中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-24页 |
·立论依据 | 第11-12页 |
·研究的目的和意义 | 第11页 |
·主要研究内容 | 第11页 |
·本试验技术路线 | 第11-12页 |
·热害和耐热性概述 | 第12-13页 |
·高温对植物的危害机理 | 第13-15页 |
·蛋白质变性 | 第13页 |
·脂类液化 | 第13-14页 |
·代谢失调及物质损害 | 第14页 |
·毒性损害 | 第14-15页 |
·生化损害 | 第15页 |
·蛋白质破坏 | 第15页 |
·植物热激反应的信号转导机理 | 第15-17页 |
·抑制性差减杂交技术 | 第17-24页 |
·抑制性差减杂交(SSH)技术的基本原理 | 第18-20页 |
·抑制性差减杂交(SSH)技术的基本步骤 | 第20页 |
·抑制性差减杂交(SSH)技术的技术评价 | 第20-21页 |
·抑制性差减杂交(SSH)技术的技术要点 | 第21页 |
·抑制性差减杂交技术在分离植物差异表达基因中的应用 | 第21-24页 |
2 材料和方法 | 第24-35页 |
·试验材料 | 第24页 |
·甘蓝品种 | 第24页 |
·化学试剂 | 第24页 |
·仪器设备 | 第24页 |
·材料处理 | 第24页 |
·试验方法 | 第24-35页 |
·抑制差减 cDNA 文库的构建 | 第24-32页 |
·反向Northern 杂交初步筛选差异表达 | 第32-35页 |
3 结果与分析 | 第35-53页 |
·总RNA 提取结果 | 第35页 |
·总RNA 浓度及纯度检测 | 第35-36页 |
·mRNA 质量检测结果 | 第36页 |
·抑制差减杂交检测结果 | 第36-38页 |
·双链 cDNA 合成 | 第36-37页 |
·接头连接效率检测 | 第37-38页 |
·SSH 文库消减效率检测 | 第38页 |
·SSH-cDNA 文库库容及插入片断大小检测 | 第38-39页 |
·阳性克隆的筛选(反向Northern 杂交)结果 | 第39-40页 |
·探针标记检测 | 第39-40页 |
·反向Northern 杂交结果 | 第40页 |
·测序结果 | 第40页 |
·序列分析及功能注释 | 第40-53页 |
·热激蛋白 | 第42-44页 |
·与初级代谢与能量代谢相关的基因 | 第44-45页 |
·信号转导相关基因 | 第45-48页 |
·转运相关基因 | 第48-49页 |
·与蛋白质修饰和加工有关的基因 | 第49-51页 |
·转录相关基因 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
·材料处理 | 第53页 |
·关于RNA 的提取 | 第53页 |
·SSH 技术用于差异基因研究的优越性 | 第53-55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第61页 |