中文摘要 | 第1-5页 |
文献综述 | 第5-11页 |
1 图位克隆法(Positional Cloning)分离水稻基因 | 第5-8页 |
1.1 基因精细定位 | 第5-6页 |
1.2 构建包含目的区段的重叠群(Contig) | 第6-7页 |
1.3 确定候选基因 | 第7页 |
1.4 功能互补试验 | 第7-8页 |
2 植物雄性不育的研究 | 第8-10页 |
2.1 植物雄性不育的类型 | 第8-9页 |
2.2 光敏核不育水稻研究进展 | 第9-10页 |
3 研究目的和意义 | 第10-11页 |
材料和方法 | 第11-16页 |
1 材料 | 第11-12页 |
2 方法 | 第12-16页 |
2.1 点膜制备高密度MH63BAC文库膜 | 第12-13页 |
2.2 高密度MH63BAC文库膜的变性及固定 | 第13页 |
2.3 分子杂交 | 第13页 |
2.4 细菌质粒抽提 | 第13页 |
2.5 水稻总DNA抽提 | 第13页 |
2.6 DNA浓度测定 | 第13-14页 |
2.7 DNA酶切消化及转膜 | 第14页 |
2.8 BAC重叠群的构建 | 第14页 |
2.9 SSR分析 | 第14页 |
2.10 抽提植物总RNA | 第14页 |
2.11 RNA电泳检测 | 第14-15页 |
2.12 分离mRNA | 第15页 |
2.13 cDNA文库的构建 | 第15页 |
2.14 RNA标记 | 第15-16页 |
结果与分析 | 第16-24页 |
1 pmsl区段物理图谱的构建 | 第16-18页 |
1.1 RFLP筛选BAC文库 | 第16页 |
1.2 重叠群的构建 | 第16-18页 |
2 进一步缩小包含目的基因的染色体区段 | 第18-21页 |
3 cDNA文库的构建 | 第21-22页 |
3.1 RNA抽提 | 第21页 |
3.2 cDNA文库的构建和检测 | 第21-22页 |
4 筛选cDNA文库 | 第22-23页 |
5 BAC克隆21O9中幼穗时期表达序列的确定 | 第23-24页 |
讨论 | 第24-33页 |
1 目的区段重叠群的构建 | 第24-26页 |
1.1 制备BAC文库高密度尼龙膜需要注意的几个问题 | 第24页 |
1.2 降低杂交背景 | 第24页 |
1.3 构建重叠群 | 第24-26页 |
2 物理距离与遗传距离的对应关系 | 第26-27页 |
3 cDNA文库的筛选 | 第27页 |
4 BAC克隆上表达序列的确定 | 第27页 |
5 侯选基因的确定 | 第27-28页 |
6 进一步工作的构想 | 第28页 |
7 优良光敏雄性不育品种的创造 | 第28-29页 |
7.1 分子标记辅助选择(MAS) | 第28-29页 |
7.2 遗传转化 | 第29页 |
8 创造新型雄性不育系的一些思路 | 第29-30页 |
9 序列时代水稻基因的克隆 | 第30-32页 |
9.1 基因的定位和克隆 | 第30-31页 |
9.2 利用现有序列信息开展基因功能鉴定 | 第31-32页 |
9.3 发掘新基因 | 第32页 |
10 本研究中的一些创新 | 第32-33页 |
结束语 | 第33-34页 |
英文摘要 | 第34-35页 |
参考文献 | 第35-39页 |
附录 | 第39-43页 |
致谢 | 第43页 |