.4 ECP的免疫电泳分析 | 第48页 |
2 结果 | 第48-49页 |
2.1 SDS-PAGE | 第48页 |
2.2 免疫转印分析 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-52页 |
E 迟缓爱德华菌Et溶血素基因真核表达质粒的构建及表达 | 第52-62页 |
1 材料 | 第52-53页 |
2 方法 | 第53-59页 |
2.1 质粒pED102的小量提取 | 第53页 |
2.2 引物设计及PCR扩增溶血素基因 | 第53-54页 |
2.3 溶血素基因hly真核表达载体的构建 | 第54-56页 |
2.4 重组质粒pHL在sp2/0细胞中的瞬时表达 | 第56-59页 |
3 结果 | 第59-61页 |
3.1 溶血素基因的PCR扩增结果 | 第59页 |
3.2 重组质粒的鉴定 | 第59-60页 |
3.3 重组质粒pHL在sp2/0细胞中的瞬时表达 | 第60-61页 |
4 讨论 | 第61-62页 |
全文总结 | 第62-63页 |
英文摘要 | 第63-64页 |
附录1 致病性迟缓爱德华菌检测试剂盒使用说明书 | 第64-65页 |
附录2 真核重组质粒pHL测序结果 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |