| 符号、缩略语词表 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 一 文献综述 | 第12-27页 |
| 1 引言 | 第12页 |
| 2 牛生长激素的生物学意义 | 第12-13页 |
| 2．1 动物生长内分泌轴 | 第12页 |
| 2．2 生长激素的生物学作用 | 第12-13页 |
| 3 制备牛生长激素抗血清体及单克隆抗体的可行性 | 第13-14页 |
| 3．1 牛生长激素分子大小、结构及其抗原性的论述 | 第13页 |
| 3．2 生长激素的种属差异 | 第13-14页 |
| 4 杂交瘤技术制备生长激素抗体的优点 | 第14页 |
| 4．1 杂交瘤技术-一种先进的制备抗体技术 | 第14页 |
| 4．2 用杂交瘤技术生产牛生长激素抗体 | 第14页 |
| 5 杂交瘤技术 | 第14-23页 |
| 5．1 制备抗原 | 第14-15页 |
| 5．2 设计筛选方案和建立筛选方案 | 第15-17页 |
| 5．3 动物免疫 | 第17-18页 |
| 5．4 细胞杂交 | 第18-19页 |
| 5．5 杂交瘤细胞的维持和增殖 | 第19页 |
| 5．6 阳性细胞的筛选 | 第19-20页 |
| 5．7 细胞克隆 | 第20页 |
| 5．8 低温保存杂交瘤细胞及冻存细胞的融化 | 第20页 |
| 5．9 抗体的生产 | 第20-21页 |
| 5．10 抗体的纯化 | 第21页 |
| 5．11 抗体的鉴定 | 第21-23页 |
| 6 生长激素的抗独特型抗体 | 第23-25页 |
| 6．1 抗体的独特型与抗独特型抗体 | 第23页 |
| 6．2 抗独型抗体的网络 | 第23-24页 |
| 6．3 抗独特型抗体的分类及功能 | 第24页 |
| 6．4 生长激素抗独特抗体模拟生长激素的生物学活性 | 第24-25页 |
| 6．4．1 用生长激素抗独特型抗体促进动物生长 | 第24-25页 |
| 6．4．2 生长激素抗独特型抗体促进动物生长中的一些理论探讨 | 第25页 |
| 6．4．2．1 免疫-内分泌网络 | 第25页 |
| 6．4．2．2 受体是否缺乏 | 第25页 |
| 6．4．2．3 生长激素的活性中心是否有免疫原性 | 第25页 |
| 6．4．2．4 制备抗独特型抗体之困难 | 第25页 |
| 7 结语 | 第25页 |
| 8 本实验研究的内容、目标、意义 | 第25-27页 |
| 8．1 研究内容 | 第25-26页 |
| 8．2 研究目标 | 第26页 |
| 8．3 研究意义 | 第26-27页 |
| 二 材料与方法 | 第27-47页 |
| 1 兔抗牛生长激素抗体的产生及鉴定 | 第27-32页 |
| 1．1 实验材料 | 第27-29页 |
| 1．1．1 实验动物 | 第27页 |
| 1．1．2 实验试剂及其配制 | 第27-29页 |
| 1．1．3 实验仪器及器械 | 第29页 |
| 1．2 实验方法 | 第29-32页 |
| 1．2．1 牛生长激素的交联 | 第29-30页 |
| 1．2．2 动物的免疫 | 第30页 |
| 1．2．3 抗血清的制备 | 第30页 |
| 1．2．4 粗提抗血清中的IgG | 第30页 |
| 1．2．5 SPA-SpharoseCL-4B亲和层析法纯化血清中的IgG | 第30-31页 |
| 1．2．6 用与125I--人生长激素的结合率评价抗体效价 | 第31页 |
| 1．2．7 用被动血凝法测定抗体的效价 | 第31页 |
| 1．2．8 粗提IgG特异性的测定 | 第31-32页 |
| 1．2．9 抗血清粗提IgG阻断125I--人生长激素与其粗提肝细胞膜受体结合的试验 | 第32页 |
| 2 牛生长激素单克隆抗体的制备 | 第32-47页 |
| 2．1 动物免疫 | 第32-34页 |
| 2．1．1 实验材料 | 第32-52页 |
| 2．1．2 实验方法 | 第52-34页 |
| 2．2 ELISA方法的建立 | 第34-35页 |
| 2．2．1 实验材料 | 第34页 |
| 2．2．2 实验方法 | 第34-35页 |
| 2．3 小牛血清的制备与检测 | 第35-36页 |
| 2．3．1 实验材料 | 第35页 |
| 2．3．2 实验方法 | 第35-36页 |
| 2．4 细胞杂交及克隆的维护培养 | 第36-41页 |
| 2．4．1 实验材料 | 第36-37页 |
| 2．4．2 实验方法 | 第37-41页 |
| 2．5 阳性杂交瘤的再克隆 | 第41-42页 |
| 2．5．1 实验材料 | 第41页 |
| 2．5．2 实验方法 | 第41-42页 |
| 2．6 单克隆抗体的生产及鉴定 | 第42-47页 |
| 2．6．1 实验材料 | 第423-42页 |
| 2．6．2 实验方法 | 第42-47页 |
| 三、 实验结果 | 第47-58页 |
| 1 兔抗牛生长激素抗体的产 | 第47-50页 |
| 1．1 免疫兔血清与125I-人生长激素的结合率 | 第47页 |
| 1．2 高免兔子不同稀释度抗体与125I-人生长激素的结合率曲线 | 第47-49页 |
| 1．3 被动血凝法测定高免兔抗体的效价 | 第49页 |
| 1．4 用被动血凝阻断法检测粗提IgG特异性的结果 | 第49-50页 |
| 1．5 抗血清粗提IgG阻断125I—人生长激素与其粗提肝细胞膜受体蛋白（肝匀浆）结合的试验结果 | 第50页 |
| 2 单克隆抗体的生产 | 第50-58页 |
| 2．1 动物免疫 | 第51-53页 |
| 2．1．1 最佳免疫方案实验结果 | 第51-52页 |
| 2．1．2 正式免疫的实验结 | 第52-53页 |
| 2．2 ELISA方法的建立 | 第53-54页 |
| 2．2．1 酶标记物的最佳工作浓度 | 第53页 |
| 2．2．2 抗原最佳包被浓度的确立 | 第53-54页 |
| 2．3 小牛血清筛选的结果 | 第54-67页 |
| 2．3．1 小瓶筛选的结果 | 第54-55页 |
| 2．3．2 用细胞培养板筛选的结果 | 第55-67页 |
| 2．4 细胞融合实验结果 | 第0-56页 |
| 2．4．1 PEG毒性试验结果 | 第55-56页 |
| 2．4．2 细胞融合的试验结果 | 第56页 |
| 2．5 阳性细胞的再克隆化结果 | 第56页 |
| 2．6 生产的单克隆抗体的效价 | 第56-58页 |
| 四 实验讨论 | 第58-62页 |
| 1 生长激素与卵清白蛋白的交联 | 第58页 |
| 2 影响生长激素免疫应答的因素 | 第58-59页 |
| 2．1 佐剂的使用 | 第58页 |
| 2．2 注射方式 | 第58-59页 |
| 2．3 动物性别 | 第59页 |
| 2．4 免疫间隔 | 第59页 |
| 2．5 交联生长激素与末交联生长激素 | 第59页 |
| 2．6 动物个体差异 | 第59页 |
| 3 抗体效价的测定 | 第59-60页 |
| 4 生长激素与交联生长激素所产生抗体的特性 | 第60页 |
| 5 融合前小鼠的加强免疫强度与检出阳性克隆的关系 | 第60页 |
| 6 关于细胞杂交杂交技术问题 | 第60-62页 |
| 6．1 关于血清 | 第60-61页 |
| 6．2 关于HAT液 | 第61页 |
| 6．3 关于细胞比例 | 第61页 |
| 6．4 细胞用量 | 第61页 |
| 6．5 关于PEG的毒性试验 | 第61页 |
| 6．6 关于操作 | 第61-62页 |
| 五 小结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
