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高温诱导的甘蓝抑制性差减杂交文库构建及其ESTs分析

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 前言第11-24页
   ·立论依据第11-12页
     ·研究的目的和意义第11页
     ·主要研究内容第11页
     ·本试验技术路线第11-12页
   ·热害和耐热性概述第12-13页
   ·高温对植物的危害机理第13-15页
     ·蛋白质变性第13页
     ·脂类液化第13-14页
     ·代谢失调及物质损害第14页
     ·毒性损害第14-15页
     ·生化损害第15页
     ·蛋白质破坏第15页
   ·植物热激反应的信号转导机理第15-17页
   ·抑制性差减杂交技术第17-24页
     ·抑制性差减杂交(SSH)技术的基本原理第18-20页
     ·抑制性差减杂交(SSH)技术的基本步骤第20页
     ·抑制性差减杂交(SSH)技术的技术评价第20-21页
     ·抑制性差减杂交(SSH)技术的技术要点第21页
     ·抑制性差减杂交技术在分离植物差异表达基因中的应用第21-24页
2 材料和方法第24-35页
   ·试验材料第24页
     ·甘蓝品种第24页
     ·化学试剂第24页
     ·仪器设备第24页
     ·材料处理第24页
   ·试验方法第24-35页
     ·抑制差减 cDNA 文库的构建第24-32页
     ·反向Northern 杂交初步筛选差异表达第32-35页
3 结果与分析第35-53页
   ·总RNA 提取结果第35页
   ·总RNA 浓度及纯度检测第35-36页
   ·mRNA 质量检测结果第36页
   ·抑制差减杂交检测结果第36-38页
     ·双链 cDNA 合成第36-37页
     ·接头连接效率检测第37-38页
     ·SSH 文库消减效率检测第38页
   ·SSH-cDNA 文库库容及插入片断大小检测第38-39页
   ·阳性克隆的筛选(反向Northern 杂交)结果第39-40页
     ·探针标记检测第39-40页
     ·反向Northern 杂交结果第40页
   ·测序结果第40页
   ·序列分析及功能注释第40-53页
     ·热激蛋白第42-44页
     ·与初级代谢与能量代谢相关的基因第44-45页
     ·信号转导相关基因第45-48页
     ·转运相关基因第48-49页
     ·与蛋白质修饰和加工有关的基因第49-51页
     ·转录相关基因第51-53页
4 讨论第53-55页
   ·材料处理第53页
   ·关于RNA 的提取第53页
   ·SSH 技术用于差异基因研究的优越性第53-55页
5 结论第55-56页
致谢第56-57页
参考文献第57-61页
攻读学位期间发表的学术论文第61页

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